兒童地中海貧血紅細胞相關參數特征及其篩查意義

程昭科，王敏潔，陳丹虹

肇慶市廣寧縣人民醫院檢驗科，廣東 肇慶 526300

地中海貧血是由珠蛋白鏈合成不足或缺失導致的遺傳性溶血性貧血，輕型地中海貧血無明顯癥狀，無需特殊治療，而中重型地中海貧血患兒可于出生后3～6個月出現肝脾腫大、黃疸以及發育異常、預后不良[1-2]。因此早期篩查地中海貧血有助于早期干預和治療，改善患兒預后。聚合鏈反應(PCR)技術可檢測地中海貧血基因，是診斷地中海貧血的可靠方法，但是價格昂貴、操作復雜，不適合基層醫院篩查。地中海貧血患者紅細胞參數可出現一定程度異常[3]，且紅細胞參數檢測方便、迅速、經濟實惠。本研究通過檢測紅細胞參數，分析兒童地中海貧血紅細胞相關參數的特征及其篩查意義，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年2 月至2019 年2 月肇慶市廣寧縣人民醫院兒科收治的340例地中海貧血患兒為觀察組，另選擇同期在我院體檢的200 例健康兒童為對照組。觀察組患兒均經PCR 基因檢測證實攜帶α或β地貧基因，并排除其他疾病導致的貧血以及巨幼紅細胞貧血、缺鐵性貧血、再生障礙性貧血等其他貧血類型。其中男性212例，女128例；年齡3～6歲，平均(4.25±0.36)歲。對照組兒童均排除血液疾病、免疫疾病、先天性疾病，其中男性126 例，女性74 例；年齡2～7歲，平均(4.06±0.31)歲。兩組兒童的年齡、性別比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會批準，患兒家屬均知情并簽署同意書。

1.2 檢測方法 采集兩組兒童的靜脈血2 mL于EDKA 抗凝試管，30 min 內采用日本希森美康Sys-5000mex 全自動血細胞分析儀進行血常規檢測，流式細胞學檢測紅細胞計數(RBC)、血紅蛋白(HGB)、血紅細胞平均體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白量(MCH)、紅細胞體積分布寬度(RDW)、血紅蛋白A2(HbA2)參數。

1.3 診斷標準 MCV＜82 fL為陽性，MCH＜27 pg為陽性，RDW＞14.5%為陽性[4]，HbA2＜2.5%為α地中海貧血，HbA2＞3.5%為β地中海貧血[5]。聯合診斷以其中一項陽性為陽性。以a表示真地中海貧血例數，b表示假地中海貧血例數，c 表示假非地中海貧血例數，d 表示真非地中海貧血例數，計算敏感度[a/(a+c)×100%]、特異度[d/(b+d)×100%]、陽性預測值[a/(a+b)×100%]、陰性預測值[d/(c+d)×100%]。約登指數=a/(a+c)+d/(b+d)-1。

1.4 統計學方法 應用SPSS 25.0統計軟件進行數據分析，紅細胞參數經Kolmogorov-Smirnov檢驗符合正態分布，以均數±標準差(x-±s)表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。計數資料比較采用χ2檢驗。采用受試者工作特征曲線(ROC)繪制紅細胞參數診斷地中海貧血曲線。所有統計均采用雙側檢驗，檢驗水準α=0.05。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組兒童的紅細胞參數比較 觀察組患兒的HGB、MCV、MCH明顯低于對照組，RDW、HbA2明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，但兩組RBC比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 兩組兒童的紅細胞參數比較(±s)

表1 兩組兒童的紅細胞參數比較(±s)

組別觀察組對照組t值P值例數340 200 RBC(×1012/L)5.06±0.51 5.02±0.26 0.236 0.815 HGB(g/L)103.26±5.26 121.26±3.65 6.352＜0.05 MCV(fL)68.25±6.35 85.25±3.68 9.562＜0.05 MCH(pg)21.03±3.19 28.51±5.56 5.261＜0.05 RDW(%)15.45±3.29 12.35±2.65 4.316＜0.05 HbA2(%)3.62±0.67 2.31±0.36 5.032＜0.05

2.2 觀察組不同性別地中海貧血兒童紅細胞參數比較 不同性別地中海貧血患兒間的RBC、HGB、MCV、MCH、RDW、HbA2 比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表2。

表2 觀察組不同性別地中海貧血兒童的紅細胞參數比較(±s)

表2 觀察組不同性別地中海貧血兒童的紅細胞參數比較(±s)

性別男性女性t值P值例數212 128 RBC(×109/L)5.03±0.51 4.98±0.26 0.956 0.103 HGB(g/L)103.73±5.42 102.35±5.09 0.356 0.536 MCV(fL)68.25±6.35 67.25±6.08 0.429 0.425 MCH(pg)21.49±3.42 22.42±5.30 0.065 0.953 RDW(%)15.61±3.35 16.85±3.95 0.719 0.361 HbA2(%)3.31±0.36 3.62±0.67 0.326 0.725

2.3 觀察組不同基因分型地中海貧血兒童紅細胞參數比較β型地中海貧血患兒的MCH、RDW、HbA2 明顯高于α型地中海貧血兒童，差異均有統計學意義(P＜0.05)，但RBC、HGB、MCV 在不同基因分型地中海貧血患兒間比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表3。

表3 觀察組不同基因分型地中海貧血兒童的紅細胞參數比較(±s)

表3 觀察組不同基因分型地中海貧血兒童的紅細胞參數比較(±s)

基因型α型β型t值P值RBC(×1012/L)5.15±0.51 5.03±0.49 0.346 0.623 HGB(g/L)102.39±5.66 102.45±5.63 0.095 0.902 MCV(fL)68.15±6.49 68.03±6.42 0.009 0.993 MCH(pg)21.49±3.42 26.42±5.30 12.351＜0.05 RDW(%)14.52±3.02 17.42±3.66 6.592＜0.05 HbA2(%)3.01±0.43 4.56±0.87 5.492＜0.05

2.4 紅細胞參數對地中海貧血的篩查價值 單獨MCV 正確篩查地中海貧血患兒312 例，其中α型地中海貧血208 例，β型地中海貧血104 例，漏檢28 例，MCV 診斷地中海貧血的靈敏度為91.76%，特異度為92.00%，陽性預測值為95.12%，陰性預測值為86.79%，約登指數為0.83。單獨MCH 正確篩查地中海貧血患兒320例，其中α型地中海貧血224例，β型地中海貧血96例，漏檢20例，MCH診斷地中海貧血的靈敏度為94.12%，特異度為96.00%，陽性預測值為97.56%，陰性預測值為90.57%，約登指數為0.90。單獨RDW 正確篩查地中海貧血患兒248 例，其中α型地中海貧血164 例，β型地中海貧血84 例，漏檢92 例，RDW 診斷地中海貧血的靈敏度為72.94%，特異度為72.00%，陽性預測值為81.58%，陰性預測值為61.02%，約登指數為0.45。單獨HbA2 正確篩查地中海貧血患兒264 例，其中α型地中海貧血140 例(66.04%)，β型地中海貧血128 例(96.88%)，漏檢76 例，HbA2 診斷地中海貧血的靈敏度為77.65%，特異度為84.00%，陽性預測值為89.19%，陰性預測值為68.85%，約登指數為0.62。聯合MCV、MCH、RDW、HbA2 診斷地中海貧血332 例，漏診8 例，聯合診斷地中海貧血的靈敏度為97.65%，特異度為98.00%，陽性預測值為98.81%，陰性預測值為96.08%，約登指數為0.96，見表4。

表4 紅細胞參數對地中海貧血的篩查效能

2.5 MCV、MCH、RDW、HbA2 診斷地中海貧血的ROC 分析 MCV、MCH 診斷地中海貧血的曲線下面 積(AUC)分 別 為0.788 (95%CI：0.701～0.876，P=0.000)、0.733 (95%CI：0.685～0.860，P=0.000)；RDW、HbA2 診斷地中海貧血的AUC 為0.686 (95%CI：0.595～0.777，P=0.006)、0.705(95%CI：0.610～0.799，P=0.000)，見圖1、2。

圖1 MCV、MCH診斷地中海貧血的ROC圖

圖2 RDW、HbA2診斷地中海貧血的ROC圖

3 討論

地中海貧血多見于我國南方地區，對兒童進行地中海貧血篩查有助于早期發現，規范治療，有利于其生長發育，并可為成年后合理婚配進行指導，防止重癥地中海貧血發生。地中海貧血在血液學方面表現與缺鐵性貧血相似，均表現為小細胞低色素性貧血，且輕型地中海貧血癥狀較輕與臨床其他貧血類型易混淆，因此有必要探索一種更為合理、簡單、經濟的篩查方法。

本研究觀察組患者MCV、MCH、RDW、HbA2 與對照組存在明顯差異，表現為MCV、MCH 降低和RDW、HbA2升高，與梅雙等[6]、李莉艷等[7]報道結果一致。MCV 指單個紅細胞平均體積，MCV 降低見于缺鐵性貧血和地中海貧血，MCV升高則見于B族維生素及葉酸缺乏的大細胞性貧血。本研究MCV在性別之間和地中海基因分型之間均無明顯差異性，說明MCV不受性別影響，對地中海貧血具有較高敏感性。診斷效能分析結果顯示MCV診斷地中海貧血的靈敏度達90.00%以上，吳學東等[4]在報道中同樣指出MCV診斷地中海貧血的靈敏度為95.1%，準確率達83.9%。MCH 代表每個紅細胞HGB 含量，同MCV 一樣MCH降低預示著小細胞低色素性貧血，血紅蛋白疾病指南中推薦將MCH 作為地中海貧血篩查的主要指標，指出MCH 可篩查幾乎所有地中海貧血基因攜帶者[8-9]。本研究MCH 診斷地中海貧血的靈敏度為94.12%，但是同MCV 一樣診斷地中海貧血特異度較低，提示MCV、MCH診斷地中海貧血假陽性率偏高，分析原因為缺鐵性貧血等低色素貧血MCV、MCH 同樣表現出水平低下，導致鑒別難度增加。其次MCV、MCH在地中海貧血篩查中均存在漏檢情況，因此單獨以MCV、MCH篩查地中海貧血存在一定局限性[10]。

RDW 是反映紅細胞體積異質性的定量指標，臨床用于貧血的輔助診斷。骨髓造血功能障礙或貧血時，促紅細胞生長素合成減少，鐵代謝紊亂，骨髓生成大量幼稚紅細胞，導致外周血RDW 增高，RDW 升高可引起紅細胞變形性降低，進而引起微循環障礙，導致機體缺氧[11-12]。本研究觀察組RDW高于對照組，且β型地中海貧血RDW高于α型地中海貧血，提示RDW對于地中海貧血基因分型有鑒別價值。診斷效能分析RDW 對地中海貧血篩查靈敏度為72.94%，尚不十分理想，特異度偏低，說明RDW在地中海貧血篩查中敏感度較低，且存在一定假陽性率。HbA2 是地中海貧血表型篩查重要指標[13-14]，HbA2 升高見于β型地中海貧血，降低見于α型地中海貧血，原因與α型地中海貧血α鏈合成減少、缺失有關[15]。但是單獨將HbA2用于篩查地中海貧血存在敏感度、特異度低的問題，本研究HbA2 診斷地中海貧血的AUC 僅0.705，說明HbA2篩查地中海貧血效能尚待提高。為提高地中海貧血篩查準確率，本研究將MCV、MCH、RDW、HbA2聯合篩查，一項陽性視為地中海貧血可能，結果將靈敏度和特異度均提高至95.00%以上，提示聯合多項紅細胞參數進行地中海貧血篩查是值得推薦和臨床推廣的篩查手段。

綜上所述，地中海貧血患兒MCV、MCH、RDW、HbA2 參數存在明顯異常，β型地中海貧血患兒MCH、RDW、HbA2改變更顯著。