黃芩苷聯合干擾素α治療乙型肝炎肝纖維化臨床研究*

呂艷艷，薛陽利，陶美花 ，楊妙妍， 龍俊宏，曹團平，高 雷△

1.西安市第五醫院(西安710082)，2.西安交通大學第二附屬醫院(西安710004)

我國是乙型病毒性肝炎的高發國家，肝臟纖維化是慢性乙型病毒性肝炎進展的必然結果，進一步會發展為肝硬化甚至肝癌。抑制或逆轉肝纖維化是目前治療肝病的重要手段，也是國內外研究的熱點。干擾素是廣譜的免疫調節劑，黃芩苷是唇科植物黃芩中含有的獨特的黃酮類化合物，具有抗氧化、抗病毒、保護肝細胞、調節肝星狀細胞活性的作用。本研究聯合應用抗病毒藥干擾素α和黃芩苷治療乙型病毒性肝炎肝纖維化的患者156例，現報道如下。

對象與方法

1 研究對象 收集西安市第五醫院及西安交通大學第二附屬醫院2011年3月到2013年12月收治的慢性乙型肝炎肝纖維化患者的資料，共計312例。男性183例，女性129例，平均年齡(46.2±7.5)歲。所有患者臨床診斷均符合2010年慢性乙型肝炎防治指南中的慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷標準；患者治療前血清HBV-DNA>105拷貝/ml，HBsAg、HBeAg及HBeAb均為陽性，谷氨酸丙酮酸轉氨酶(ALT)高于2倍正常值上限；排除自身免疫性肝病、脂肪性肝病、藥物性肝病及丙型、丁型肝炎病毒等其他嗜肝病毒感染；進入研究前6個月內未接受過抗病毒、抗纖維化及免疫調節藥物治療。所有患者治療均滿1療程，隨訪期滿，無失訪。312例患者隨機分為對照組和治療組兩組，每組156例，兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 6個月為1個療程，治療組給予黃芩苷膠囊(購自江西普眾藥業有限公司)口服，每次0.5 g，3次/d，同時給予干擾素α-1b(購自上海生物制品研究所)40 μg/次，隔日1次，皮下或肌內注射；對照組單給予干擾素α-1b 40 μg/次，隔日1次，皮下或肌內注射。

3 觀察指標 治療期間密切觀察患者臨床癥狀，并于治療前、治療1個療程后分別抽清晨空腹血10 ml，分別應用羅氏e601型全自動電化學發光免疫分析儀和東芝全自動生化分析儀檢測肝功能指標；丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)、總膽紅素(T-Bil)和肝纖維化指標：III型前膠原(PC-Ⅲ)、IV型膠原(IV-C)、層粘連蛋白(LN)、透明質酸酶(HA)。所有操作嚴格按說明進行。觀察治療過程中，主要不良發應的發生情況。

4 統計學方法 所有數據采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據處理和統計，兩樣本率的比較采用卡方檢驗、肝功能和纖維化指標的比較采用t檢驗和重復測量的方差分析，P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 兩組治療前后兩組患者肝功能指標比較 見表1。兩組患者各項肝功能指標治療后顯著優于治療前；兩組治療效果比較，試驗組患者治療后肝功能指標顯著優于對照組。

2 治療前后兩組患者肝纖維化指標比較 見表2。兩組患者各項肝纖維化指標治療后顯著優于治療前；兩組治療效果比較，試驗組患者治療后肝纖維化指標改善顯著優于對照組。

3 兩組患者不良發應發生情況比較 見表3。不良反應監測結果顯示，治療組流感樣癥狀和血液系統損害的發生率顯著低于對照組(P<0.05)，消化系統損害等其它不良反應的發生率也有下降，但是差異沒有統計學意義(P>0.05)。

表1 兩組治療前后肝功能指標比較

注：治療前后組內比較，*P<0.01；與對照組比較，#P<0.05

表2 治療前后肝纖維化指標比較(μg/L)

注：治療前后組內比較，*P<0.05，△P<0.01；與對照組比較，#P<0.05，▲P<0.01

表3 兩組患者不良發應發生情況比較 [例(%)]

注：與對照組比較，*P<0.05

討 論

HBV呈世界性流行，全球有超過3.5億的慢性乙型肝炎患者，嚴重威脅人類的健康。肝纖維化是一切慢性肝病的基礎，是形成肝硬化的必經階段。因此，阻止肝纖維化的發生和發展是防止慢性肝病向肝硬化和肝功能衰竭過渡的關鍵環節[1-2]。國內乙型肝炎纖維化的治療方式，普遍采用以干擾素、核苷類、免疫調節劑抗病毒治療為主，中醫和中醫藥制劑為輔助的方式[3]。

乙型肝炎肝纖維化的治療，干擾素是常規治療選擇，干擾素-α作為一種廣譜免疫調節劑，干擾素具有抗病毒、抑制肝星狀細胞的活化和增殖、抑制細胞外基質合成；促進細胞外基質降解等作用，目前廣泛運用于慢性乙肝患者的治療中。動物實驗證實，干擾素可以明顯抑制HBV-DNA、HBeAg、HBsAg。因此，干擾素可以有效的治療HBeAg 陽性乙肝患者，也可顯著改善 HBeAg 陰性患者的ALT、AST 復常率，并且使 HBV-DNA 有效陰轉，是理想的保肝藥物[4-5]。正是因為較高的轉陰率干擾素-α目前認為其可延緩慢性乙型肝炎進展至終末期肝病[6]，是可以明顯改善預后的藥物。但由于干擾素價格昂貴、不良發應多且發生率高，和治療時間相對長等特點，臨床上亟需其它治療藥物和方式。

黃芩苷是黃芩中提取的黃酮類化合物，含有較多的酚羥基，可以增強肝細胞內超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的活性，幫助清除自由基，和上調肝細胞內的脂肪酸結合蛋白的表達，對于肝細胞抗氧化應激有顯著的保護效應[7]。劉志勇等[8]利用CCl4復合因素肝纖維化大鼠模型證明， 黃芩苷能通過影響TGF-β1、PDGF、TNF-α的表達，可對肝臟損傷有干預作用。Nayak等[9]的研究在體內和體外揭示了黃芩苷抗流感病毒的機制，黃芩苷可以干擾NS1的RNA結合域，作用于流感病毒的非結構蛋白1(NS1)上調干擾素誘導的抗病毒信號，降低細胞內的PI3K/Akt信號。關于黃芩苷抗HBV的原理，首先黃芩苷是抑制HBV與宿主細胞融合，阻斷侵入與釋放過程。另外，黃芩苷還可直接作用于T細胞和B細胞，促進B細胞的增殖，清除乙肝病毒的復制模板cccDNA。而且，黃芩苷還能抑制膠原蛋白等經細胞外基質的合成，并抑制單個細胞的纖維增生，延緩甚至逆轉肝硬化進程。

盡管黃芩苷有確切的保肝作用，但抗病毒作用十分有限，實際臨床應用中發現，病毒滴度較高的患者單獨使用黃芩苷效果不佳，一般會選擇與其它藥物聯合使用以保證療效。劉元豪等[10]的隨機對照研究黃芩苷膠囊聯合替比夫定治療慢性乙肝早期肝硬化，肝功能指標以及肝纖維化指標均有改善。亓民等[11]使用恩替卡韋分散片聯合黃芩苷膠囊治療慢性乙型病毒性肝炎患者治療6個月后以及隨訪期間的丙氨酸氨基轉移酶復常率、HBeAg轉陰率、HBeAg/HBeAb血清轉換率、HBV-DNA轉陰率療效指標均明顯優于對照組，具有較好的持久恢復肝功能和抗病毒的療效。另有研究評價了黃芩苷和干擾素α聯合治療，對于慢性乙肝患者肝纖維化指標和細胞免疫的影響，治療6個月后，除了肝功能、肝纖維化指標與治療前相比均明顯改善外，治療組患者HBeAg及HBV-DNA陰轉率，治療后治療組CD4+T及NK細胞比例顯著高于對照組，CD4+/CD8+比值顯著高于對照組。研究認為，對于肝炎、肝纖維化患者，黃芩苷聯合干擾素可以更有效的促進HBeAg和HBV-DNA轉陰及改善細胞免疫狀態[12]。本文研究發現，黃芩苷和干擾素的聯用，可以一定程度上減輕干擾素的不良反應，從傳統醫學角度，可能和黃芩可以清熱燥濕、瀉火解毒有關，同時有研究發現黃芩苷與其他藥物聯合(柴胡皂苷d)有神經保護作用，可減輕腦缺血的再灌注損傷，機制可能是通過抑制二磷酸腺苷核糖多聚酶-2(PARP-1)的表達而實現的[13]，認為與黃芩苷抗炎、抗凋亡的作用有關，具體生物機制有待進一步的研究揭示。

綜上所述，黃芩苷彌補了干擾素α抗病毒作用有限的弊端，與干擾素α聯合使用協同治療慢性乙型肝炎肝纖維化，可明顯抑制肝細胞的凋亡，使保肝治療效果更加顯著，另外，治療及隨訪期間，聯合用藥組的不良反應較少。黃芩苷膠囊聯合干擾素α治療慢性乙型肝炎肝纖維化效果優于單獨使用干擾素α，具有較高的臨床價值。

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