AOX1調(diào)控平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換參與動(dòng)脈鈣化的研究

張倩茹,查 晴,陳 輝,張 煜,楊 克,劉 艷*

(1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院 心血管內(nèi)科,上海200011;2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院 心血管內(nèi)科,上海200025)

動(dòng)脈鈣化主要發(fā)生在內(nèi)膜,是未來(lái)冠心病的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[1],目前冠心病的發(fā)病率和死亡率逐年升高[2-3],已成為全球較為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。動(dòng)脈鈣化病變過(guò)程中,血脂異常可引起血管壁中脂質(zhì)沉積,并形成氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL),繼而影響血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells,VSMC),引起細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng),細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成增多[4],ROS與谷胱甘肽(glutathione,GSH)結(jié)合,在谷胱甘肽還原酶催化作用下轉(zhuǎn)化為氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG),即ROS與GSH間存在動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系,而ROS與GSH間不平衡導(dǎo)致氧化應(yīng)激可觸發(fā)多種病理生理變化[5-6],導(dǎo)致一系列細(xì)胞功能異常,誘發(fā)斑塊形成。VSMC作為動(dòng)脈中比例最高的細(xì)胞類型,參與動(dòng)脈鈣化的整個(gè)病變過(guò)程[7],平滑肌細(xì)胞從收縮表型(contractile phenotype)向合成型表型(synthetic phenotype)轉(zhuǎn)換[8],是動(dòng)脈鈣化進(jìn)展的重要細(xì)胞學(xué)改變和事件。醛氧化酶1(aldehyde oxidase,AOX1)屬于鉬黃素(molybdoflavo enzyme,MOFEs)家族,AOX1可作為一種解毒酶參與體內(nèi)代謝過(guò)程,主要參與著氧化還原反應(yīng),而這一過(guò)程中,AOX1促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫的產(chǎn)生,ROS生成增多[9],從而參與細(xì)胞凋亡、增殖及分化功能[10-11],但AOX1與動(dòng)脈鈣化之間無(wú)相關(guān)報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料

4周齡、雄性C57BL/6J小鼠(北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司上海分公司)用于VSMC的提取。胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS)、青霉素-鏈霉素(penicillin-streptomycin)雙抗溶液、抗青霉素-鏈霉素-新霉素(anti-penicillin,streptomycin,and neomycin)三抗溶液、0.25%胰蛋白酶(trypsin)、DMEM培養(yǎng)基(dulbecco’s modified eagle medium)均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司。……