乙型肝炎肝硬化患者血清血小板衍生生長因子和葉酸水平變化

姚小健，黃紅霞，陳勇

肝硬化是我國成年人肝膽系統最常見的慢性病，可由多種病因引起，而我國肝硬化多繼發于乙型肝炎病毒（HBV）感染[1]。肝細胞損傷導致肝纖維化，并最終引起肝硬化[2]。肝功能損傷可有多種表現，但肝細胞凋亡、細胞數量減少是其共同的病理學損傷過程，短時間大量肝細胞凋亡或壞死可引起肝功能衰竭，預后不良[3]。目前，多數學者認為積極監測乙型肝炎肝硬化患者肝功能損傷狀況有利于早期評價患者病情并指導治療。雖然肝穿刺是評判肝損傷最準確的檢測方法，但其屬于有創檢查。乙型肝炎肝硬化患者病情需要連續監測，因此該方法在臨床上的應用受限，而血清學檢測簡單、可重復、患者易接受，尋找有效的肝功能損傷血清學檢測指標意義重大[4，5]。既往研究發現乙型肝炎肝硬化患者多有不同程度的血清血小板衍生生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）和葉酸水平改變，并能提示病情的輕重[6，7]。本研究檢測了不同肝功能分級的乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平，并分析了PDGF和葉酸水平與患者肝功能損傷的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年1月～2016年12月期間我院收治的110例腎功能正常的乙型肝炎肝硬化患者，男69例，女41例；年齡30～70歲，平均年齡（53.91±6.91）歲。乙型肝炎診斷參照《慢性乙型肝炎防治指南》[8]，肝硬化診斷參照《肝硬化中西醫結合診治方案》[9]。Child-Pugh A級36例，B級42例，C級32例。納入標準：初治，腎功能指標正常。排除標準：合并其他肝炎病毒感染、有糖尿病、腫瘤、酗酒、有精神性疾病。本研究經我院醫學倫理委員會批準。患者本人簽署知情同意書。

1.2 臨床檢測 采用酶法檢測血清肌酐（sCr，DiaSys Diagnostic Systems GmbH）；采用ELISA法檢測血清PDGF水平（上海喬羽生物科技有限公司）；采用化學發光法檢測血清葉酸水平（Siemens Medical Solutions Diagnostics）；采用速率法檢測血清谷丙轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）和總膽紅素（total bilirubin，TBIL）水平（北京麥瑞博生物科技有限公司）；采用放射免疫法檢測血清Ⅲ型前膠原（type procollagen，PCⅢ）、Ⅳ型膠原（collagenⅣ，Ⅳ-C）、層粘連蛋白（laminin，LN）和透明質酸酶（hyaluronidase，HA）水平（北京樂博生物科技有限公司）；采用深圳市錦瑞生物科技有限公司生產的CA54血凝儀檢測凝血酶原時間（prothrombin time，PT），根據PT計算國際標準化比值（international normalized ratio，INR）；采用溴甲酚綠比色法檢測血清白蛋白（albumin，ALB，上海申索佑福醫學診斷用品有限公司）。使用北京普天新橋技術有限公司生產的3502B多功能酶標儀和武漢天鷹醫療設備有限公司生產的SL200A全自動生化分析儀。

1.3 統計學方法 應用SPSS 22.0版統計學軟件分析，計量資料以±s表示，采用t檢驗，采用Pearson分析法行相關性分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 乙型肝炎肝硬化患者肝功能指標變化情況 本組乙型肝炎肝硬化患者肝功能損傷情況見表1。

2.2 不同肝功能分級患者血清PDGF和葉酸水平比較 隨著肝功能變差，患者血清PDGF水平逐漸上升，三組間差異有統計學意義（P＜0.05）；隨肝功能變差，葉酸水平逐漸下降，三組間差異有統計學意義（P＜0.05，表2）。

表1 肝硬化患者血清肝功能指標（±s）變化

表1 肝硬化患者血清肝功能指標（±s）變化

與 A級組比，①P＜0.05；與 B級組比，②P＜0.05

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表2 不同肝功能分級患者血清PDGF和葉酸水平（±s）比較

表2 不同肝功能分級患者血清PDGF和葉酸水平（±s）比較

與 A級比，①P＜0.05；與 B級比，②P＜0.05

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2.3 不同肝功能分級患者血清肝纖維化指標的比較 隨著肝功能分級變差，患者血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈現上升趨勢，組間差異均有統計學意義（均P＜0.05，表3）。

2.4 肝硬化患者血清PDGF和葉酸水平與肝功能指標的相關性分析 乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平與ALT、TBIL水平和INR均呈正相關，與ALB呈負相關（均P＜0.05）；血清葉酸水平與ALT、TBIL水平和INR均呈負相關，與ALB呈正相關（均 P＜0.05，表4）。

2.5 肝硬化患者血清PDGF和葉酸水平與血清肝纖維化指標的相關性分析 乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平與PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈正相關（均P＜0.05），乙型肝炎肝硬化患者血清葉酸水平與PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈負相關（均P＜0.05，表5）

表3 不同肝功能分級患者血清肝纖維化指標（μg/L，±s）比較

表3 不同肝功能分級患者血清肝纖維化指標（μg/L，±s）比較

與 A級組比，①P＜0.05；與 B級組比，②P＜0.05

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表4 肝硬化患者血清PDGF和葉酸水平與肝功能指標的相關性

表5 血清PDGF和葉酸水平與肝纖維化指標的相關性

3 討論

目前，乙型肝炎肝硬化的具體發生機制尚未完全闡明，但隨著研究的深入，多數認為肝功能損傷及肝纖維化是乙型肝炎肝硬化發生的必經之路[10]。乙型肝炎病毒感染并不會直接導致肝功能損傷，但在機體免疫功能的作用下，肝細胞可發生變性、凋亡、壞死，而肝細胞的凋亡壞死又會導致肝組織纖維增生，最終在修復過程中發生肝纖維化[11，12]。近年研究認為，PDGF在肝纖維化的發生發展中起重要作用。肝細胞未損傷時大部分PDGF存儲于血小板中，此時血清PDGF水平較低，但當肝功能損傷時，包括肝星狀細胞在內的多種細胞均可釋放PDGF，從而導致血清PDGF水平發生改變[13，14]。動物實驗顯示PDGF刺激肝纖維組織增生的能力較強，其可通過刺激星形膠質細胞增殖及分泌膠原纖維，達到促進肝纖維化病情進展的作用。另有研究指出，PDGF還可通過抑制膠原蛋白酶活性抑制肝細胞間質降解[15]。肝纖維化的發生與PDGF的參與關系密切，而乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF的改變與肝細胞損傷有關。因此，血清PDGF水平變化可能提示乙型肝炎肝硬化患者肝功能損傷狀況[16，17]。本研究結果顯示，不同Child-Pugh分級的乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF水平不同，且隨著Child-Pugh分級的變差，患者血清PDGF水平增加，此結果與張亮等[18]的研究結果一致，提示乙型肝炎肝硬化患者普遍存在肝損傷狀況，且Child-Pugh分級差的患者可能肝功能損傷更嚴重。

血清葉酸水平與肝功能損傷的關系已有報道。葉酸是細胞合成必不可缺的物質，肝臟是葉酸代謝的重要器官[19]。既往研究認為肝細胞的大量損傷可顯著影響葉酸代謝，而葉酸的合成需要肝細胞的參與。因此，普遍認為葉酸水平可反映肝功能狀況[20]。血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA等指標均為提示乙型肝炎肝硬化患者肝纖維化程度的指標[21]。本研究結果顯示，血清PDGF水平與PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈正相關，而葉酸水平與血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN和HA水平均呈負相關，且PDGF水平與LN水平具有顯著相關性，提示血清PDGF水平和葉酸水平可提示乙型肝炎肝硬化患者病情。本研究對PDGF和葉酸水平與血清ALT、TBIL、ALB和INR等肝功能指標的相關性研究顯示，血清PDGF水平與ALT、TBIL水平和INR均呈正相關，與血清ALB呈負相關，而葉酸水平與ALT、TBIL和INR水平均呈負相關，與ALB呈正相關，提示血清PDGF和葉酸水平均能提示乙型肝炎肝硬化患者的肝損傷程度。

綜上所述，隨著乙型肝炎肝硬化患者肝功能損傷程度的加重，患者血清PDGF水平隨之上升，葉酸水平隨之下降，血清PDGF水平和葉酸水平可作為判斷乙型肝炎肝硬化患者肝功能損傷程度的指標，在臨床乙型肝炎肝硬化患者的診療過程中起某種提示作用。

[1]吳欽梅，尤紅.中國乙型病毒性肝炎肝硬化研究現狀.中國病毒病雜志，2014，6（1）:7-10.

[2]Marcellin P，Gane E，Buti M，et al.Regression of cirrhosis during treatmentwith tenofovirdisoproxilfumarate forchronic hepatitis B:A 5-year open-labelfollow-up study.Lancet，2012，381（9865）:468-475.

[3]陳輝春，金凱.痰熱清注射液聯合注射用腺苷蛋氨酸治療肝硬化合并肝功能損害臨床觀察.中國中醫急癥，2013，22（3）:458-459.

[4]Salkic NN，Jovanovic P，Hauser G，et al.FibroTest and fibrosure for significant liver fibrosis and cirrhosis in chronic hepatitis B:A Meta-analysis.Am J Gastroenterol，2014，109（6）:796-809.

[5]陳偉軍.分析聯合檢測血清總膽汁酸與肝功能酶學指標在臨床診斷肝臟疾病中的應用價值.中國實用醫藥，2014，17（13）:41-42.

[6]賴祥紅.TGF-β1、PDGF與乙型肝炎肝硬化肝功能分級及中醫證型的相關性研究. 江蘇中醫藥，2012，44（4）:20-21.

[7]劉典勛，鄒先雄，朱興，等.斷流術對乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF、CTGF 及肝纖四項的影響. 醫學綜述，2016，22（6）:1237-1239.

[8]中華醫學會肝病學分會和感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）.實用肝臟病雜志，2011，14（2）：81-89.

[9]中國中西醫結合學會消化系統疾病專業委員會.肝硬化中西醫結合診治方案.現代消化及介入診療，2005，10（2）:119-121.

[10]左琳琳，周華娟，方紅菊.恩替卡韋治療46例失代償期乙型肝炎肝硬化患者臨床效果觀察.實用肝臟病雜志，2016，19（2）:217-218.

[11]Zoutendijk R，Reijnders JG，Zoulim F，et al.Virological response to entecavir is associated with a better clinical outcome in chronic hepatitis B patients with cirrhosis.Gut，2013，62（5）:760-765.

[12]張永峰.恩替卡韋結合CIK療法對乙型肝炎病毒感染相關性肝硬化的治療效果研究. 中國處方藥，2016，14（3）:37-38.

[13]王煥信，馬金棟，劉國寧，等.血小板衍生生長因子BB和Ⅱ型樹突狀細胞亞群與乙型肝炎病毒復制及肝損傷的關系.中國民康醫學，2011，23（1）:5-7.

[14]Tripodi A，Anstee QM，Sogaard KK，et al.Hypercoagulability in cirrhosis:causes and consequences.J Thromb Haemost，2011，9（9）:1713-1723.

[15]項榮，侯寶峰.柔肝靈顆粒對肝纖維化大鼠血清MMP-2及PDGF 影響的實驗研究. 陜西中醫，2013，34（1）:107-109.

[16]劉帥偉，丁向春，張栩，等.復方鱉甲軟肝片聯合核苷類藥物對乙型肝炎肝硬化患者血清PDGF和其它肝纖維化指標的影響及其相關研究. 寧夏醫科大學學報，2012，34（7）:695-698.

[17]劉瑤，吳同玉，李東良，等.早期乙型肝炎肝硬化中醫證素特征及其與血漿CTGF、PDGF的相關性研究.廣州中醫藥大學學報，2015，5（1）:4-9.

[18]張亮.細胞因子與乙型肝炎肝硬化肝功能分級的相關性.實用臨床醫藥雜志，2012，16（13）:98-100.

[19]焦曉磊，高英堂，景麗，等.血清同型半胱氨酸、葉酸、亞甲基四氫葉酸還原酶與HBV感染后疾病進展關系的研究.生物醫學工程與臨床，2013，10（6）:595-600.

[20]Elghonemy KS.Su1398 immune response to recombinant hepatitis B vaccine in adult patients with autoimmune hepatitis.Gastroenterology，2015，148（4）:S495-S498.

[21]Raj A，Holtmann G，Bhat P，et al.Hepatic fibrosis is associated with small intestinal permeability in chronic liver disease due to hepatitis C，hepatitis B and non-alcoholic fatty liver disease，in subjects without ascites.A prospective cohort study using non-invasive techniques.J Gastroenterol，2014，29（12）:200-201.