常見蔬菜水果農藥殘留檢測技術概述

范雅麗

摘要 對酶抑制檢測法和化學試劑速測法的檢測方法和原理進行了概述，有助于區別蔬菜水果中有機磷農藥殘留的其他速測方法，可為蔬菜、水果中農藥殘留檢測技術的提高提供參考。

關鍵詞 蔬菜；水果；檢測技術；農藥殘留

中圖分類號 TS207.5+3 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2015）18-0289-02

Summary on Common Fruits and Vegetables Pesticide Residue Detection Technology

FAN Ya-li

（Agricultural Product Quality Safety Supervision and Management Station in Qingyang City of Gansu Province，Qingyang Gansu 745000）

Abstract This paper summarized the test method and principle of the enzyme inhibition test and chemical reagents speed measuring method，which helped to distinguish other measuring methods of organophosphorus pesticide residues in fruits and vegetables，so as to provide references for the improvement of detection technology of pesticide residue in fruits and vegetables.

Key words fruits；vegetables；detection technology；pesticide residue

近年來，我國對蔬菜農藥殘留的檢測技術雖然一直在完善，但是蔬菜農藥殘留引發的中毒事件也在頻繁發生，政府及相關部門對檢測技術的要求也越來越高。蔬菜農藥殘留污染主要是有機磷類的和氨基甲酸類，有機磷類的超標情況尤其明顯。我國現有的測定農藥殘留的方法主要有4種，即酶抑制檢測、色譜檢測、酶聯免疫以及化學試劑速測法。本文主要就酶抑制法、化學速測進行了研究，因他們都有相對較低的使用成本，易于推廣。

1 酶抑制法

1.1 檢測原理

在環境特定的情況下，有機磷可以抑制膽堿酯酶的相應功能，即催化水解過程的基本功能，同樣，氨基甲酸酯類農藥也有相同的抑制作用。蔬菜和水果中農藥的濃度越大，它的抑制能力也會相對增強。對其進行抑制的基本原理是，氨基甲酸酯類農藥或者有機磷和乙酰膽堿酯酶經過化學反應后就抑制了酶的活性，如果將擬除蟲菊酯類農藥和AchE經過相應的化學反應后就抑制不了酶的活性。AchE和樣本經過化學反應后抑制了酶的活性，說明蔬菜或者水果中包含著對人體神經有害的物質，反之，沒有抑制酶的活性，說明蔬菜和水果中基本沒有對人體有害的物質[1]。在進行試驗的時候所采用的試劑分別是顯色劑、緩沖液、底物以及膽堿酯酶。

1.2 檢測步驟

把樣本，即蔬菜或者水果的樣本取出來，擦掉上面黏著的泥土和水之類的東西，取出1 g樣本之后將其切碎，如果不是帶葉的蔬菜就取出2 g。在取出的樣本里面加入5 mL緩沖液，并搖晃2～3 min不等，將提取液倒出靜置5 min，接著給比色杯內加入樣本的提取液和酶，分別為2.5 mL、100 μL，10 min后加入100 μL顯色劑，然后加入100 μL底物，將兩者充分混合后再進行比色，比色環節必須在412 nm長的波長下進行。酶抑制法的基本計算公式如下：

抑制率（%）=（？駐AC-？駐AS）/？駐AC×100

式中，？駐AC是對照樣本3 min后與3 min前吸光值之差，？駐AS是被測樣本3 min后與3 min前吸光值之差。

1.3 判定結果

當對酶的抑制率<50%的時候，在蔬菜和水果上農藥殘留的數量就會趨近于沒有；當抑制率在50%～70%之間的時候，蔬菜或者水果中存在這2種農藥殘留的可能性會比較大；當抑制率≥70%的時候，表示這2種農藥殘留肯定是存在的。通過一些氣相色譜儀等檢測工具進行定量定性監測的時候，-10%～110%之間的數字就表示其抑制率必須保持的范圍，假如超過了這個范圍就說明這個操作過程是錯誤的，必須把檢測過程再重新來1遍。

1.4 結果判定標準

要對試驗結果進行準確判定就必須遵照相關儀器測得的數據，每個測定儀器都有規定的測定范圍。很多速測法可以通過目測的方式進行農藥殘留物的測定，即顏色會把陽性和陰性數據顯示出來。超標是陽性的，比如在使用速測靈I型和新靈的時候，檢測液體的顏色逐漸從紫色變成無色時就表示超標，如果紫色根本沒有發生變化或者變化不明顯，仍可以看出是紫色液體，說明農藥殘留沒有超標，即顯示陰性。速測卡顏色的變化也會顯示超標和不超標，速測卡如果完全變為藍色就表示農作物殘留沒有超標，如果速測卡的顏色沒有發生任何變化就表示農作物殘留超出了標準規定的范圍。還有一些檢測儀的亮燈顏色變化也會體現出超標和不超標的情況[2]。

1.5 試驗結果和分析

在整個研究試驗中，采用了快速檢測方法即酶抑制法進行了對有機磷類農藥殘留的監測，最后確定了農藥殘留濃度。本文主要采用酶抑制法，依據國家標準《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測（GB/T 5009.199—2003）》和行業標準《蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測方法（NY/448-2001）》和化學檢測法做了相關的對比試驗。酶抑制法能快速檢出被測樣品中的農藥殘留量，廣泛應用于蔬菜、水果、糧食、茶葉、水及土壤中有機磷和氨基甲酸酯類的農藥殘留進行的快速檢測中，適用于各級農產品檢測中心、工商、技術監督、衛生監督、食品藥品監督管理局、農產品加工企業、農產品種植基地、種植專業合作社、農貿市場、生鮮超市、學校、環保部門、賓館、酒店等領域[3]。endprint

最后對試驗結果進行驗證之時，采用了氣相色譜的方法對酶抑制法的監測結果進行了驗證，通過檢測結果來看，陽性的結果符合率明顯大于陰性結果符合率，陽性的是83%，陰性的是77%。在室內溫度和濕度都進行嚴格的控制之下，即室溫控制在25～28 ℃，室內濕度控制在50%的時候對試驗結果進行測定，這次選取的是對這4種有機磷反應較為靈敏的RP_410型農藥殘留快速測定儀，這個測定儀可以檢測到0.5 mg/kg，CL-1型農藥殘留測定儀再對農藥殘留進行測定，測定結果是有0.5 mg/kg，甲胺磷和久效磷的測定數據都相對較大，分別為1、2 mg/kg。換一種檢測方式檢測到的結果也不同，利用新靈對甲胺磷、敵敵畏進行測試時，可以檢測到1 mg/kg，也可以檢測到4 mg/kg的氧化樂果。甲胺磷、敵敵畏、久效磷可以用速測靈I型檢測到3 mg/kg，也可檢測到5 mg/kg的氧化樂果。速測卡的檢測標準最差是6 mg/kg。

2 化學試劑速測法

2.1 檢測原理

研制金屬離子催化劑，利用這種金屬離子催化劑使得像磷酸酯之類的有機農藥進行催化水解，最后水解成為磷酸和醇。有機磷農藥在強催化劑和監測液B的催化之下，分解形成了磷酸和醇。然后對顏色呈紫色的檢測液A進行研究，這樣有機磷進行水解之后的產物和檢測液A進行反應之后，顏色會發生非常明顯的變化，即紫色最后會逐漸變淺，最后呈無色狀態[4]。

2.2 檢測步驟

首先，取3～4 mL蒸餾水或者潔凈水，如果沒有具體測量的物品，可以在包裝中找出塑料測試盆，把純凈水倒入塑料測試盆的1/5的位置；然后，把有柄的蔬菜葉片取出來2～3片，要求蔬菜葉片舒展，接著清洗葉面，注意要在純凈水通了吸管之后用吸管進行清洗。接著，再取出一個吸管，把三角瓶中存儲的紫紅色液體吸取出來，在盆子里滴2滴，搖晃使之混合均勻，然后再取出塑料瓶中存儲的黃色液體，并將這些液體吸取4滴，滴入到盆子內部，經過振動搖晃后靜置5～10 min后再觀察顏色變化情況。

2.3 結果判斷

如果這幾種液體混合之后顏色都變為無色，則說明這些蔬菜中有機磷的含量大幅度超出了標準量，是不能進行食用的，否則將會產生中毒現象。如果一次測定還不能滿足相應的測定結果，那么可以對這項內容重復測定3～4次，以得出比較實用的結果。

3 速測方式的技術指標

化學速測法是根據有機磷農藥的氧化還原特性進行檢測的方法。有機磷農藥比如磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺在金屬催化劑作用下水解為磷酸及醇等，水解產物與顯色劑反應，使顯色劑的紫紅色褪去變成無色。其檢測步驟為：取農藥溶液3～4 mL，加入紫紅色顯色劑液體2滴混勻。再加入黃色催化劑液體4滴靜5～10 min，如果液體褪色則表示農藥殘留超標。該方法的優點在于它是化學反應，相對生化方法穩定，操作簡便無需培訓，一次可做多個樣品，檢測所需時間短。該方法的缺點是在臨界點附近顏色變化不很明顯，主要針對幾種有機磷農藥敏感，且易受一些還原性物質的干擾[5]。速測卡法和分光光度法是國家標準快速檢驗方法規定的2種快速檢測的生化方法。本儀器采用了最快捷、最簡單的速測卡法。速測卡中的膽堿酯酶（白色藥片）可催化靛酚乙酸酯（紅色藥片）水解為乙酸與靛酚。由于有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶的活性有抑制作用，使催化水解后的顯色發生改變，利用速測卡法測量顯色的不同，即可判斷果蔬樣品是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農藥的殘留情況。

按照已經得到的相關數據結果和使用相關儀器的技術資料，對幾種速測方法進行比較，比如靈敏度、成本、重現性、檢測速度、操作過程等。就速測卡來看，沒有較高的靈敏度，所需要的成本非常高。而惠康速測儀的劣勢是重現性較差，新靈和SN-IA型速測儀的優點是比較明顯的，即檢測速度相當快，靈敏度相對較高，操作實行起來簡單方便，成本也相對較低。但是，ZYD-NP6 和OK-C10的優點和缺點都較為明顯，其優點都具有較為寬闊的檢測對象，重現性也相對較好，但是缺點是操作試驗的過程太過復雜，對酶的保存條件也有較高要求，而且結果也會隨著環境、組織液的色素、操作技巧等發生的變化而產生相應的變化，受到的影響較大[6]。

4 結語

就現在科學技術的發展水平來看，檢測蔬菜農藥殘留的方法主要有2種，一種是色譜法，另外一種是速測法，本文主要針對速測法中的2種進行了概述。酶抑制法和化學速測法主要是定性分析化學殘留，針對含有過高濃度農藥殘留的蔬菜或者水果進行藥性檢測，以防止在農產品之中由于過高的農藥殘留物而導致的中毒事件的發生。酶抑制法和化學速測法在這個過程中起到的作用是有目共睹的。其他諸如色譜法之類的速測方法也有其特定的優勢和特點，因此，在環境的需要發生相關變化的情況下，可以將速測方式進行相應的改變，以達到最終速測效果實現的目的。

5 參考文獻

[1] 張丹，王俊紅，曾正宏.分散固相萃取—氣相色譜法測定蔬菜中多種有機磷農藥殘留[C]//第十屆中國化學會分析化學年會暨第十屆全國原子光譜學術會議論文集.揚州：[出版者不詳]，2009.

[2] 趙建偉，岳永德，湯鋒，等.氣相色譜法測定蔬菜、水果中多種有機磷農藥殘留[J].安徽農業大學學報，2010（1）：82-87.

[3] 鄭斌，黎其萬，邵金良，等.溫度對酶抑制法測定蔬菜有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的影響[J].廣東農業科學，2012（3）：108-109.

[4] 曹趙云，牟仁祥，吳俐，等.程序升溫大體積進樣和解卷積氣相色譜—質譜法測定蔬菜水果中32種農藥殘留量[J].色譜，2014（12）：1390-1399.

[5] 王秋渝，張福金，尹鑫，等.普通白菜中有機磷類農藥殘留檢測定量限的試驗研究[J].內蒙古農業科技，2012（6）：40-41.

[6] 胡業琴.基于介孔氧化鋁的固相萃取及其在食品中農藥殘留分析的應用研究[D].重慶：重慶大學，2014.endprint