小鼠視神經(jīng)損傷后神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和軸突數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化

沈冰燕，王敏，方葉楠，代琴，謝琪琦，吳文燦

1.溫州醫(yī)科大學(xué) 眼視光學(xué)院（生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院），浙江 溫州 325035；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬眼視光醫(yī)院，浙江 溫州 325027

外傷性視神經(jīng)病變（traumaticoptic neuropathy, TON）又稱視神經(jīng)損傷，主要是因顱腦及額面部遭受外力撞擊后直接或間接導(dǎo)致的視神經(jīng)損傷，是一種重要的致盲性眼病，在頭面顱腦復(fù)合傷患者中的發(fā)病率為0.5%～5%[1-2]。因其損傷靶點(diǎn)明確、病程進(jìn)展快等特點(diǎn)常作為視神經(jīng)損傷研究的理想病種，目前尚無(wú)有效的治療方法[3]。既往研究[4-6]表明視神經(jīng)損傷后軸突再生修復(fù)困難，視神經(jīng)損傷導(dǎo)致軸突斷裂會(huì)引起視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（retinal ganglion cells, RGCs）的凋亡[7-8]，且RGCs的損傷及丟失存在一定的時(shí)間累積效應(yīng)，因此對(duì)于視神經(jīng)損傷后不同時(shí)間點(diǎn)RGCs和軸突丟失情況的評(píng)估有利于治療時(shí)間的選擇。在本研究中，通過(guò)構(gòu)建小鼠視神經(jīng)鉗夾損傷（optic nerve crush,ONC）模型，探究視神經(jīng)損傷后不同時(shí)間的RGCs和軸突數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化，了解視神經(jīng)損傷的病理過(guò)程，從而進(jìn)一步尋找視神經(jīng)損傷后治療干預(yù)的適宜時(shí)機(jī)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：20只SPF級(jí)健康C57BL/6J小鼠，1月齡，體質(zhì)量12～15 g，由溫州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SYXK（浙）2018-0017。

1.1.2 藥品與主要試劑：鹽酸塞拉嗪注射液 （2 mL/支）購(gòu)自長(zhǎng)春華牧動(dòng)物保健品有限公司；舒泰?20購(gòu)自法國(guó)維克公司；復(fù)方托吡卡胺滴眼液購(gòu)自邯鄲康業(yè)制藥有限公司；鹽酸丙美卡因滴眼液購(gòu)自德國(guó)愛(ài)爾康公司；氧氟沙星眼膏購(gòu)自沈陽(yáng)興齊制藥有限公司；4%多聚甲醛購(gòu)自北京蘭杰柯科技有限公司；……