肝細胞癌組織中PHF2表達與臨床病理特征及預后的關系

楊軍 孫龍 趙健全 季驪 宋輝

原發性肝癌是我國常見惡性腫瘤，死亡率占惡性腫瘤前三[1-2]。目前關于肝細胞癌發生機制尚未完全明確[3]。有學者發現，PHF手指蛋白2(PHF2)參與惡性腫瘤的發生和發展[4]。PHF2是Jmjc家族成員之一，位于9q22.31，能夠調控靶基因的轉錄。PHF2在結腸癌、胃癌組織中呈低表達，并且低表達影響預后，并能促進腫瘤進展，但在肝細胞癌作用沒有完全清楚[5]，與腫瘤臨床病理特征及預后關系尚不清楚。我們檢測肝細胞癌病人癌組織及癌旁組織中PHF2表達情況，分析其與臨床病理特征、預后的關系。

對象與方法

一、對象

2015年1月～2019年1月診治的肝細胞癌病人121例，術前未做過任何針對本病的治療。年齡44～81歲，平均年齡(50.50±5.15)歲；男性86例、女性35例；脈管癌栓97例；腫瘤直徑1.25～11.51 cm，平均(5.26±1.45)cm；病理分級Ⅰ級16例、Ⅱ級64例、Ⅲ級26例、Ⅳ級15例；血清HBsAg陰性21例、陽性100例；肝硬化97例；吸煙史94例；飲酒史106例。納入標準：(1)病理檢查為肝細胞癌；(2)成年病人；(3)知情同意。排除標準：酒精性脂肪肝；妊娠期哺乳期；合并其他惡性腫瘤；合并代謝性疾病；血液性疾病。

二、方法

1.臨床資料收集：包括年齡、性別、腫瘤直徑、病理分級、血清HBsAg、肝硬化、吸煙史和飲酒史。血清HBsAg陽性標準≥20 ng/ml，陰性<20 ng/ml。病理分級參考《中國常見惡性腫瘤診治規范》中的Edmondson分級法，Ⅰ級癌細胞形態似正常肝細胞、Ⅱ級癌細胞略異型、Ⅲ級癌細胞異形明顯、Ⅳ級癌細胞形態變異大。

2.肝細胞癌病人癌組織及癌旁組織中PHF2表達檢測：手術取除肝細胞癌組織及癌旁組織(近腫瘤邊緣2 cm)。采用免疫組化SP法。組織切片經二甲苯、不同濃度酒精脫蠟，枸櫞酸鈉修復抗原，過氧化物酶封閉15分鐘。加入兔抗人PHF2抗體(1∶200，Abcam 公司)，4 ℃冰箱過夜。二抗1小時，3,3'-二氨基聯苯胺四鹽酸鹽顯色5分鐘，依次通過蘇木素、鹽酸酒精、氨水，通過不同濃度酒精、二甲苯，封片。……