97例ABO疑難血型鑒定的血標本因素分析及其控制措施*

楊　琳，張勇萍#，楊世明△，安　寧，李　丹，穆士杰▲

(1.第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院輸血科，西安 710038；2.第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院輸血科，西安 710032)

·臨床研究·

97例ABO疑難血型鑒定的血標本因素分析及其控制措施*

楊琳1，張勇萍1#，楊世明1△，安寧2，李丹1，穆士杰1▲

(1.第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院輸血科，西安 710038；2.第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院輸血科，西安 710032)

摘要:目的分析引起ABO疑難血型鑒定的血標本因素及其控制措施。方法采用微柱凝膠法對患者血標本進行ABO血型正、反定型，對有疑問的血標本再用試管法進行復檢，并做吸收放散試驗、抗人球蛋白試驗、不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定進行確認。結果在引起ABO疑難血型鑒定的97例血標本中，生理因素血標本14例(14.4%)，疾病因素血標本27例(27.9%)，臨床治療因素血標本16例(16.5%)，其他因素血標本40例(41.2%)。在引起ABO血型正、反定型不相符的97例血標本中，正定型不相符6例(6.2%)，反定型不相符71例(73.2%)，正 、反定型均不相符20例(20.6%)。結論血標本因素可引起ABO疑難血型鑒定，在血標本采集、保存及送檢過程中應進行規(guī)范化操作，保證血標本采集的正確性和質(zhì)量要求，以確保ABO血型鑒定結果的準確性和臨床輸血治療的安全有效。

關鍵詞:血液標本；影響因素；ABO血型；疑難血型鑒定；控制措施；臨床輸血

ABO血型鑒定結果的準確性是確保臨床輸血安全和有效的關鍵措施，符合試驗要求的血標本是獲得ABO血型鑒定結果正確性的前提條件[1]。因此，對ABO血型鑒定必須進行正定型和反定型相結合，而且正、反定型相符才能確定ABO血型。在血型鑒定中血標本因素可引起ABO正、反定型不相符等疑難血型，給判定結果和輸血及時性帶來不利影響[2]。本研究回顧性分析了引起97例血標本ABO血型正、反定型不相符等疑難鑒定的原因及其相應的控制措施，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

1.1血標本來源選取2010年1月1日至2014年12月31日由唐都醫(yī)院臨床護士采集送輸血科引起ABO疑難血型鑒定的血標本97例。

1.2儀器與試劑抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-D、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-M、抗-N、抗-P1，ABO血型反定型細胞、抗體篩選細胞、抗體鑒定譜細胞、抗人蛋白試劑由上海市血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供；ABO、RhD血型檢測卡及抗人球蛋白卡為瑞士迖亞美公司產(chǎn)品，KA-2200型免疫血液學離心機為久保田公司產(chǎn)品，恒溫水浴箱為金壇恒豐儀器廠產(chǎn)品。

1.3檢測方法

1.3.1ABO及亞型的檢測采用微柱凝膠法對患者進行ABO血型正、反定型，正、反定型不相符時，正定型加入抗-AB、抗-A1及抗-H定型試劑，反定型增加A2細胞及作進行吸收放散試驗。

1.3.2冷凝集素的檢測將患者血清與自身或O型紅細胞混合置4 ℃冰箱4 h進行冷凝集試驗；用37 ℃生理鹽水將患者紅細胞洗滌3次后進行ABO血型檢測，并在37 ℃條件下進行試驗及觀察結果；對高效價的冷凝集素，用O型紅細胞吸收患者血清中冷凝集素后再進行反定型。

1.3.3自身抗體的檢測將患者紅細胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次后進行直接抗人球蛋白試驗；用洗滌或放散后的紅細胞將患者血清中的自身抗體吸收后再進行反定型；用洗滌后的自身紅細胞吸收血清中的自身抗體后，再進行同種抗體檢測。

1.3.4不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定對出現(xiàn)ABO血型正、反定型不相符的血標本，采用抗體篩選細胞進行不規(guī)則抗體篩選，對結果陽性的血標本再采用10個譜細胞進行抗體特異性鑒定，對檢出的特異性抗體再采用含有相應抗原的紅細胞測定抗體效價。

2結果

在引起ABO疑難血型鑒定的97例血標本中，生理因素血標本14例(14.4%)，疾病因素血標本27例(27.9%)，臨床治療因素血標本16例(16.5%)，其他因素血標本40例(41.2%)。在引起ABO血型正、反定型不相符的97例血標本中，正定型不相符6例(6.2%)，反定型不相符71例(73.2%)，正、反定型均不相符20例(20.6%)，見表1。

表1　　97例血標本因素對ABO血型鑒定結果的影響

注：(+)表示陽性，(-)表示陰性；*表示37 ℃處理后。

3討論

輸血前血標本采集的正確性和規(guī)范化操作是保證ABO血型鑒定結果準確性和輸血安全有效的根本保證[3]。但血標本可受采集、生理、疾病及治療等多種因素的影響而導致ABO疑難血型鑒定[4]。本研究引起ABO疑難血型鑒定的97例血標本中，新生兒血清7例，新生兒剛出生時抗體尚未產(chǎn)生或效價很低，導致反定型時不凝集，可加大血清量、延長孵育時間或置4 ℃冰箱5～10 min后觀察結果[5]。ABO亞型7例，因亞型紅細胞的抗原性較弱，與抗-A或抗-B有時不凝集。正定型中增加抗-A1、抗-AB及抗-H，或用吸收放散試驗進行確認[6]。

疾病因素中，高效價冷凝集素17例，健康人血清中的冷凝集素效價在16以下，超過28 ℃通常不凝集。但在病毒性肺炎、傳染性單核細胞增多癥及自身免疫性溶血性貧血患者血清中可含有高效價病理性冷凝集素，干擾血型鑒定結果。將紅細胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次，在37 ℃條件下進行試驗和觀察結果，可排除冷凝集素對血型鑒定的干擾[7]。自身抗體10例，自身免疫性溶血性貧血患者常伴有自身或同種抗體，與所有供血者或自身紅細胞均發(fā)生凝集[8]。將紅細胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次進行正定型，用吸收自身抗體后的血清進行反定型。

臨床治療因素中，大量輸液處采集血標本3例，在大量輸液處采集的血標本導致血液嚴重稀釋，反定型時不凝集或凝集很弱，引起正、反定型不相符[9]。在輸液對側肢體采集血標本，防止血液被稀釋。異基因干細胞移植血標本13例，白血病等患者在進行異基因造血干細胞移植期間可出現(xiàn)嵌合體現(xiàn)象，使正定型呈混合凝集，導致血型判定困難[10]。可通過了解患者移植前血型鑒定資料和供者的血型或進行基因檢測確認。

其他因素中，不規(guī)則抗體血標本20例，尤其以抗-M、抗-Lea及抗-E引起ABO血型正、反定型不相符者較多見。對患者血清進行不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定，確定了抗體特異性，選擇不含相應抗原的血液輸注[11]。抗凝血標本12例，用抗凝血標本作進行反定型時，血漿中的纖維蛋白可導致試劑紅細胞出現(xiàn)弱凝集[12]。將血標本置37 ℃水浴10 min，或用血清標本進行反定型。未抗凝血標本6例，用從凝血塊上洗下的紅細胞進行正定型可形成混合凝集[13]。采用抗凝血紅細胞進行正定型。溶血標本2例，溶血標本反定型時上清液呈紫紅色、細胞顆粒小或凝集強度降低，導致血型判定困難[14]。采用新鮮血標本進行血型鑒定和交叉配血即可避免。

綜上所述，引起ABO疑難血型鑒定的原因較多，血標本采集的正確性和質(zhì)量狀況是關鍵因素，首先應確保血標本來自受血者本人，堅持血型初檢和復檢2次鑒定的對比制度[15]。輸血科技術人員在遇到ABO疑難血型鑒定時，應結合臨床病例資料進行綜合分析，并采用針對性試驗進行驗證，以確保血型鑒定結果的準確性和臨床輸血治療的安全有效[16]。

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基金項目：陜西省自然科學基金資助項目(2009JM4006)；陜西省社發(fā)公關資助項目(2010K15-03-07)。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.033

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)11-1531-02

(收稿日期：2016-01-18修回日期：2016-03-22)

#同為第一作者。△通訊作者，E-mail：shxkyshm@fmmu.edu.cn；▲通訊作者，E-mail：musj1963@fmmu.edu.cn。