陰道微生態環境與人乳頭瘤病毒感染的關系研究

劉潤麗

【摘要】 目的：探究陰道微生態環境與人乳頭瘤病毒（HPV）感染的關系。方法：選取2017年1月-2019年11月來本院婦科門診檢查的患者422例，依據HPV檢查結果分為研究組（HPV陽性）與對照組（HPV陰性），每組211例。兩組均行陰道環境檢查、宮頸液基細胞學檢查及高危型HPV感染檢查等。分析兩組陰道微生態指標、陰道微生態異常、高危型HPV感染情況、陰道微生態對高危型HPV感染的影響。結果：研究組細菌陽性率、陰道清潔度異常率均高于對照組（P<0.05）;研究組乳酸桿菌匱乏或量少、H2O2缺乏發生率均高于對照組（P<0.05）;高危型HPV感染者46例（21.8%），其中感染率最高的混合感染17例（8.1%），其次為HPV16型16例（7.6%），第三為HPV18型13例（6.2%）;細菌性陰道炎、乳酸桿菌匱乏或量少均為高危型HPV感染的獨立性危險因素（OR=3.962、4.478，P<0.05）。結論：女性陰道微生態環境與HPV感染存在密切相關，陰道微生態環境異常因素中乳酸桿菌匱乏或量少、細菌性陰道炎均為增加HPV感染風險影響性因素，為臨床HPV陽性治療提供指導性意見。

【關鍵詞】 陰道微生態環境 人乳頭瘤病毒感染 關系

[Abstract] Objective： To explore the relationship between vaginal micro ecological environment and human papillomavirus （HPV） infection. Method： From January 2017 to November 2019， 422 patients who came to our gynecological clinic for examination were divided into the study group （HPV positive） and the control group （HPV negative） according to the results of HPV yin-yang examination， 211 cases in each group. Vaginal environmental examination， cervical fluid based cytology and high-risk HPV infection were performed in two groups. The vaginal microecology index， abnormal vaginal microecology， high-risk HPV infection， and the influence of vaginal microecology on high-risk HPV infection of two groups were analyzed. Result： The positive rate of bacteria and abnormal rate of vaginal cleanliness in the study group were higher than those in the control group （P<0.05）. The lack or small amount of Lactobacillus and the incidence of H2O2 deficiency in the study group were higher than those in the control group （P<0.05）. 46 cases （21.8%） were high risk HPV infection， of which 17 cases （8.1%） were mixed infection with the highest infection rate， followed by 16 cases （7.6%） of HPV16 type， and the third was 13 cases （6.2%） of HPV18 type. Bacterial vaginitis and lack or small amount of Lactobacillus were independent risk factors for high-risk HPV infection （OR=3.962， 4.478， P<0.05）. Conclusion： The vagina micro ecological environment in women is closely related to HPV infection. The lack or small amount of lactobacillus and bacterial vaginitis among the abnormal factors of the vagina micro ecological environment are influencing factors to increase the risk of HPV infection， providing guidance for the treatment of clinical HPV positive.

[Key words] Vagina micro ecological environment Human papillomavirus infection Relationship

First-authors address： Jiamusi University Grand Hospital， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.21.035

現代醫學理論依據人乳頭瘤病毒（HPV）致病率或致癌危險性的高低分為低危型與高危型，其中后者感染會導致生殖器疣，病情進展甚至會誘發生殖器癌，如宮頸癌等[1]。相關臨床研究報道HPV感染與女性陰道微生態環境存在一定的相關性。在婦科中評價女性陰道乳酸桿菌功能的指標包含過氧化氫（H2O2）水平、陰道pH值及白細胞酯酶等[2]。部分研究表明性活躍的女性人群中，其細菌性陰道炎、高危型HPV感染存在一定的共生性，且經常同時發生。而在婦科檢查中發現部分陰道炎會導致女性陰道中乳酸桿菌匱乏等，而乳酸桿菌異常性降低則會致使女性宮頸黏膜的屏障遭受破壞，導致H2O2水平降低，進而增加高危型HPV感染的風險性[3-4]。因此，本研究對陰道微生態環境與HPV感染的關系進行探究。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月-2019年11月來本院婦科門診檢查的患者422例。納入標準：（1）月經周期規律，且無陰道出血癥狀;（2）7 d內未進行陰道治療或操作;（3）7 d內無性生活;（4）均為已生育女性;（5）入院檢查前未服用任何抗炎抗菌藥物。排除標準：（1）哺乳期或妊娠期;（2）患其他器官或系統嚴重疾病;（3）無性生活史;（4）1年內行宮頸液基細胞學檢查存在異常。依據HPV檢查結果分為研究組（HPV陽性）與對照組（HPV陰性），每組211例。該研究已經倫理學委員會批準。

1.2 方法 兩組患者入院后均采用截石位收集陰道分泌物及宮頸分泌物等，均行陰道環境檢查、宮頸液基細胞學檢查、高危型HPV感染檢查等。（1）陰道微生態環境檢查。截石位采集陰道分泌物，檢測陰道中乳酸桿菌、滴蟲、念珠菌、細菌、H2O2、白細胞酯酶（LE）等，同時檢查陰道清潔度。（2）宮頸液基細胞學檢查。運用液基波層細胞制片檢查，同時使用檢查特制的細胞刷，收集患者宮頸上層細胞，將其放置在干燥瓶中，運用離心機離心后去除雜質，將其轉移至細胞檢查特制的顯微鏡玻片上，采用染色劑染色后，制成涂片，將其放置在電子顯微鏡下觀察。參照臨床診斷中陰道細胞學（TBS）分類標準劃分：①鱗狀細胞：不典型鱗狀細胞、低度鱗狀上皮內病變（LSIL）及高度鱗狀上皮內病變（HSIL）;②腺上皮細胞：不典型腺上皮細胞、宮頸腺癌。（3）高危型HPV感染檢查。運用基因第二代雜交捕獲技術（HC-Ⅱ）檢查，其中配套試劑盒為華大生物科技（武漢）有限公司提供。取截石位收集受試者宮頸黏液脫落細胞，制成標本，后提取DNA，經過變性裂解，釋放出DNA單鏈，后經過雜交等形成RNA，在經過DNA復合物捕獲、加入堿性磷酸酶底物反應、進一步沖洗，產生化學信號，使用儀器讀取信號，依據標準加以判斷陰陽性，15種高危型HPV檢測值RLU/CO>1.0 pg/mL則判定為陽性。

1.3 觀察指標與評定標準

1.3.1 兩組陰道微生態環境指標比較。比較兩組陰道分泌物情況（滴蟲、念珠菌、細菌），同時記錄兩組陰道清潔度。陰道清潔度分級：1度（以陰道桿菌為主，可見大量上皮細胞）、2度（部分為陰道桿菌，存在上皮細胞，但也存在部分膿性細胞及雜菌）、3度（存在少量陰道桿菌及上皮細胞，但存有大量膿性細胞及雜菌）、4度（未存在陰道桿菌，基本為膿性細胞及雜菌）[5]，其中1～2度為正常，3～4度為異常。

1.3.2 兩組陰道微生態異常情況比較。統計兩組乳酸桿菌匱乏或量少、H2O2缺乏及LE陽性例數，并進行對比。

1.3.3 分析研究組14種高危型HPV類型、單獨分型HPV16型及HPV18型及混合HPV感染情況。

1.3.4 采用logistic回歸方程分析陰道微生態環境與高危型HPV感染的影響因素。

1.4 統計學處理 采用SPSS 23.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。多因素分析采用logistic回歸方程。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 研究組，年齡25～48歲，平均（34.1±2.9）歲;月經周期28～30 d，平均（29.1±0.6）d;初次妊娠年齡23～35歲，平均（28.5±3.5）歲;孕次1～4次，平均（2.2±0.2）次;每月性生活頻率3～15次，平均（7.2±0.3）次。對照組，年齡27～47歲，平均（35.2±2.5）歲;月經周期27～30 d，平均（28.6±0.7）d;初次妊娠年齡24～34歲，平均（29.0±3.1）歲;孕次2～4次，平均（2.6±0.4）次;每月性生活頻率5～12次，平均（7.6±0.5）次。兩組年齡、月經周期、初次妊娠年齡等臨床基線資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組陰道微生態環境指標比較 研究組細菌陽性率、陰道清潔度異常率均高于對照組（P<0.05），見表1。

2.3 兩組陰道微生態異常情況比較 研究組乳酸桿菌匱乏或量少及H2O2缺乏發生率均高于對照組（P<0.05），見表2。

2.4 高危型HPV感染情況 研究組211例患者中，高危型HPV感染者46例（21.8%），其中感染率最高為混合感染17例（8.1%），其次為HPV16型16例（7.6%），第三為HPV18型13例（6.2%）。

2.5 陰道微生態環境與高危型HPV感染影響因素分析 細菌性陰道炎、乳酸桿菌匱乏或量少為高危型HPV感染的獨立性危險因素（OR=3.962、4.478，P<0.05），見表3。

3 討論

從解剖學結構來看，女性陰道上端相連宮體與輸卵管，且直接連通腹腔，而陰道下端則直接連通外界;解剖結構中其開口處的前方位置為尿道口，其后方與肛門相連，因此極易發生感染及污染[6]。在陰道微生態環境中存在各種微生物、陰道桿菌等，又可能因為性接觸而被帶入其他的病原體，增加陰道及周圍組織器官病變或感染的可能性[7]。HPV是一種乳多空病毒科中乳頭瘤空泡病毒A屬，呈現為球形，是DNA病毒的一種，機體感染后可誘發黏膜鱗狀上皮細胞增殖，進而在皮膚上形成贅生物，如扁平疣、尖銳濕疣等[8-9]。從HPV感染人群檢查中發現部分患者呈現持續性感染狀態，且感染類型為高危型HPV，宮頸異常性病變為上皮內瘤樣病變，若不給予有效治療，持續性感染則會進展為早期宮頸癌[10-11]。因此在宮頸癌診斷中高危型HPV為宮頸癌發病的主要病因，且臨床檢查發現所有宮頸癌患者的HPV檢查呈現陽性，且HPV16型、HPV18型感染率高達70%左右[12-13]。在疾病感染的初期診斷時高危型HPV感染率較低，難以判定疾病進展情況，因此研究HPV患者與陰道微生態環境關系能有效預防控制病情進展，為女性患者的早期治療及預防提供理論支持。

陰道微生態環境是人體生態系統中較為復雜一個，其對預防及控制微生物等入侵具有顯著的功效[14]。在陰道微生態中乳酸桿菌為優勢菌的一種，能合成釋放乳酸，降低陰道pH值，同時抑制其他病毒的增生及感染，除此之外還具有競爭粘附作用，其能合成釋放過氧化氫，以此殺死陰道有害微生物，維持陰道微生態平衡性[15-16]。本研究主要對陰道微生態環境與HPV感染的關系詳加探究，結果顯示：研究組細菌陽性率、陰道清潔度異常率均高于對照組（P<0.05）。提示HPV陽性患者中細菌性陰道炎發生率較高，HPV陽性率越高患者發生細菌性陰道炎的概率就越大，因此在陰道清潔度檢查時其異常率高于HPV陰性患者，但分析影響因素時，未將陰道清潔度異常列入其中，主要原因為該項指標異常與陰道炎發生率存在一定的相關性，且陰道清潔度異常患者數量與該組滴蟲、念珠菌及細菌陽性例數之和幾乎相等，因此將該項排除。本研究結果顯示，研究組乳酸桿菌匱乏或量少、H2O2缺乏發生率均于對照組（P<0.05）。表明在陰道微生態環境檢查時HPV陽性患者陰道中乳酸桿菌量下降，降解粘蛋白的細菌數量增加，損壞宮頸黏膜的屏障，導致H2O2分泌量減少，出現H2O2缺乏的情況，因此該影響因素可與乳酸桿菌匱乏或量少合并為同一影響因素，所以在陰道微生態環境與高危型HPV感染影響性因素分析中可將其去除。原因為H2O2缺乏與HPV陽性患者陰道中乳酸桿菌量降低密切相關。本研究結果顯示，研究組中，高危型HPV感染者46例（21.8%），其中感染率最高為混合感染17例（8.1%），其次為HPV16型16例（7.6%），第三為HPV18型13例（6.2%）。提示在HPV陽性感染者中主要為HPV16型、HPV18型感染，因此在臨床HPV檢查中如若出現以上兩種類型，則提示存在陰道或宮頸病變的風險性。本研究結果顯示，細菌性陰道炎、乳酸桿菌匱乏或量少均為高危型HPV感染的獨立性危險因素（OR=3.962、4.478，P<0.05）。提示兩種影響性因素增加患者陰道及宮頸病變的風險性。相關臨床研究中報道HPV16型/18型感染極有可能與女性陰道及黏膜中菌群（乳酸桿菌）失衡密切相關，陰道中乳酸桿菌分為惰性乳酸桿菌、卷曲乳酸桿菌及加氏乳酸桿菌等，均具有為維持陰道微生態平衡的作用，一旦其水平降低則會導致陰道中pH值升高，進而導致H2O2缺乏或抗細菌等抗微生物的因子合成降低，減低去抑制其他病原微生物入侵的作用，繼而增加HPV感染風險性[17-18]。而臨床研究中發現細菌性陰道炎的發生與陰道微環境中乳酸桿菌量降低密切相關，其量降低或匱乏，則導致陰道中降解粘蛋白的細菌數量增加，進而損壞宮頸黏膜的屏障，導致H2O2缺乏，增加陰道感染高危型HPV的風險性，因此細菌陰道炎、乳酸桿菌量缺乏或少可作為持續性HPV感染的獨立性影響因素[19-20]。而滴蟲性陰道炎、霉菌性陰道炎及混合性陰道炎均未增加高危型HPV感染的風險性，主要原因為臨床診斷中發現上述兩種陰道病變兩組檢測時差異均無統計學意義（P>0.05），但可能納入例數較少，期望后期能增加納入例數做進一步研究。

綜上所述，女性陰道微生態環境與HPV感染存在密切相關，陰道微生態環境異常因素中乳酸桿菌匱乏或量少、細菌性陰道炎均為增加HPV感染風險影響性因素，為臨床HPV陽性治療提供指導性意見。

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（收稿日期：2020-01-06） （本文編輯：程旭然）