兒童與成人急性B淋巴細胞白血病免疫表型的差異分析

李 祎 吳奕飛 王朝林

急性B淋巴細胞白血病(B-ALL)病情急重,若臨床未能采取有效治療措施,隨著疾病進展,將會威脅患者生命[1-2]。臨床主要依據細胞形態學、免疫分型、遺傳特征診斷B-ALL。流式細胞術免疫表型檢查是對細胞成熟期間的表層抗原和細胞質抗原表達水平進行分析,以此對白血病展開規范化的免疫學劃分,從而明確細胞分化情況,判斷病情嚴重程度[3]。但B-ALL可發生在細胞代謝的不同階段,且不同階段患者的臨床特征和預后皆不相同,臨床需分析其免疫表型的差異方能采取針對性治療措施[4-5]。然而對于兒童和成人免疫表型的差異仍缺乏有效探究。鑒于此,本研究選擇2018年1月至2021年12月于我院行白血病免疫分型檢測的B-ALL患兒98例和成人B-ALL患者92例作為研究對象,分析兒童和成人免疫表型的差異,為臨床采取合適的治療措施提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月至2021年12月于我院行白血病免疫分型檢測的B-ALL患兒98例和成人B-ALL患者92例作為研究對象。其中98例B-ALL患兒中男性52例,女性46例;年齡1～14歲,平均年齡(8.21±1.45)歲。92例成人B-ALL患者中男性49例,女性43例;年齡18～72歲,平均年齡(46.71±6.93)歲。

1.2 檢測方法

收集初診兒童和成人患者骨髓2 ml,應用肝素抗凝;在每個檢測管中放入(1×107/mL)100 μL的標本,并應用四色免疫熒光法(四種熒光素為FITC、PE、PE-Cy5、PE-Cy7)標記抗體。所用單克隆抗體包括異硫氰酸熒光素(FITC)、別藻青蛋白(APC)標記CD19、CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、CD10、cTdT、CD34、HLA-DR、CD38、CD13、CD15、CD33、CD117及同型對照IgG等。所有單克隆體抗原及陰性對照均來自美國Becton Dickison公司。標記抗體后,應用流式細胞儀(美國碧迪公司,型號BD FACSCanto II,批準文號:20152221424)和CellQuest軟件檢測細胞表面標志,每個檢測管獲取5000個細胞并展開相關分析,再通過CD45/側散射(SSC)雙參數散點圖設門法識別幼稚細胞,計算幼稚細胞的百分比,并分析該幼稚細胞群中各白血病相關抗原的陽性率。陽性標準為:胞質或胞核抗原cyIgM、CyCD79a、cTdT≥10%為陽性,其他抗原表達陽性率≥20%為陽性。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 兒童與成人B-ALL患者免疫分型分類

在98例B-ALL兒童和92例B-ALL成人患者中,依據抗原表達的差異可分為三個階段:早前B-ALL(Pro-B-ALL)、普通B-ALL(Com-B-ALL)、前B-ALL(Pre-B-ALL);在B-ALL分類中,Com-B-ALL和Pre-B-ALL類型兒童與成人患者所占比例相比,差異無統計學意義(P>0.05);Pro-B-ALL類型患者中兒童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%),差異有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 兒童與成人B-ALL患者免疫分型分類(例,%)

2.2 兒童與成人B-ALL患者B系抗原表達情況

在全部的B-ALL患者中,共190例,B系抗原CD19陽性表達率最高,兒童與成人均為100.00%,其次為CD22(兒童100.00%、成人98.91%)、cyCD79a(兒童100.00%、成人96.74%);兒童與成人B-ALL患者CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、cTdT陽性率相當,差異無統計學意義(P>0.05);兒童B-ALL的CD10陽性率(97.96%)高于成人患者(88.04%),差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 兒童與成人B-ALL患者B系抗原表達情況(例,%)

2.3 兒童與成人B-ALL患者干/祖細胞抗原表達情況

B-ALL兒童的HLA-DR、CD38陽性率與成人B-ALL患者相當,差異無統計學意義(P>0.05);B-ALL兒童的CD34陽性率(70.41%)低于成人患者(84.78%),差異有統計學意義(P<0.05),見表3。

表3 兒童與成人B-ALL患者干/祖細胞抗原表達情況(例,%)

2.4 兒童與成人B-ALL患者伴髓系抗原表達情況

兒童與成人B-ALL患者CD13、CD117陽性率相當,差異無統計學意義(P>0.05);B-ALL兒童的CD33、CD15陽性率低于成人患者,差異有統計學意義(P<0.05),見表4。

表4 兒童與成人B-ALL患者伴髓系抗原表達情況(例,%)

3 討論

B-ALL是臨床常見的惡性血液疾病,依據骨髓中正常B細胞抗原分化特點可將其分為Com-B-ALL、Pre-B-ALL、Pro-B-ALL三種類型[6-7]。B-ALL可發于各個年齡階段,以兒童最為常見,成人患者隨著發病年齡的增長,生存質量隨之下降[8-9]。同時,兒童和成人患者在細胞遺傳學異常和對治療的反應等多項指標中均有所差異,故分析兒童和成人B-ALL患者中的免疫表型差異可為疾病的診斷和治療提供參考依據。

本研究結果顯示,在B-ALL免疫分型分類中,Com-B-ALL和Pre-B-ALL類型兒童與成人患者所占比例相比(P>0.05);Pro-B-ALL類型患者中兒童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%)(P<0.05);在全部的B-ALL患者中,B系抗原CD19陽性率最高,兒童與成人均為100.00%,其次為CD22、cyCD79a;兒童與成人B-ALL患者CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、cTdT、HLA-DR、CD38、CD13、CD117陽性率相當(P>0.05);兒童B-ALL的CD10陽性率高于成人患者,CD34、CD33、CD15陽性率低于成人患者(P<0.05)。提示監測兒童與成人B-ALL的免疫表型在診斷、判斷預后、明確治療方案中意義重大。CD34是造血干細胞的特異性標記,在細胞分化程度低的B-ALL中表達更為明確[10-11]。本研究發現兒童B-ALL的CD34低于成人患者,由此可見成人患者細胞分化較差,腫瘤惡性程度高,臨床治療難度大。CD20的表達與患者預后密切相關,其陽性率越高則復發率越高、生存時間越短,本研究發現兒童與成人患者的CD20陽性率相當。而CD19作為血液惡性腫瘤的一個重要靶點,其在多種B細胞淋巴瘤和白血病中具有表達,本研究發現在全部的B-ALL患者中,CD19陽性率較高,故臨床針對不表達的CD20的早期B系腫瘤可選用抗CD19抗體治療。同時,白血病細胞存在異質性和非同步性,故B-ALL細胞可不同程度的表達髓系抗原。兒童和成人B-ALL患者中以CD13和CD33髓系抗原最為常見,而CD117和CD15由于其異常表達的頻率較低,故臨床常忽略對其的深入研究。CD117表達于髓系原始細胞中,是髓系特異的標志,其陽性率越高則復發率越高,生存率越低[12]。CD33、CD15在成人B-ALL患者中高表達,表明是B-ALL敏感性和特異性均較高的標志。針對此,臨床需依據不同年齡階段患者白細胞的免疫表型實施針對性的治療措施,以此延長患者生存周期。

綜上所述,兒童與成人B-ALL的免疫表型具有特異性,通過評估抗原的表達水平可更精準地描述患者獨立特征,為臨床評估預后及采取有效治療措施提供指導。