長沙縣地區(qū)門診兒童常見上呼吸道感染病原體共感染特征

彭杜平,洪迎瑞,喻娟娟,范英杰,李興軍,王 群,周凡琦,楊牡丹,李 敏

1.長沙縣婦幼保健院兒科,湖南長沙 410100;2.長沙縣婦幼保健院檢驗(yàn)科,湖南長沙 410100;3.感染性疾病與腫瘤基因診斷技術(shù)國家地方聯(lián)合工程研究中心,湖南長沙 410000

世界衛(wèi)生組織(WHO)2019年全球十大死亡病因數(shù)據(jù)及國家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布的《2021中國衛(wèi)生健康統(tǒng)計(jì)年鑒》報(bào)告顯示,全球呼吸道感染疾病形勢日趨嚴(yán)重,尤其兒童等免疫力低下者更易受呼吸道感染疾病影響。《中國醫(yī)療機(jī)構(gòu)兒童疾病構(gòu)成的系統(tǒng)評(píng)價(jià)》研究報(bào)道表明,無論門診就診兒童還是住院兒童,呼吸道感染疾病均嚴(yán)重威脅其健康,對(duì)家庭及社會(huì)造成了嚴(yán)重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)[1]。目前,兒童呼吸道感染疾病高發(fā)且臨床表現(xiàn)復(fù)雜,呼吸道感染病原體種類多,上呼吸道感染病原體主要為病毒,單個(gè)病原體感染或多個(gè)病原體混合感染可能出現(xiàn)相同或不同的癥狀,即使感染同種呼吸道病原體時(shí),由于個(gè)體差異也會(huì)出現(xiàn)不同的癥狀。臨床受限于有限的病原學(xué)檢測手段,常無法快速、準(zhǔn)確地鑒別致病病原體,導(dǎo)致不少門急診醫(yī)生可能依據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行診斷與治療,易造成抗菌藥物濫用和細(xì)菌耐藥性增加。呼吸道病原體的感染及傳播受諸多因素影響[2-4],地區(qū)、文化背景、經(jīng)濟(jì)水平、醫(yī)療保障水平、氣候條件及研究人群都可能是其影響因素,了解本地區(qū)的兒童呼吸道感染病原體特征對(duì)本地區(qū)流行病防控具有重要意義。因此,本研究采用高靈敏度、特異度的多重聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)對(duì)2022年1—6月長沙縣婦幼保健院收治的17 456例門急診患兒進(jìn)行檢測,全面、深入了解長沙縣的兒童上呼吸道感染流行的病原體及其感染特征等,以期為本地區(qū)上呼吸道感染患兒早期診斷、治療及合理用藥提供可靠依據(jù),同時(shí)為流行病學(xué)研究提供參考依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析湖南省長沙市長沙縣婦幼保健院門急診于2022年1—6月收治的17 456 例上呼吸道感染患兒(臨床初診有發(fā)熱或呼吸道癥狀,如咳嗽、咳痰、呼吸困難,既往無哮喘、支氣管擴(kuò)張等基礎(chǔ)疾病,年齡<14歲)的臨床資料,其中男9 636 例,女7 820例。根據(jù)兒科年齡分組標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)行年齡分組:<1歲1 524例,1～<4歲5 959例,4～<7歲5 739例,7～<14歲4 234例。所有患兒按照院內(nèi)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),均采樣過咽拭子標(biāo)本。

1.2儀器與試劑 所有咽拭子標(biāo)本采用湖南圣湘生物科技股份有限公司的6項(xiàng)呼吸道病原體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法,國械注準(zhǔn):20213400256)檢測,按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作,檢測6種上呼吸道感染常見病原體,包括:甲型流感病毒(Flu.A)、乙型流感病毒(Flu.B)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、鼻病毒(HRV)、肺炎支原體(MP)。采用儀器為Natch CS2全自動(dòng)核酸提取儀(圣湘生物科技股份有限公司,中國)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(Applied Biosystems,美國)。

1.3檢測方法 分別取200 μL待測標(biāo)本、試劑盒配套的陰性對(duì)照和陽性對(duì)照加入1.5 mL離心管中,按試劑盒及儀器說明書操作提取核酸。在兩管多重PCR反應(yīng)液中分別加入5 μL核酸,進(jìn)行PCR擴(kuò)增和檢測。

1.4觀察指標(biāo) 分析2022年1—6月6種呼吸道感染病原體檢出情況;分析6種呼吸道感染常見病原體混合感染情況;分析不同性別患兒6種呼吸道感染病原體檢出情況;比較不同年齡段患兒6種呼吸道感染病原體檢出率及混合感染率; 由于本院2022年4—6月重癥肺炎患兒比例明顯增加,對(duì)臨床診斷、治療要求進(jìn)一步提高,因此本研究收集了MP感染患兒的治療信息,以及白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、中性粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比等實(shí)驗(yàn)室檢測指標(biāo)結(jié)果,針對(duì)性分析MP混合及單一感染患兒的治療時(shí)間和實(shí)驗(yàn)室檢測指標(biāo)特征。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用R軟件(version 4.1.0)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析。不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以M(P25,P75)表示;兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn),多組間比較采用Krusral-WanisH檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.12022年1—6月呼吸道感染病原體檢出情況 17 456例呼吸道感染患兒中,共檢出9 239 例患兒存在病原體感染,總檢出率為52.93%,包括8 538例單一病原體感染(48.91%),以及701例混合感染(4.02%);檢出率最高的病原體為Flu.B,其他依次為HRV、Flu.A、RSV、ADV、MP,見表1。

表1 呼吸道常見病原體檢出率

2.2呼吸道感染常見病原體混合感染情況 在701例混合感染病例中,檢出690例2種病原體混合感染、11例3種病原體混合感染,分別占總樣本的3.95%、0.06%,具體共感染病原體分布見表2,主要是Flu.B混合感染(占混合感染的45.22%),其次為ADV混合感染、Flu.A混合感染,此外MP及ADV更易與其他病原體發(fā)生共感染,MP混合ADV、Flu.A、Flu.B或HRV感染共61例,占MP總感染的24.11%(61/253),ADV混合感染272例,占ADV總感染的29.99%(272/907)。見表2。

表2 呼吸道感染常見病原體混合感染情況

2.3不同性別患兒呼吸道感染病原體檢出情況 9 636例男童中,5 104例檢出病原體(52.96%),其中混合感染393例(4.08%),7 820例女童中,4 135例檢出病原體(52.89%),其中混合感染308例(混合感染率為3.94%),女童與男童的呼吸道感染病原體檢出率及混合感染率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。但男童中MP與Flu.B混合感染率(0.052%)及MP與ADV混合感染率(0.026%)分別高于女童中MP與Flu.B混合感染率(0.052%)及MP與ADV混合感染率(0.013%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其他常見病原體的檢出率在女童與男童間比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同性別患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

2.4不同年齡段患兒呼吸道感染病原體檢出率及混合感染率比較 隨著年齡增長,Flu.B及MP檢出率明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而4～<7歲患兒Flu.A檢出率明顯高于其他年齡段患兒,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),<1歲患兒RSV檢出率明顯高于其他年齡段患兒,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),1～<4歲患兒ADV檢出率高于其他年齡段患兒,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。此外,不同年齡段患兒的混合感染率比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),1～<7歲患兒相對(duì)較高,占4.2%～4.4%,<1歲和7～<14歲患兒中MP與ADV混合感染率相對(duì)高于其他年齡段患兒,>1歲患兒中Flu.A、Flu.B或RSV與ADV混合感染率相對(duì)高于<1歲患兒;HRV與ADV共感染主要在1～<7歲患兒,HRV與RSV共感染最易發(fā)生于<1歲患兒,HRV與Flu.B共感染最易發(fā)生于7～<14歲患兒。見表4。

表4 不同年齡段患兒呼吸道感染病原體檢出率及混合感染率比較[n(%)]

2.5MP混合及單一感染情況比較 MP感染的患兒中,混合感染患兒白細(xì)胞計(jì)數(shù)異常、中性粒細(xì)胞百分比異常、淋巴細(xì)胞百分比異常的比例相對(duì)更高,MP單一感染患兒的血紅蛋白異常比例相對(duì)更高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而MP混合及單一感染治療時(shí)間比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 MP混合及單一感染情況比較[M(P25,P75)或n(%)]

3 討 論

呼吸道感染疾病是兒童最常見疾病之一,與病原體的流行、年齡、地區(qū)、季節(jié)等差異相關(guān),研究證實(shí)引起呼吸道感染的病原體種類繁多,既有單個(gè)病原體感染,也有多個(gè)病原體混合感染,導(dǎo)致呼吸道感染的病情復(fù)雜、臨床癥狀多樣。因此,快速、準(zhǔn)確地檢測出呼吸道感染的病原體具有十分重要的意義,通過早診斷、早干預(yù),采用精準(zhǔn)化方案治療,可有效降低呼吸道感染發(fā)病率和病死率,并且快速確定病原體有助于及時(shí)控制病原體流行暴發(fā),也能為流行病學(xué)監(jiān)測和疫情防控提供強(qiáng)有力的支持[5-6]。

本研究采用《兒童呼吸道感染病原體核酸檢測專家共識(shí)》[7]推薦的核酸檢測方法,采用靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均較高的呼吸道病原體多重PCR檢測方法,首次針對(duì)長沙縣的兒童呼吸道感染流行性病原譜特征進(jìn)行全面分析。長沙縣婦幼保健院2022年1—6月的17 456例上呼吸道感染患兒檢測數(shù)據(jù)顯示:總檢出率為52.9%,混合感染率為4.0%,主要病原體依次為Flu.B、HRV、Flu.A、RSV、ADV和MP,以上病原體檢出率分別為24.00%、11.41%、8.41%、6.54%、5.20%、1.45%,其中男童與女童的病原體檢出率及混合感染率比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]。

區(qū)別于既往文獻(xiàn)報(bào)道呼吸道感染集中于幼兒期或?qū)W齡前兒童[9-10],本研究中7～<14歲患兒呼吸道感染病原體檢出率最高,并且隨年齡增長,Flu.B及MP檢出率明顯升高。這可能與本地區(qū)學(xué)齡期兒童入學(xué)后的集體生活和社交活動(dòng)相關(guān),提示應(yīng)加強(qiáng)對(duì)本地區(qū)學(xué)齡期兒童的呼吸道感染疾病防控,減少感染或交叉感染風(fēng)險(xiǎn)。

在本研究中,混合感染率為4.0%,低于國內(nèi)其他地區(qū)的研究報(bào)道[11-13],主要為兩種病原體混合感染,尤其是Flu.B的混合感染;另外不同年齡段患兒的混合感染率有明顯差異,在1～<7歲患兒中相對(duì)較高(占4.2%～4.4%),7～<14歲患兒的混合感染率則明顯降低(約3.5%),可能是因?yàn)閷W(xué)齡期兒童與外界接觸增多,自身免疫力逐漸增強(qiáng),對(duì)各類病原體免疫力有所增加。

需要注意的是,盡管本研究MP感染患兒較少,但發(fā)生混合感染的比例卻不低,與中國疾病預(yù)防控制中心發(fā)表的2009-2019年全國范圍全年齡段急性呼吸道感染患者前瞻性流行病監(jiān)測數(shù)據(jù)相符[14],MP混合感染約占MP總感染的24.11%,MP混合感染患兒白細(xì)胞計(jì)數(shù)異常、中性粒細(xì)胞百分比異常、淋巴細(xì)胞百分比異常的比例相對(duì)MP單一感染患兒更高,提示有必要及時(shí)、準(zhǔn)確鑒別診斷呼吸道感染病原體,關(guān)注本地區(qū)混合感染的潛在影響。遺憾的是,本研究僅納入分析長沙縣婦幼保健院2022年1—6月檢測數(shù)據(jù),觀察時(shí)間較短,數(shù)據(jù)分析結(jié)果可能存在偏倚,未能完整反映新型冠狀病毒感染疫情期間長沙縣地區(qū)兒童上呼吸道感染及共感染變化特征。

隨著分子診斷技術(shù),尤其多重PCR技術(shù)及一體化檢測技術(shù)的進(jìn)步,通過高靈敏度、高特異度地一次性檢測呼吸道感染常見病原體,有助于及時(shí)診斷或排除多種病原體感染[15-16],不遺漏多種病原體混合感染,明顯提高了呼吸道感染疾病的診斷效率,切實(shí)在患者初次就診時(shí)即開展精準(zhǔn)檢測,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)治療。