CK5/6、Chk1表達在乳腺癌診斷及預后評估中的價值分析

范婧婧 陳 眾 谷軍星 王新帥

乳腺癌(breast cancer,BC)是最常見的癌癥,也是全球女性癌癥死亡的主要原因。乳腺癌主要為腺上皮組織惡性病變,通過血液和淋巴傳播將癌細胞轉移到遠處器官和組織[1]。臨床常采用手術、放療、化療及分子靶向治療等治療手段,其中手術治療聯合放化療最為常見[2-3]。其中細胞角蛋白 5/6 (CK5/6)和檢查點激酶 1(Chk1)是常見的乳腺癌生物學標志物[4-5]。本研究探討了CK5/6、Chk1在乳腺癌診斷及預后評估中的應用,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2017年8月至2020年8月本院收治乳腺癌患者90例。納入標準:①符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2017年版)》[6],經病理診斷為乳腺癌; ②患者簽署自愿受試同意書,患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標準:① 臨床資料不完整;②合并嚴重免疫系統、循環系統疾病或惡性腫瘤者;③合并心血管、肝、腎、肺等重要器官組織疾病;④合并中樞神經系統疾病或精神障礙。另選取同期在本院收治的20例乳腺良性病變患者作為對照組。

1.2 收集資料及隨訪

收集患者基本臨床資料,通過門診復診或電話詢問對 90例乳腺癌患者進行隨訪,記錄患者生存時間,隨訪截止時間為 2021 年 12月。

1.3 免疫組化法檢測CK5/6、Chk1

用免疫組織化學檢測組織CK5/6、Chk1表達,以鼠抗人CK5/6、Chk1單克隆抗體為一抗,用已知陽性切片作陽性對照,PBS代替一抗作陰性對照,用蘇木素復染細胞核,結果判斷,CK5/6陽性產物主要位于細胞質,Chk1陽性產物主要位于細胞核,視野中出現粗細一致的棕黃色為陽性染色,無棕色反應為陰性染色。在陽性顆粒密集部位隨機選取10個200倍視野,計數每個視野中細胞的染色情況,取平均值。根據陽性細胞占全部細胞數的百分數對其進行分級,陰性為陽性細胞數<10%;陽性為陽性細胞數> 10%。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 CK5/6、Chk1表達與乳腺癌臨床病理特征的相關性分析

CK5/6、Chk1表達與乳腺癌組織學分級有關(P<0.05),與乳腺癌患者年齡、淋巴結轉移、腫瘤大小、組織學分級無關(P>0.05),見表1。

表1 CK5/6、Chk1表達與乳腺癌臨床病理特征的相關性分析/例

2.2 CK5/6、Chk1表達與患者總生存期和無病生存期的關系

CK5/6、Chk1表達陰性患者總生存率均顯著高于陽性表達患者(P<0.05),見表2。

表2 CK5/6、Chk1表達與患者總生存期和無病生存期的關系(例,%)

2.3 兩組CK5/6、Chk1的表達陽性率比較

乳腺癌組織CK5/6、Chk1表達陽性率顯著高于乳腺良性病變組(P<0.05),見表3。

表3 乳腺癌與乳腺良性組織中CK5/6、Chk1的表達比較(例,%)

2.4 CK5/6、Chk1表達對乳腺癌的診斷價值分析

根據ROC曲線分析可知,CK5/6、Chk1診斷乳腺癌AUC分別是0.701,0.729,聯合檢測AUC為0.803,具體見表4及圖1。

圖1 CK5/6、Chk1表達以及聯合檢測對乳腺癌的診斷價值ROC曲線

表4 CK5/6、Chk1表達以及聯合檢測對乳腺癌的診斷價值ROC分析

3 討論

乳腺癌是乳腺上皮細胞在多種致癌因子的作用下,出現增殖失控的現象[7]。早期癥狀常表現為腋窩淋巴結腫大、乳頭溢液、乳房腫塊等,晚期癌細胞出現遠處轉移,發生多器官病變,嚴重威脅患者的生命健康[8-9]。乳腺癌的發生發展是一個多因素和多步驟共同作用的過程,復發和轉移是乳腺癌患者主要的致死原因[10]。乳腺癌發生于乳腺上皮或導管上皮的惡性腫瘤,病因尚不完全清楚,可能與家族史和乳腺癌相關基因、生殖因素、性激素、營養與飲食、環境因素等有關[11-12]。乳腺癌作為一種高度異質性的惡性腫瘤,其發生復發和遠處轉移是影響患者總生存期及預后的關鍵[13]。

CHK1編碼絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,具有高度保守的氨基末端催化結構域和調節羧基末端[14]。CHK1的缺失導致小鼠早期胚胎致死,強調了這種蛋白激酶在維持細胞活力中的重要性[15]。由于致癌激活和持續的復制應激,Chk1在大多數癌癥中的表達增強[16]。Chk1 失活是一種很有前途的癌癥療法,因為它的失活會導致基因組不穩定和癌細胞死亡[17-18]。DNA 損傷通過信號通路激活 DNA 損傷反應 (DDR),從而激活 DNA 修復通路,如同源重組(HR)[19]。在癌癥中很少觀察到 Chk1 功能突變的喪失,相反,與鄰近的正常組織相比,Chk1 在各種腫瘤中過度表達,Chk1蛋白的表達和表達與乳腺腫瘤的腫瘤分級和癌細胞增殖呈正相關[20]。細胞角蛋白屬于中間絲家族,它們在上皮細胞中以高度特異性的方式表達,,在細胞的完整性和機械穩定性中起著至關重要的作用[21]。CK5/6 存在于正常的角質化表皮和鱗狀黏膜上皮,以及乳腺、唾液腺和前列腺的基底細胞或肌上皮細胞中[22]。有研究稱與 CK5/6陰性患者相比,CK5/6 陽性乳腺癌患者轉移更遠,預后較差[23]。本研究中CK5/6、Chk1的表達與乳腺癌的組織學分級有關,說明CK5/6、Chk1的表達在乳腺癌的發生發展、侵襲轉移過程中存在著密切的關系,與既往研究結果相同[24-25]。本研究中 CK5/6、Chk1表達陰性患者的總生存率均顯著高于陽性表達患者。提示 CK5/6、Chk1表達可能與乳腺癌患者的預后有關,與既往結果一致[26-27]。乳腺癌患者組織CK5/6、Chk1表達陽性率顯著高于乳腺良性病變組。根據ROC曲線分析可知,CK5/6、Chk1診斷乳腺癌AUC分別是0.701,0.729,聯合檢測AUC為0.803。提示CK5/6、Chk1在乳腺癌患者診斷中具有臨床價值,且聯合檢測成為診斷的臨床檢測指標的潛力最大。

綜上所述,乳腺癌組織中CK5/6、Chk1與臨床病理特有關,可能是影響患者預后的因素,且具有一定的診斷意義。但若要應用于臨床,仍需要擴大樣本量和循證醫學研究以達成臨床共識或制定指南。