高中生物選修1《生物技術實踐》生物技術操作流程的研究

何植成 余麗芳

摘要：利用知識的共性，構建高中生物選修1《生物技術實踐》生物技術操作流程的知識網絡，使本冊的生物技術操作過程集中成一個專題知識網，舉例說明如何考核和運用，并總結出一些學習方法，指導老師的教學和學生的學習，以提高教學質量。

關鍵詞：實驗操作;過程

一、考情變化分析

在生物知識和能力考核中對生物技術操作流程的考核是一個重要內容，因為它既可以考核學生對實驗知識的全面掌握，又可以考核學生的實操能力。考核的形式有選擇題和填空題。

二、生物技術操作過程的內容

1.果酒的制作流程：挑選葡萄--沖洗--榨汁--酒精發酵---果酒

2.果醋的制作流程：挑選葡萄--沖洗--榨汁--酒精發酵--醋酸發酵--果醋

3.腐乳的制作流程：讓豆腐上長出毛霉--加鹽腌制--加鹵汁裝瓶--密封腌制

4.測定亞硝酸鹽含量的操作流程：配制溶液--制備標準顯色劑--制備樣品處理液--比色

5.制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的操作流程：計算--稱量--溶化--滅菌--倒平板

6.倒平板操作流程：

（1）將滅過菌的培養皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養基的錐形瓶，左手拔出棉塞。（2）右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰。（3）用左手的拇指和食指將培養皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養基（約10～20ml）倒入培養皿，左手立即蓋上培養皿的皿蓋。（4）等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上。

7.平板劃線操作流程：（1）將接種環放在火焰上灼燒，直到接種環燒紅。（2）在火焰旁冷卻接種環，并打開棉塞。（3）將試管口通過火焰。（4）將已冷卻的接種環伸入菌液中，沾取一環菌液。（5）將試管口通過火焰，并塞上棉塞。（6）左手將皿蓋找開一條縫，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養基。（7）灼燒接種環，待其冷卻后，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作，在三、四、五區域內劃線。注意不要將最后一區的劃線與第一區相連。（8）將平板倒置，放入培養箱中培養。

8.涂布平板操作流程：

（1）將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。（2）取少量菌液（不超過0.1ml），滴加到培養基表面。（3）將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10S。（4）用涂布器將菌液均勻地涂布在培養基表面。涂布時可轉動培養皿，使涂布均勻。

9.分解纖維素細菌的分離操作流程：

土壤取樣---選擇培養---梯度稀釋---將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上--挑選產生透明圈的菌落

10.菊花組織培養的操作流程：

（1）制備MS固體培養基;（2）外植體消毒;（3）接咱;（4）培養;（5）移栽;（6）栽培。

11.制備MS固體培養基的操作流程：配制各種母液--配制培養基--滅菌

12.制備固定化酵母菌細胞的操作流程：

（1）酵母細胞的活化。（2）配制物質的量濃度為0.05mol/L的CaCl2 溶液。（3）配制海藻酸鈉溶液。（4）海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合。（5）固定化酵母細胞。

13.DNA粗提取與鑒定的操作流程：

（1）實驗材料的選取。（2）破碎細胞，獲取含DNA的濾液。（3）去除濾液中的雜質。（4）DNA的析出與鑒定。

14.生物PCR反應過程：（1）變性。（2）復性。（3）延伸。

15.血紅蛋白的提取和分離：（1）紅細胞的洗滌。（2）血紅蛋白的釋放。（3）分離血紅蛋白溶液。（4）透析。

三、生物技術操作過程的考試例題

例題：高三某同學用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定的實驗，其中操作錯誤的是（）

A.在加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨

B.使用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA

C.加入酒精后，用玻璃棒輕緩攪拌

D.加二苯胺試劑搖勻后，沸水浴加熱

四、如何高效復習實驗操作過程

1.通過做實驗，熟悉操作過程。有條件的學校，都讓學生親自把實驗做一次，從而熟悉整個實驗操作流程，這樣比齋看書強很多。

2.讓學生做基礎訓練題，填寫實驗過程和相關的專業術語，使學生記住相關的過程，并能精確書寫相關的生物專業術語。

3.印制相關的變式練習題，讓學生先做，再較對答案，提升對知識理解和運用能力。

4.幫助學生構建實驗過程知識網絡，用知識的共性進行組網，形成一個相對獨立的知識體系。

5.編制實驗過程專題練習卷，進行專題訓練。

參考文獻：

[1]李靜.談談高中生物學選修課的復習方法[J].中學生物學，2006.05.15.

課題項目：

廣東省肇慶市課題《通過重組高中生物知識來培養學生生物核心素養》。