劉含亮王紀亭?萬文菊孫敏敏孟 曉徐蒙蒙
(1.山東農業大學動物科技學院,泰安 271000;2.泰山醫學院基礎醫學部,泰安 271000)
胰島素受體-1在尼羅羅非魚不同組織中的表達及其對注射葡萄糖的響應
劉含亮1王紀亭1?萬文菊2?孫敏敏1孟 曉1徐蒙蒙1
(1.山東農業大學動物科技學院,泰安 271000;2.泰山醫學院基礎醫學部,泰安 271000)
本試驗旨在研究胰島素受體-1(IR-1)在尼羅羅非魚不同組織中的表達及其對注射葡萄糖的響應。利用PCR擴增的方法從尼羅羅非魚肌肉中克隆IR-1的cDNA片段,并通過半定量PCR檢測,比較IR-1在肌肉、肝臟和心臟中的表達差異。選取體重約為100 g的尼羅羅非魚160尾,隨機分2組,每組4個重復,每個重復20尾。試驗組腹腔注射葡萄糖(每100 g體重30 mg),對照組以相同劑量腹腔注射0.7%的無菌生理鹽水。在注射前(0 h)和注射后的1、3、6和12 h分別進行采樣,測定血漿葡萄糖和胰島素含量,并通過實時熒光定量PCR檢測IR-1在肌肉、心臟和肝臟中的mRNA相對表達量。結果顯示:1)克隆出的IR-1 cDNA片段,其GenBank登陸號為JN967750,大小為1 979 bp,編碼548個氨基酸。序列分析發現,尼羅羅非魚的IR-1與其他物種比較具有很高的保守性,并具有豐富的酪氨酸激酶特征性序列。2)IR-1在尼羅羅非魚肌肉、心臟和肝臟中均有較高的表達量,其中在肝臟和肌肉中的表達量基本一致,而在心臟中的表達量相對較低。3)試驗組血漿葡萄糖含量在注射葡萄糖1 h后達到最高,并顯著高于對照組(P<0.05),而后開始下降,3 h后恢復到正常水平;試驗組血漿胰島素含量在葡萄糖注射3 h后達到最高,并顯著高于對照組(P<0.05),而后開始下降,12 h后恢復到正常水平?!?br>