RhD陰性孕婦DEL型的篩查及基因型分析

韓 雪,韓紅梅,李 捷

(天津市第五中心醫院 輸血科,天津300450)

在人類紅細胞血型系統中,Rh血型系統的重要性僅次于ABO血型系統。D抗原在Rh血型抗原中免疫原性最強,抗-D可引起新生兒溶血病以及嚴重溶血性輸血反應。D抗原存在多種變異體,包括部分D型(partial D)、弱D(week D)型、DEL型等。其中DEL型紅細胞膜上的D抗原表位數目較少,臨床上常規的血清學方法檢測通常判讀為陰性,需采用敏感的吸收放散試驗檢出。目前已有RhD陰性孕婦被DEL型胎兒紅細胞免疫和RhD陰性個體輸注DEL型血液,而產生抗體的報道[1]。本研究旨在對天津濱海新區RhD初篩陰性的孕婦進行DEL型基因分析,結合血清型抗原檢測和不規則抗體篩查,為DEL型孕婦提供合理的產前監測計劃。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集天津市第五中心醫院產科就診的RhD陰性圍產期婦女標本102例,年齡范圍20～39歲,平均年齡(28.72±7.65)歲,留取EDTA-K2抗凝全血約5 ml備用。納入標準:產前RhD檢測結果為陰性且均為單胎妊娠。排除標準:①異位妊娠者;②孕期合并有子宮內膜疾病、既往有血液、免疫系統疾病史的患者或臨床資料不完整者。本研究獲得醫院倫理委員會批準認可。

1.2 儀器與試劑

TD-3A型血型血清學離心機(長春博訊科研儀器有限責任公司)移液器(Eppendrof公司)。核酸提取或純化試劑盒(天津秀鵬生物技術開發有限公司,生產批號201808001);人類紅細胞RHD基因分型試劑盒(PCR-SSP法)(天津秀鵬生物技術開發有限公司,生產批號201810002);瓊脂糖(Biowest)EB染料(天津秀鵬生物技術開發有限公司,生產批號201703001);高速離心機(SIGMA SIGMA1-14);JY300C電泳儀(北京君意東方電泳有限公司);PCR擴增儀(美國應用生物系統(ABI)公司9700型);GenoSens1860凝膠成像系統(上海勤翔科學儀器有限公司)。……