青錢柳根際微生物及其多糖累積的相關性分析

摘要 ［目的］了解不同產地青錢柳（Cyclocarya paliurus）根際土壤微生物多樣性及其差異，探討青錢柳多糖與其土壤微生物群落的聯系。［方法］以生長野生青錢柳的5個地區（XJC廣西小江村，GTC貴州格頭村，CBC湖南赤坂村，HGZ江西楊家坪林場，YQP湖北鴉丘坪村）的15個土壤樣品為研究對象，提取土壤微生物總 DNA，結合 Illumina MiSeq 高通量測序技術進行研究。［結果］CBC土樣的細菌群落多樣性最高，GTC土樣的細菌群落多樣性最低。GTC土樣的真菌群落多樣性最高，CBC土樣的真菌群落多樣性最低。經相關性分析可知，細菌Candidatus_Nitrosotalea（奇古菌門的一個未定菌屬）與真菌隱球酵母屬（Cryptococcus）對青錢柳中多糖類成分累積存在極顯著的正相關關系。［結論］野生青錢柳土壤中微生物群落多樣性很豐富，存在大量的微生物類群。青錢柳根際土壤群落組成大部分與青錢柳多糖積累之間相關性不大，但青錢柳多糖的積累可能與其氮代謝有關，有望通過調節青錢柳氮代謝促進其多糖積累。真菌隱球酵母屬（Cryptococcus）的增殖也有益提高其多糖含量。

關鍵詞 根際微生物；多糖累積；Illumina MiSeq 高通量測序；多樣性；相關性

中圖分類號 R 284" 文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2025）04-0149-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.04.031

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Correlation Analysis of Rhizosphere Microorganisms and Polysaccharide Accumulation in Cyclocarya paliurus

CHEN Fei fei^1.2，LI Hong ying^1.2，SUN Ju zhi^1.2 et al

（1.Enshi Tujia amp; Miao Autonomous Prefecture Academy of Agricultural Sciences，Enshi，Hubei 445000;2.Hubei Selenium Industry Technology Research Institute，Enshi，Hubei 445000）

Abstract ［Objective］To understand the diversity and differences of rhizosphere soil microorganisms in Cyclocarya paliurus from different origins，and to explore the relationship between Cyclocarya paliurus polysaccharides and its soil microbial community.［Method］ 15 soil samples in soil growing Cyclocarya paliurus from five areas （XJC Xiaojiang Village，Guangxi;GTC Getou Village，Guizhou;CBC Chiban Village，Hunan;HGZ Yangjiaping Forest Farm，Jiangxi;YQP Yaqiuping Village，Hubei） were selected as the research objects.Total DNA of soil microorganisms was extracted and studied using Illumina MiSeq high throughput sequencing technology.［Result］The bacterial community diversity was the highest in CBC soil samples，and the lowest in GTC soil samples.The fungal community diversity was the highest in GTC soil samples，while the lowest in CBC soil samples.According to the correlation analysis，there was an extremely significant positive correlation between the bacterial Candidatus Nitrosotalea （an undetermined genus of thaumarchaeota） and the fungal Cryptococcus on the accumulation of polysaccharide components in Cyclocarya paliurus.［Conclusion］The diversity of microbial communities in the soil of wild Cyclocarya paliurus was very rich.There was little correlation between the composition of soil bacterial communities in the rhizosphere and the accumulation of polysaccharides.However，the polysaccharide accumulation maybe related to its nitrogen metabolism，which was expected to promote the accumulation of polysaccharides by regulating the nitrogen metabolism of Cyclocarya paliurus.The proliferation of Cryptococcus also was beneficial to increase its polysaccharide content.

Key words Rhizosphere microorganisms;Polysaccharide accumulation;Illumina MiSeq high throughput sequencing;Diversity;Correlation

基金項目 國家自然科學基金項目（31560579）；湖北省重點研發計劃項目（2022BBA0059）；恩施州科技計劃項目（D20230067）。

作者簡介 陳菲菲（1988—），女，湖北恩施人，助理研究員，碩士，從事微生物學研究。*通信作者，農藝師，從事微生物學研究。

收稿日期 2024-04-19

青錢柳常生長在海拔500～2 500 m的多云多霧的森林之中，是我國南方特有的藥食同源植物，具有降血糖、降血壓、提高免疫力等功效^［1］。青錢柳在醫學界被稱為“天然胰島素”，被美國FDA認可^［2］，但其成分復雜，有效成分更是難以分析。

近年來，關于青錢柳的研究越來越多。李磊等^［3］研究發現青錢柳葉富含有胰島素樣作用的微量元素，尤其適合糖尿病人飲用。易醒等^［4-5］研究發現青錢柳提取物能有效降低實驗性糖尿病模型小鼠的餐后血糖，且分析其主要降糖成分為多糖類^［6］、甾體類化合物及內酯成分^［7］。有學者認為，青錢柳能夠降低血糖，可能是因為它含有的功能性成分能夠恢復已病變胰島細胞的結構和功能^［8］。

越來越多的研究發現，青錢柳多糖是青錢柳起降糖作用的主要活性成分之一^［9-11］。Xie等^［10］研究發現青錢柳水提物能有效抑制α-葡萄糖苷酶的活性^［10］；王曉敏等^［11］研究發現青錢柳水提物能夠保護胰腺細胞，從而達到降糖的目的；Ning等^［12］從青錢柳提取物中篩選出了11個α-葡萄糖苷酶的潛在抑制劑，發現大部分這些潛在抑制劑與活性位點的結合作用強于阿卡波糖，從而抑制效果也更好。

綜上所述，此前針對青錢柳的研究主要圍繞其降糖成分和降糖機理方面，對其生長環境的根際微生物群落與其成分積累的相關性少有研究。因此，該研究以生長野生青錢柳（Cyclocarya paliurus）的5個地區（廣西桂林龍勝各族自治縣平等鄉小江村、貴州省黔東南苗族侗族自治州雷山縣方祥鄉格頭村、湖南省懷化市綏寧縣黃桑坪苗族鄉赤坂村、江西省九江市修水縣黃港鎮柘坑村楊家坪林場、湖北省恩施市屯堡鄉鴉丘坪村）的15個土壤樣品為材料，分析野生青錢柳根際微生物群落與其多糖積累的相關性，以期為青錢柳的優質高產栽培提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 研究區域

從自然生長青錢柳的5個地點進行采樣，即廣西桂林龍勝各族自治縣平等鄉小江村（XJC）、貴州省黔東南苗族侗族自治州雷山縣方祥鄉格頭村（GTC）、湖南省懷化市綏寧縣黃桑坪苗族鄉赤坂村（CBC）、江西省九江市修水縣黃港鎮柘坑村楊家坪林場（HGZ）、湖北省恩施市屯堡鄉鴉丘坪村（YQP），采樣點基本信息詳見表1。

1.2 樣品采集

每個采樣點采集3～5株生長良好的青錢柳的根際土壤50～100 g，樣品保存于滅菌的密封袋中，在-80 ℃下保存，備用。

1.3 儀器與設備

土壤DNA提取試劑盒、DNA膠回收純化試劑盒，天根生化科技（北京）有限公司；凝膠成像儀，美國伯樂生物科技公司；核酸蛋白濃度測定儀Nanodrop One，賽默飛世爾科技公司；電泳儀，北京六一生物科技有限公司；H-1650R臺式高速冷凍離心機，湖南凱達科學儀器有限公司。

1.4 試驗方法

1.4.1 土壤總DNA的提取及PCR擴增。采用土壤DNA提取試劑盒提取樣品基因組DNA，并用核酸蛋白濃度測定儀Nanodrop One測定其濃度。將每個樣品按照下述引物及反應體系配制好，每個樣品3個重復，進行PCR擴增。擴增結束后混合每個樣品的3個重復的PCR產物，進行凝膠電泳（1%瓊脂糖、120 V、30 min）試驗。

引物：①擴增土壤微生物16S rRNA 基因V4V5區引物515F（5′-GTGCCAGCMGCCGCGGTAA-3′）和907R （5′-CCGTCAATTCMTTTRAGTT-3′）；②擴增ITS1區引物ITS5-1737F（5′-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3′）和ITS4-R （5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）。

50 μL 16S rRNA 基因V4V5區PCR反應體系：引物515F（20 ng/μL）1 μL，引物907R （20 ng/μL）1 μL，2× Premix Taq 25 μL，模板（20 ng/μL）3 μL，滅菌超純水20 μL。

50 μL ITS1區PCR反應體系：引物ITS5-1737F（20 ng/μL）1 μL，引物ITS4-R（20 ng/μL））1 μL，2× Premix Taq 25 μL，模板（20 ng/μL）3 μL，滅菌超純水20 μL。

PCR反應條件：94 ℃ 5 min，94 ℃ 30 s，52 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，30個循環；72 ℃ 10 min，4 ℃保持。

1.4.2 測序及分析。

將擴增后的產物樣品送往武漢中圣泰克生物科技有限公司進行測序分析。

1.4.3 多糖的測定。

在每個采樣點采集15～20株生長良好的青錢柳，按照保健食品功效成分檢測方法（2011版）中多糖檢測方法進行檢測。

1.5 數據處理

土壤微生物測序結束之后，所得數據及多糖檢測結果均用Excel 2016軟件和SPSS 19.0軟件進行處理分析，用OriginPro 2021軟件進行繪圖。

2 結果與分析

2.1 OTU 聚類分析序列統計及多樣性分析

該試驗選取 5 個地區的野生青錢柳的根際土壤進行測定。細菌基因序列測定結果（表2）顯示，共獲得122 984條有效序列數，XJC、GTC、CBC、HGZ、YQP所含OTU數分別為1 823、1 783、1 784、2 331、2 557；不同組別的土壤中Shannon指數從高到低依次為CBCgt;YQPgt;XJCgt;HGZgt;GTC，說明CBC土樣的細菌群落多樣性最高，GTC土樣的細菌群落多樣性最低，即CBC土樣的細菌類群最豐富，GTC土樣的細菌類群最少。真菌基因序列測定結果（表3）顯示，共獲得217 558條有效序列數，XJC、GTC、CBC、HGZ、YQP所含OTU數分別為823、1 308、366、1 089、1 312；不同組別的土壤中Shannon指數從高到低依次為GTCgt;YQPgt;XJCgt;HGZgt;CBC，說明GTC土樣的真菌類群最豐富，CBC土樣的真菌類群最少。

5個樣品的細菌、真菌Shannon 指數及覆蓋率的分析結果（表2、表3和圖1b）表明，5個樣品中大部分微生物類群已完成測序，可以進行后續分析。

2.2 群落結構分析

2.2.1 細菌群落結構分析。

從圖2可以看出，5個區域土壤樣品高通量測序后共獲得14個門和未確定類群，且5個區域土壤樣品均有14門的微生物。

在這些土壤中占優勢的菌門及其相對豐度分別為酸桿菌門（Acidobacteria，24.81%～36.13%）、變形菌門（Proteobacteria，25.13%～32.82%）、浮霉菌門（Planctomycetes，6.88%～10.57%）、疣微菌門（Verrucomicrobia，4.77%～8.97%）。且5個區域的土樣中占優勢的菌門均是酸桿菌門、變形菌門；XJC組土樣、 GTC組土樣、YQP組土樣中酸桿菌門所占比例高于變形菌門，而CBC組土樣、HGZ組土樣中變形菌門所占比例高于酸桿菌門。

5個區域土壤樣品高通量測序后共獲得887個菌屬。如圖3所示，優勢類群為一未能分類的細菌屬，隨后依次為酸桿菌屬（Acidibacter，0.91%～5.20%）、熱酸菌屬（Acidothermus，0.32%～2.94%）、鞘氨醇單胞菌屬（Bryobacter，1.84%～2.82%）、黃桿菌屬（Flavobacterium，0.11%～2.41%）。

2.2.2 真菌群落結構分析。

從圖4可以看出，5個區域土壤樣品高通量測序后共獲得6個門和未確定類群，且5個區域土壤樣品均有6個門的微生物。6個門及其相對豐度分別為纖毛屬菌門（Ciliophora，0.05%～1.21%）、子囊菌門（Ascomycota，37.07%～55.72%）、擔子菌門（Basidiomycota，17.95%～35.76%）、壺菌門（Chytridiomycota，0.11%～1.25%）、羅澤洛菌塔門（Rozellomycota，0.06%～5.41%）、接合菌門（Zygomycota，1.25%～18.50%）。且5個區域的土樣中占優勢的菌門均是子囊菌門、擔子菌門。

5個區域土壤樣品高通量測序后共獲得653個菌屬。如圖5所示，優勢類群為葉杯菌屬（Ciborinia，0.58%～35.54%）、牛肝菌屬（Boletus，0.09%～14.58%）、孢霉屬（Mortierella，0.09%～13.06%）、濕傘屬（Hygrocybe，0.10%～11.68%）、絲瑚菌屬（Aphanobasidium，0.06%～11.28%）、古根菌屬（Archaeorhizomyces，0.10%～9.67%）。

2.3 多糖含量測定結果

依據保健食品功效成分檢測方法（2011版）測定青錢柳多糖的含量，結果表明（圖6），YQP（湖北鴉丘坪村）組青錢柳中多糖含量高于其他組，且與XJC（廣西小江村）組、GTC（貴州格頭村）組差異不顯著，與CBC（湖南赤坂村）組、HGZ（江西楊家坪林場）組差異顯著。由此可知，不同地區青錢柳樣本中的多糖含量有很大差異，這可能與它們所處的生存環境有關。

2.4 不同地區青錢柳多糖含量聚類分析

為了研究不同地區青錢柳多糖含量的相似性，利用SPSS 19.0系統軟件中的系統聚類法，對5個不同地區青錢柳的多糖含量進行聚類分析，結果如圖7所示。從圖7可以看出，5個青錢柳產地分為三大類， 其中YQP樣本中多糖含量與其他幾個地方距離較遠，為一類；而CBC組、HGZ組樣本質量相似性最高，為一類；XJC組、GTC組為一類。以CBC（湖南赤坂村）樣本為基準點，其距離由近及遠依次為HGZ（江西楊家坪林場）、 XJC（廣西小江村）、GTC（貴州格頭村）、YQP（湖北鴉丘坪村）。

2.5 不同地區青錢柳根際土壤微生物群落與其多糖含量的相關性分析

2.5.1 細菌群落與其多糖含量的相關性分析。

為了進一步分析青錢柳根際微生物與青錢柳多糖含量的相關性，利用皮爾森相關性分析青錢柳屬水平的細菌與其多糖含量的關系。結果發現（表4），大部分細菌類群與多糖含量的相關性不大，但Candidatus_Nitrosotalea（奇古菌門的一個未定菌屬）與其多糖含量呈極顯著正相關（Plt;0.01）。這些結果表明，青錢柳根際土壤細菌群落組成與青錢柳多糖積累之間存在一

定相關性。

2.5.2 真菌群落與其多糖含量的相關性分析。

為了進一步分析青錢柳根際微生物與青錢柳多糖含量的相關性，利用皮爾森相關性分析青錢柳屬水平的真菌與其多糖含量的關系。結果發現（表5），真菌中隱球酵母屬（Cryptococcus）對青錢柳中多糖類成分累積存在極顯著的正相關關系（Plt;0.01），說明隱球酵母屬可能是青錢柳潛在的促生微生物。

3 討論與結論

在植物的根上聚居著各種微生物，形成了一個特殊的微生態環境——植物根際微生物。植物根系的生長發育直接影響這些微生物的生長、分布和繁殖，對植物有效成分累積有重要作用^［13-15］。路哲^［16］研究不同土壤環境華細辛根際微生物群落與其揮發油組分間的關系，利用DGGE技術探索華細辛揮發油各主要組分積累與細菌群落的關系，發現兩者之間關系較為密切。謝巧妮^［17］利用高通量測序技術研究烏頭生長過程中根際土壤微生物群落與植物體有效成分變化關系，發現烏頭有效成分中新烏頭堿（MA）、烏頭堿（AC）、次烏頭堿（HA）的含量均與根際土壤微生物生物量碳（MBC）呈負相關，MBC含量的增加會抑制這幾種有效成分的積累；與前3種有效成分不同，苯甲醜新烏頭堿（BMA）與根際土壤MBC呈正相關。越來越多的學者運用高通量測序技術研究根際微生物與植物有效成分含量的相關性，它能夠將樣本的總DNA逐一測序^［18］，從而分析出樣本中微生物群落的多樣性和復雜性^［19-21］。隨著研究的深入，學者們對微生物群落的組成、結構、功能以及影響有了更多、更深入的了解^［22-23］。很多學者陸續研究了包括黃芩、青蒿、羊蹄、銀杏等在內的藥食原料^［24-27］。童炳麗^［28］研究了米槁根際微生物與其活性成分積累的相關性，發現了與米槁果實4種藥用成分呈明顯的正相關關系的菌屬。李巧玲等^［29］研究發現箭葉淫羊藿根際微生物與土壤理化性質及酶活性一起參與調控有效成分的合成與積累。

該試驗研究了5個不同區域青錢柳根際微生物及其與多糖含量的相關性，結果表明，大部分微生物類群與多糖含量的相關性不大，但細菌菌屬Candidatus_Nitrosotalea（奇古菌門的一個未定菌屬）與其多糖含量呈極顯著正相關。氨氧化古菌（Ammonia oxidizing archaea，AOA）屬于奇古菌門 （Thaumarchaeota）^［30］，包括 Nitrososphaera、Nitrosopumilus、Nitrosotalea、Nitrosocaldus、Nitrososphaera 共5個屬^［31-32］，它們在全球氮循環中氧化氨氮成亞硝酸鹽起關鍵性作用^［33］。因此，青錢柳多糖的積累可能與其氮代謝有關。眾所周知，氮素是促進植物生長的重要營養元素，對保障農作物高產極為關鍵。而植物生長的直觀體現為生物量的積累。植物吸收氮素后通過氮同化等一系列代謝過程，生成核酸、蛋白等大量功能元件以滿足光合作用及生長所需。光合作用固定CO 2生成碳水化合物，其中70%以上轉化為纖維素等結構，多糖用于植物體自身的生長發育，進而促進氮素吸收與利用等生理過程。Gao等^［34］利用正向遺傳學手段將水稻中控制纖維素水平的QTL-qCel1與氮利用效率的QTL-qNLA1共定位，并通過基因克隆將其確定為同一個基因，即轉錄因子均為MYB61，發現纖維素調控因子可促進氮利用，并揭示了相關的分子機制。同時，真菌菌屬與多糖含量的相關性分析表明，隱球酵母屬（Cryptococcus）對青錢柳中多糖類成分累積存在極顯著的正相關關系。隱球酵母屬（Cryptococcus）的細胞會產生一些胞內儲存物，有效抑制細胞壁代謝酶活性，延緩細胞壁多糖降解，從而提高多糖含量^［35-36］。

綜上所述，通過該研究初步發現青錢柳多糖積累與在氮代謝中起重要作用的氨氧化古菌呈正相關，下一步可通過人工接菌試驗來證明，或者通過直接調節青錢柳氮代謝關鍵因子來觀察其多糖的積累量。對于青錢柳本身生長環境和根際微生物對其生長及其有效成分積累的影響均可進行進一步深入研究，以期可以通過改變其土壤生態因子來影響其生長或有效成分的積累。

參考文獻

［1］

喬卿梅，王鵬，程茂高.青錢柳的研究現狀［J］.河南林業科技，2006，26（1）：24-25，28.

［2］ LIU J H，STURGEON R E，WILLIE S N.Open focused microwave assisted digestion for the preparation of large mass organic samples［J］.Analyst，1995，120（7）：1905-1909.

［3］ 李磊，謝明勇，吳熙鴻，等.用MAP-ICP-MS測定保健食品青錢柳及其浸提物中多種礦質營養素的研究［J］.食品科學，2000，21（2）：53-57.

［4］ 易醒，謝明勇，溫輝梁，等.青錢柳對四氧嘧啶糖尿病小鼠降血糖作用的研究［J］.天然產物研究與開發，2001，13（3）：52-54，57.

［5］ 李磊，謝明勇，易醒.青錢柳多糖降血糖作用研究［J］.中藥材，2002，25（1）：39-41.

［6］ 王文君，蔣艷，吳少福，等.青錢柳醇提取物對糖尿病小鼠降血糖作用的研究［J］.畜牧獸醫學報，2003，34（6）：562-566.

［7］ 何明，涂長春，黃起壬，等.梅山降糖神茶對四氧嘧啶糖尿病大鼠的降糖作用［J］.中國藥學雜志，1996，31（12）：723-725.

［8］ 蘇玉卿，李佳桐，李伯林，等.青錢柳研究進展［J］.農技服務，2016，33（1）：5-7，15.

［9］ KURIHARA H，FUKAMI H，KUSUMOTO A，et al.Hypoglycemic action of Cyclocarya paliurus（Batal.）Iljinskaja in normal and diabetic mice［J］.Biosci Biotechnol Biochem，2003，67（4）：877-880.

［10］ XIE J H，XIE M Y，NIE S P，et al.Isolation，chemical composition and antioxidant activities of a water soluble polysaccharide from Cyclocarya paliurus （Batal.） Iljinskaja［J］.Food chemistry，2010，119（4）：1626-1632.

［11］ 王曉敏，舒任庚，蔡永紅，等.青錢柳水提液對糖尿病小鼠胰島細胞的保護作用［J］.時珍國醫國藥，2010，21（12）：3146-3147.

［12］ NING Z W，ZHAI L X，HUANG T，et al.Identification of α glucosidase inhibitors from Cyclocarya paliurus tea leaves by using UF UPLC Q/TOF MS/MS and molecular docking［J］.Food amp; function，2019，10（4）：1893-1902.

［13］ BERG G，SMALLA K.Plant species and soil type cooperatively shape the structure and function of microbial communities in the rhizosphere［J］.FEMS microbiology ecology，2009，68（1）：1-13.

［14］ JALEEL C A，MANIVANNAN P，SANKAR B，et al.Pseudomonas fluorescens enhances biomass yield and ajmalicine production in Catharanthus roseus under water deficit stress［J］.Colloids surfaces B：Biointerfaces，2007，60（1）：7-11.

［15］ WU L K，WANG H B，ZHANG Z X，et al.Comparative metaproteomic analysis on consecutively Rehmannia glutinosa monocultured rhizosphere soil［J］.PLoS One，2011，6（5）：1-12.

［16］ 路哲.不同土壤環境華細辛根際微生物群落與其揮發油組分間的關系［D］.西安：陜西師范大學，2014.

［17］ 謝巧妮.烏頭生長過程中根際土壤微生物群落與植物體有效成分變化關系的研究［D］.西安：陜西師范大學，2016.

［18］ MUNIER LAMY C，DENEUX MUSTIN S，MUSTIN C，et al.Selenium bioavailability and uptake as affected by four different plants in a loamy clay soil with particular attention to mycorrhizae inoculated ryegrass［J］.Journal of environmental radioactivity，2007，97（2/3）：148-158.

［19］ 秦楠，栗東芳，楊瑞馥.高通量測序技術及其在微生物學研究中的應用［J］.微生物學報，2011，51（4）：445-457.

［20］ 李慶崗，陶立.高通量測序技術及其在生命科學中的應用［J］.畜牧與飼料科學，2012，33（2）：25-28.

［21］ GANS J，WOLINSKY M，DUNBAR J.Computational improvements reveal great bacterial diversity and high metal toxicity in soil［J］.Science，2005，309（5739）：1387-1390.

［22］ SALAM L B，ILORI M O，AMUND O O，et al.Characterization of bacterial community structure in a hydrocarbon contaminated tropical African soil［J］.Environental technology，2018，39（7）：939-951.

［23］ ZHANG J，JIAO S，LU Y H.Biogeographic distribution of bacterial，archaeal and methanogenic communities and their associations with methanogenic capacity in Chinese wetlands［J］.Science of the total environment，2018，622/623：664-675.

［24］ 張向東，何偉.不同種植年限黃芩田土壤微生物數量特征研究［J］.陜西農業科學，2011，57（4）：3-4，8.

［25］ 劉飛，伍曉麗，崔廣林，等.青蒿根際微生物數量動態及其與青蒿素含量的關系研究［J］.時珍國醫國藥，2010，21（1）：37-38.

［26］ 倪元博.不同土壤條件下羊蹄根際土壤微生物與藥用成分比較研究［D］.長春：吉林大學，2019.

［27］ 陳冉，劉志強，王丹丹.基于高通量測序比較不同產地藥用銀杏根際土壤微生物多樣性［J］.藥物生物技術，2021，28（2）：117-122.

［28］ 童炳麗.米槁根際微生物與其藥材活性成分的相關性研究［D］.貴陽：貴州大學，2020.

［29］ 李巧玲，韓鳳，曹然，等.箭葉淫羊藿不同時期根際微生物群落組成及其與有效成分累積的相關性分析［J］.中草藥，2023，54（2）：641-651.

［30］ PESTER M，RATTEI T，FLECHL S，et al.amoA based consensus phylogeny of ammonia oxidizing archaea and deep sequencing of amoA genes from soils of four different geographic regions［J］.Environmental microbiology，2012，14（2）：525-539.

［31］ GAO J F，FAN X Y，PAN K L，et al.Diversity，abundance and activity of ammonia oxidizing microorganisms in fine particulate matter［J］.Scientific feports，2016，6（1）：1-12.

［32］ BOCK E，WAGNER M.Oxidation of inorganic nitrogen compounds as an energy source［M］//DWORKIN M，FALKOW S，ROSENBERG E，et al.The prokaryotes.New York： Springer，2006： 457-495.

［33］ 徐建宇，毛艷萍.從典型硝化細菌到全程氨氧化微生物：發現及研究進展［J］.微生物學通報，2019，46（4）：879-890.

［34］ GAO Y H，XU Z P，ZHANG L J，et al.MYB61 is regulated by GRF4 and promotes nitrogen utilization and biomass production in rice［J］.Nature communications，2020，11（1）：1-12.

［35］ 王蕓.β-葡聚糖誘導提高Cryptococcus podzolicus對蘋果青霉病的防治效力及其機制研究［D］.鎮江：江蘇大學，2018.

［36］ 杜嶸宇，黃二賓，吳化雨，等.羧甲基殼聚糖誘導羅倫隱球酵母對葡萄柚果實細胞壁代謝的影響［J］.食品科學，2024，45（5）：243-249.