探討遵義地區苗族、仡佬族與漢族HBV基因型的分布及特點

文曉飛　馬慶慶

摘要 目的：探討遵義地區苗族、仡佬族與漢族慢性乙型肝炎患者HBV基因型分布特點。方法：采用PCR-反向斑點雜交方法，對遵義地區的苗族、仡佬族與漢族慢性乙肝HBVDNA陽性患者165例進行HBV基因分型。結果：苗族、仡佬族各40例，80例患者的基因型分別為B型55例（68.7%），C型23例（28.8），BC混合型2例（2.5%）；漢族85例，基因型分別為B型57例（67.1%），C型25例（29.4%），Bc混合型3例（3.5%）。結論：HBV的3種基因型在遵義地區苗族、仡佬族與漢族中總體分布差異無統計學意義；兩者B型都占有絕對優勢；C型基因在乙肝肝硬化、肝癌中的發病率高于B型基因。

關鍵詞 乙型肝炎病毒；基因型；苗族；仡佬族；漢族

慢性乙型肝炎感染者伴有乙肝病毒活動性復制是發展成為進展性肝?。ㄈ绺斡不⒏伟┑闹匾嚓P因素。本試驗采用熒光PCR法檢測乙型肝炎病毒基因型，以了解遵義地區苗族、仡佬族與漢族HBV基因型分布情況，以及HBV基因型與臨床的關系。

資料與方法

2015年4月-2017年4月采集貴州航天醫院門診和住院慢性乙肝患者，成功進行基因分型165例。其中苗族、仡佬族各40例，合計80例；男64例，年齡13～75歲，平均（40.6±13.7）歲；女16例，年齡15～66歲，平均（39.4±12.8）歲。漢族85例，男67例，年齡16～76歲，平均（42.5±14.6）歲；女18例，年齡14～68歲，平均（41.7±13.2）。均符合《傳染病學》慢性乙型肝炎診斷標準。

主要試劑及儀器：HBV核酸PCR，HBV基因分型亞能生物技術（深圳）有限公司PCR和DNA反向點雜交。

檢測方法：乙肝5項檢測、HBV標記物檢測，嚴格采用化學發光微粒子免疫分析技術進行操作。①HBV基因分型采用PCR和DNA反向點雜交：設計特異的PCR引物擴增獲得HBV基因片段，該片段包含了所要檢測的基因型。通過PCR產物與設計的探針進行特異性雜交，根據膜條特定位置顯色（藍色1與否來判斷HBV的基因型。②基因分型結果判讀：本試劑以顯色與否來進行判斷，基因分型陣列位點HBV-B顯色，表明感染B基因型；以此類推為感染c基因型、D基因型；上述陣列位點≥2個顯色，表明混合感染對應的基因型。

統計學方法：所有數據采用SPSS 17.0軟件處理，P<0.05為差異有統計學意義。

結果

HBV分型結果：共獲得分型結果165例。在165標本中，分別統計苗族、仡佬族與漢族男、女性各基因型，結果表明：B型、C型、BC混合型，無論在苗族、仡佬族與漢族中，男性所占比例均高于女性，兩者基因型在性別上差異無統計學意義（P>0.05）。將所檢測的患者年齡劃分為<30歲、30～50歲和>50歲3個時段，在165例標本中，在<30歲的年齡段中，39例標本中B型所占比例27/39；在30～50歲的年齡段中，89例標本中B型所占比例60/89；>50歲的年齡段中，37例標本中B型所占比例25/37。無論處于哪個年齡段，HBV基因分型均為B型居多。不同年齡段少數民族、漢族HBV各基因型分布情況中，發現年齡段在兩者間的分別比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

遵義地區乙肝病毒感染者的HBV基因型與臨床疾病譜的關聯性：隨著疾病的發展，B型和C型在慢性肝炎乙型肝炎與乙肝肝硬化兩疾病間比較，差異有統計學意義（x²=4.850，P=0.028<0.05）；B型和C型在慢性乙型肝炎與原發性肝癌兩疾病間比較，差異有統計學意義（x²=3.954，P=0.047<0.05），表2。

討論

慢性乙型肝炎是我國危害最嚴重的一種傳染性疾病，全球因感染HBV導致肝衰、肝硬化、肝癌及并發癥而死亡的總人數高達57.6%。因此對HBV基因的研究顯得非常重要。HBV基因分為A、B、C、D、E、F、G、H、I等9個基因型。同一基因型又被進一步分為不同的亞型。

本研究在165例HBV感染人群中，HBV基因分型以B基因型占多數，C基因型次之，同時有部分B基因型和c基因型混合感染，與丁靜娟等研究貴州地區HBV基因型由B、C2型構成，且以B基因型為主，苗族患者中B型占絕對優勢的基因型相符合。成功分型165例HBV感染者樣本中，苗族、仡佬族各40例，合計80例。通過對不同性別、不同年齡組HBV感染者的基因型比較，顯示差異無統計學意義（P>0.05），表明性別、年齡與基因型無相關性。隨著疾病的發展，C基因型在肝硬化和原發性肝癌中所占比例增加，c型有49例，其中乙型肝炎30例（61.2%），乙肝肝硬化14例（28.6%），原發性肝癌5例（10.2%），與B型差異有統計學意義（P<0.05）。目前普遍認為C型引起的炎性壞死及纖維化程度比B型更加嚴重，且C型與肝硬化和肝癌的關系更為密切，基因型c的累積生存率明顯低于B型。

貴州遵義地區苗族、仡佬族自古以來就是一個不斷向西大遷徙、進入云貴高原的民族，交通的改善、與漢族之間的文化交流、生活習慣的改變，與漢族通婚，使不同源人群在相同環境條件下，可以朝相同方向演化而形成趨同的體質特征。本研究對貴州遵義地區少數民族病毒基因型的分布及特點做研究，為遵義地區根據不同基因型、不同年齡段采取不同的乙肝防治策略措施提供了依據。endprint