人前列腺癌組織中ALKBH3及VEGF-C蛋白的表達>*

黃泓瑋，孫永得，李建華，武玉東

鄭州大學第一附屬醫院泌尿外科 鄭州 450052

人前列腺癌組織中ALKBH3及VEGF-C蛋白的表達>*

黃泓瑋，孫永得，李建華，武玉東#

鄭州大學第一附屬醫院泌尿外科 鄭州 450052

關鍵詞前列腺腫瘤；ALKBH3；血管內皮生長因子-C

摘要目的：探討前列腺癌組織中ALKBH3蛋白的表達及其與血管內皮生長因子-C(VEGF-C)關系。方法：采用免疫組化SP法檢測136例前列腺癌組織和129例前列腺增生組織中ALKBH3和VEGF-C蛋白的表達，分析前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白表達的關聯性。結果：前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的陽性表達率高于前列腺增生組織(P<0.001)。ALKBH3和VEGF-C蛋白的表達與前列腺癌的組織分化、TNM分期及淋巴結轉移有關(P<0.05)。前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的表達呈正關聯(rP =0.684，P=0.565)。結論：ALKBH-3可能與VEGF-C協同作用，促進了前列腺癌的發生發展。

前列腺癌是泌尿系統常見的惡性腫瘤，目前對于前列腺癌的治療采取以根治性切除手術為主，以內分泌治療及放療等綜合治療為輔的治療手段。早期的前列腺癌癥狀不明顯，因而錯過了手術治療的最好時機。目前臨床上對于前列腺癌的篩查主要依靠對前列腺特異性抗原(PSA)的檢測，但是在前列腺增生及前列腺炎組織中PSA也可以有異常表達。因此尋找一個敏感性強且具有特異性的前列腺癌腫瘤標記物十分重要。近期的研究[1]表明ALKBH3與多種腫瘤有關。血管內皮生長因子(VEGF)-C又稱淋巴管生成因子，可誘導多種惡性腫瘤細胞瘤內或者瘤周的淋巴管生成或擴張，與淋巴轉移密切相關[2]。作者采用免疫組織化學法SP法檢測前列腺癌與前列腺增生組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的表達，探討ALKBH3和VEGF-C蛋白在前列腺癌組織中的表達及其與淋巴轉移的關系。

1對象與方法

1.1研究對象收集鄭州大學第一附屬醫院泌尿外科2005年1月至2014年12月收治的前列腺癌患者的病理組織標本136例，患者年齡53～85歲，中位年齡71歲。依照Gleason評分標準，高、中分化癌74例，低分化癌62例；按WHO的TNM標準，T1、T2和T3、T4期分別為69與67例；有淋巴結轉移89例，無淋巴結轉移47例。患者術前均未接受化療和內分泌治療。選擇同期良性前列腺增生組織標本129例，患者年齡50～81歲，中位年齡68歲。所有組織標本均經病理組織學確診。

1.2ALKBH3與VEGF-C的檢測采用免疫組織化學SP方法檢測ALKBH3和VEGF-C蛋白在前列腺癌及前列腺增生組織標本中的表達。ALKBH3和VEGF-C一抗及二抗(SP-9002通用試劑盒)和DAB顯色試劑盒購于北京中杉金橋生物技術有限公司。所有標本均4 μm厚切片，一抗稀釋100倍使用，DAB染色，蘇木素復染，常規脫水、透明、封片。以PBS代替一抗為陰性對照。ALKBH3與VEGF-C均以細胞核或細胞質出現棕黃色顆粒或黃色顆粒為陽性細胞。在染色最密集處連續觀察5個高倍鏡視野，每個視野計數100個細胞，計算陽性細胞百分比：0為0分， ～20%為1分，～50%為2分，>50%為3分。染色強度記分：淡黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。以上兩者的乘積大于3為陽性。

1.3統計學處理采用SPSS 17.0進行分析。前列腺癌與前列腺增生組織中，不同病理分期、不同組織分化的前列腺癌組織中兩種蛋白的陽性表達率比較采用χ2檢驗。以列聯系數評估前列腺癌組織中兩種蛋白的表達關系。檢驗水準α=0.05。

2結果

2.12種組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白的表達

見圖1和表1。

2.2前列腺癌組織中ALKBH3和VEGF-C蛋白的表達和臨床病理特征的關系見表2。

2.3前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白表達的關聯性分析見表3。

A:前列腺增生組織;B:前列腺癌組織。圖1　前列腺增生與前列腺癌組織中VEGF-C(1)與ALKBH3(2)的表達(SP，×400)

例(%)

表2　前列腺癌組織中ALKBH3和

*:為校正χ2檢驗。

表3　ALKBH3與VEGF-C

χ2=55.768，rP=0.565。

3討論

ALKBH3是一個由286個氨基酸構成的蛋白，是α-酮戊二酸加雙氧酶家族的成員之一。研究[3]認為ALKBH3與前列腺癌的發生發展有密切關系。研究[4]發現具有三螺旋結構的ALKBH3可通過激活受體絡氨酸酶發揮調節細胞生長發育作用。作者的研究結果表明，ALKBH3蛋白在前列腺癌組織中的表達高于前列腺增生組織，提示ALKBH3與前列腺癌的發生發展有關。前列腺癌組織中ALKBH3蛋白的表達與不同病理分期、組織分化以及有無淋巴結轉移有關，病理分期高和組織分化差以及有淋巴結轉移的患者ALKBH3蛋白的表達水平高，說明ALKBH3蛋白與前列腺癌的進展、轉移和浸潤過程有關。

VEGF是近年來第一個被發現的具有調節淋巴管生成作用的VEGF家族成員，又稱淋巴管生成因子，可誘導多種惡性腫瘤細胞瘤內或者瘤周的淋巴管生成或擴張，與淋巴轉移相關密切[5]。VEGF-C是目前比較公認與熟知的用來評價腫瘤轉移的一個重要指標。VEGF-C經蛋白酶水解后，以前肽的形式存在，VEGF-C的受體有VEGFR-3和VEGFR-2，兩者均屬于絡氨酸激酶受體的家族成員，VEGFR-C能夠提高血管的通透性，能夠結合并激活VEGFR-3，刺激淋巴細胞有絲分裂并增生，從而促進淋巴管的生成與淋巴管的轉移[6-8]。作者的研究結果表明，VEGF-C蛋白在前列腺癌組織中的表達高于前列腺增生組織，提示VEGF-C與前列腺癌的發生發展有關。前列腺癌組織中VEGF-C蛋白的表達與不同病理分期、組織分化以及有無淋巴結轉移有關，病理分期高和組織分化差以及有淋巴結轉移的患者VEGF-C蛋白的表達水平高，說明VEGF-C蛋白與前列腺癌的進展、轉移和浸潤過程有關。

該研究中作者分析了前列腺癌組織中ALKBH3與VEGF-C蛋白表達的關系，發現兩者呈正關聯，進而推斷ALKBH3與VEGF-C可能具有協同作用，進而促進前列腺癌的分化與淋巴轉移。

綜上所述，ALKBH-3可能與VEGF-C具有協同作用，促進前列腺癌的發生發展。

參考文獻

[1]SHIMADA K,FUJII T,TSUJIKAWA K,et al.ALKBH3 contributes to survival and angiogenesis of human urothelial carcinoma cells through NADPH oxidase and tweak/Fn14/VEGF signals[J].Clin Cancer Res,2012,18(19):5247

[2]趙富周,楊鯤鵬,龐志剛,等.食管鱗狀細胞癌組織中HIF-1α、CCR7和VEGF-C蛋白的表達[J].鄭州大學學報(醫學版),2011,46(5):660

[3]劉秉乾,李沛寰,李建華,等.干擾ALKBH3基因表達對人前列腺癌LNCaP細胞裸鼠移植瘤生長的抑制作用[J].中華實驗外科雜志,2014,31(12):2654

[4]DANGO S,MOSAMMAPARAST N,SOWA ME,et al.DNA unwinding by ASCC3 helicase is coupled to ALKBH3-dependent DNA alkylation repair and cancer cell proliferation[J].Mol Cell,2011,44(3):373

[5]HAGURA A,ASAI J,MARUYAMA K,et al.The VEGF-C/VEGFR3 signaling pathway contributes to resolving chronic skin inflammation by activating lymphatic vessel function[J].J Dermatol Sci,2014,73(2):135

[6]王虎霞，盛薇，王光輝，等.乳腺癌VEGF-C和VEGFR-3表達與淋巴結轉移關系的研究[J].西安交通大學學報(醫學版)，2009,30(3)：342

[7]HAGURA A,ASAI J,MARUYAMA K,et al.The VEGF-C/VEGFR3 signaling pathway contributes to resolving chronic skin inflammation by activating lymphatic vessel function[J].J Dermatol Sci,2014,73(2):135

[8]SHIMADA K,FUJII T,TSUJIKAWA K,et al.ALKBH3 contributes to survival and angiogenesis of human urothelial carcinoma cells through NADPH oxidase and tweak/Fn14/VEGF signals[J].Clin Cancer Res,2012,18(19):5247

Expressions of ALKBH3 and VEGF-C protein in human prostate cancer tissue

HUANGHongwei，SUNYongde，LIJianhua，WUYudong

DepartmentofUrology，theFirstAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

Key wordsprostate neoplasm;ALKBH3;VEGF-C

AbstractAim: To explore the expressions of ALKBH3 and VEGF-C in prostate cancer tissue.Methods: Immunohistochemical SP method was used to detect the expressions of ALKBH3 and VEGF-C in 136 cases of prostate cancer and 129 cases of prostate hyperplasia.Results: The positive expression rates of ALKBH3 and VEGF-C in prostate cancer tissue were higher than those in prostate hyperplasia tissue(P<0.001).The expressions of ALKBH3 and VEGF-C were related to the differentiation and TNM staging of prostate cancer(P<0.05). The expressions of ALKBH3 and VEGF-C were positively correlated in prostate cancer(rP=0.684，P=0.565).Conclusion: ALKBH-3 may have a synergistic effect with VEGF-C to promote the differentiation and lymph node metastasis of prostate cancer.

doi：10.13705/j.issn.1671-6825.2016.03.018

#通信作者，男，1966年8月生，博士，教授，研究方向：泌尿外科腫瘤與臨床，E-mail:wydkw@163.com

中圖分類號R737.25

*國家自然科學基金資助項目30801151