氯化兩面針堿對膠質瘤細胞增殖、遷移及侵襲的影響

朱長吉,李紅紅,沈忠軍,玄延花,嚴 莉

(1.延邊大學醫學院,吉林 延邊133000;2.吉林大學第二醫院 檢驗科;3.延邊大學醫學院 病理學教研室;4.長春市中心血站)

膠質瘤(glioma)是成人最常見的原發性顱內腫瘤,約占中樞神經系統腫瘤的70%。盡管近年采取了多項治療措施,包括手術治療、聯合放療和化療及生物治療等,但膠質瘤的預后仍然很差,特別是惡性膠質瘤膠質母細胞瘤(glioblastoma),診斷后的中位生存期僅有14.6個月[1]。惡性膠質瘤具有快速增殖和高度侵襲性的特點、術后復發率高、預后不良。氯化兩面針堿(nitidine chloride,NC)是植物中提取的一種生物堿,主要從蕓香科花椒的根中提取而來。有研究表明,NC在乳腺癌和肝癌等多種癌癥中具有抗癌作用,可能通過誘導細胞凋亡、阻斷細胞周期、阻礙血管生成及抑制腫瘤細胞遷移和侵襲等機制發揮作用[2-5],然而,NC對膠質瘤細胞的增殖、遷移和侵襲的作用尚有待闡明。

1 材料與方法

1.1 細胞、主要試劑和儀器人腦膠質母細胞瘤LN18細胞(上海通派生物科技公司)。NC(四川恒誠致遠生物公司),DMEM培養基(美國Gibco公司),胎牛血清(以色列Bioind公司),二甲基亞砜(DMSO)、青霉素和鏈霉素(上海聯邁生物公司)、CCK-8試劑盒(上海尚寶生物公司)、Transwell小室(美國Corning公司)、電泳儀和轉膜儀(北京六一儀器廠)、酶標儀(北京六一儀器廠)、倒置顯微鏡(深圳博視達光學儀器公司)。

1.2 細胞培養和分組LN18細胞采用含10%胎牛血清、青霉素(100U·mL-1)和鏈霉素(100 mg·L-1)的DMEM培養基,在37℃、5%CO2培養箱中培養。每2天更換1次培養基,當細胞達80%～90%融合時取對數生長期細胞用于實驗。……