lncRNA RP11-635L1.2在膀胱癌組織中的表達及對膀胱癌細胞增殖和侵襲的影響

魯奕君，陳鴻凱，蔡 亮，呂 強，何 毅

膀胱癌是全球范圍內最常見的泌尿系統惡性腫瘤，男性發病率明顯高于女性[1]。隨著診療水平的發展，膀胱癌患者的預后有所改善，由于膀胱癌的高復發率和侵襲性，多數膀胱癌患者的臨床治療效果較差[2]。探究膀胱癌惡性增殖和轉移的調控因子，對提高膀胱癌患者5年生存率具有重要臨床意義。長鏈非編碼RNA(lncRNA)是一組大于200個堿基長度的內源性RNA分子，缺乏開放閱讀框，不具有編碼蛋白的能力[3]。近年來研究顯示，lncRNA在轉錄和轉錄后可調節靶基因的表達，影響細胞的生理和病理過程[4]。大量研究顯示，膀胱癌中存在多種lncRNA的異常表達，與膀胱癌細胞的活力、侵襲性、血管形成等過程相關，lncRNA可能成為膀胱癌發生和轉移的分子診斷標志物[5-7]。RP11-635L1.2由748個堿基組成，定位于4號染色體。RP11-635L1.2在膀胱癌發病過程中的分子機制研究很少。本研究通過分析RP11-635L1.2在膀胱癌組織和細胞系中的表達水平，探究RP11-635L1.2對膀胱癌細胞生物學行為的作用及其分子機制。

1 材料與方法

1.1細胞系和試劑 膀胱癌細胞系MGH-U3、253J、J82、T24和永生化膀胱上皮細胞SV-HUC-1購于中國科學院上海細胞庫；RPMI-1640培養基、DMEM培養基、CCK-8試劑盒、基質膠購于日本Takara公司；Lipofectamine 2000和胎牛血清購于美國Invitrogen公司；空載質粒(pcDNA3-NC)和RP11-635L1.2過表達質粒(pcDNA3-RP11-635L1.2)、qRT-PCR試劑盒購于上海吉瑪制藥技術有限公司；miR-NC和miR-373-3p mimics購于廣州銳博生物科技有限公司；Transwell小室、雙熒光報告載體野生型RP11-635L1.2和突變型RP11-635L1.2購于美國Promega公司；p-EGFR、p-AKT、p-ERK、p-JAK2、p-STAT3、α-Tubulin抗體購于美國Thermo Fisher Scientific公司。

1.2生物信息學技術分析 登錄GEPIA數據庫分析RP11-635L1.2在膀胱癌組織和癌旁正常組織中的表達水平，登錄LncCeRBase數據庫分析比較與RP11-635L1.2存在高度保守互補序列的微小RNA(miRNA)?！?br>