一種由污染引起的葡萄葉斑病的調查

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一種由污染引起的葡萄葉斑病的調查

摘要：對山東省濟寧市農業科學研究院寄來的一份葡萄異常葉片樣品進行了癥狀描述、保濕鏡檢、病原菌分離鑒定及回接，結果表明：該葡萄異常葉片并非由病原菌侵染引起。于是對該葡萄園的地理周邊環境進行了調查，發現位于該園上風口有一家磚廠，明確該現象是由磚廠生產過程中所產生的污染引起。

關鍵詞：葡萄；葉斑病；調查

葡萄是我國果業生產的重要品種。農業部統計資料顯示，截至2010年底，我國葡萄栽培總面積達55.2萬hm2，居世界第4位[1]，病害嚴重影響葡萄的產量與品質。本研究室在收到病樣后，通過癥狀描述、病原菌分離鑒定及果園地理位置調查，以期準確對病樣進行診斷，從而為葡萄生產提供科學指導。

1　材料與方法

1.1材料。2015年8月21日，本研究室收到山東省濟寧市農業科學研究院寄來的一份葡萄病葉樣品。

1.2方法

1.2.1癥狀描述及保濕鏡檢。該樣品葉片褪綠、葉脈明顯，上有褐色枯斑，病斑不規則、較小，嚴重時連片、出現穿孔。病斑上無明顯侵染點，無霉層。病斑上滴無菌水保濕12 h后鏡檢。

1.2.2病原菌分離及鑒定。將病葉病斑交界處剪成2 mm見方的小塊，用75%酒精消毒30 s，0.1%升汞消毒30 s，無菌水漂洗3遍后置于PDA培養基上，26℃、黑暗條件培養3 d，挑取菌落邊緣新鮮菌絲，轉入PDA平板上繼續培養，純化后保存備用[2]。刮取純化菌株的菌絲用液氮研成粉末，用艾德萊真菌基因組提取試劑盒提取基因組DNA，用真菌通用引物ITS1&ITS4進行PCR擴增后，交由北京諾賽基因組研究中心測序，測序結果在NCBI網站上進行BLAST比對。

1.2.3病原菌回接。將已知鑒定結果的菌株在PDA培養基上26℃黑暗培養5 d后，制成孢子懸浮液，噴到葡萄葉片上，隔3 d再噴1遍，第2次接種后7 d觀察發病情況，噴清水作為對照。

1.2.4果園地理位置調查。對寄樣人進行電話詢問果園的地理位置及周圍種植作物。

2　結果與分析

2.1鏡檢結果與分離鑒定結果。保濕12 h進行鏡檢未見到病原孢子；分離得到的真菌有2種，一種是棘孢曲霉，另一種是互隔交鐮孢霉。

2.2回接結果。所有處理的回接葉片上均未發現生長異常現象，透光看葉片上也無褪綠小點。

2.3果園地理位置。經調查發現位于該葡萄園上風口處有一家磚廠，磚廠工作正常運行。

3　結論與討論

通過本研究回接結果的分析及文獻查證，結果表明：孢曲霉是葡萄生產上的生防菌[3]，未見互隔交鐮孢霉能引起葡萄病害的相關證據，綜合癥狀描述與保濕鏡檢，我團隊認為該現象并非由真菌侵染引起。

由于該園上風口處有一家磚廠，在磚廠生產過程中會產生粉塵及二氧化硫、氮氧化物、煙塵等空氣污染，在有風天氣，污染物會飄到該園葡萄葉片上，其對葡萄產生的危害主要有：阻塞植物氣孔，降低蒸騰作用；遮蔽光照，降低光合作用；對植物葉片上的蠟質層產生磨損，抑制植物的生理代謝；粉塵中的可溶性鹽與水作用，由氣孔侵入到葉片內部，使植物葉片形成壞死斑點[4]。因此，我們認為此次葡萄葉斑病是由周圍環境污染造成的。環境污染，尤其是空氣污染，不僅危害人類的身體健康，對多種作物的正常生長也會產生巨大威脅，就此我們對該果園及受到相似環境污染為害的作物提出幾點指導意見：①加強肥水管理，增強作物長勢；②在大風天氣葉片噴水，沖淋污染物；③噴施葉片保護劑，注意防病防蟲；④在今后果園或其他作物種植過程中盡量避免選擇有污染源的地域。

參考文獻

[1]王海波，王孝娣，郝志強，等.我國葡萄栽培科研進展[J] .中國果樹，2013 (1)：62～64.

[2]方中達.植病研究法(第三版) [M] .北京：中國農業出版社，1998.

[3]張稼涵.西北地區葡萄園溶磷真菌的篩選、鑒定和促生效應研究[D] .楊凌：西北農林科技大學，2010.

[4]歐金玉，田燕.治理磚廠污染為何這么難[N] .湖南日報，2014 - 7 - 9.

071000河北省農林科學院植物保護研究所張海劍

050061河北省農林科學院石家莊果樹研究所索相敏