楊麗紅 王娟娟 丁向輝 吉玉潔
(中國人民解放軍陸軍第八十一集團軍醫院,張家口 075000)
慢性盆腔炎是女性內生殖器及其周圍結締組織、盆腔腹膜的慢性炎癥,常為急性盆腔炎未徹底治療,或急性盆腔炎的病程遷延及反復發作。 轉化生長因子-β(transforming growth factor,TGF-β)和Smad蛋白(drosophila mothers against decapentaplegic protein,Smad) 參與了盆腔炎的發生發展,是盆腔炎調控的重要分子[1]。miRNAs在真核生物中表達具有組織特異性和時序性,決定組織和細胞的功能特異性,在細胞生長和機體發育調節過程中起多種作用,研究表明miR-224與組織炎癥具有顯著的調控關系,并可通過TGF-β/Smad信號通路調控動脈粥樣硬化斑塊和血管重塑,但miR-224在盆腔炎中的作用及機制尚不清晰[2]。因此本研究將通過機械損傷及接種混合菌構建大鼠慢性盆腔炎模型,探究miR-224-3P及TGF-β/Smads信號通路在慢性盆腔炎模型大鼠模型表達及相關性。
8~10周齡雌性SPF級SD大鼠,由北京維通利華實驗動物中心提供。
水合氯醛購自天津市申泰化學試劑有限公司;混合菌液購自無錫賽維科技公司;Rat TNF-α ELISA Kit(RAB0479),購于美國Sigma公司,Rat NF-κB ELISA Kit(201803)購于惠佳生物科技有限公司;逆轉錄試劑盒(6110A)購于日本TaKaRa公司;熒光定量PCR試劑盒(RT0411-01)購于美國Biomiga公司;引物由上海生工合成;TGF-β(ab205150)、Smad3 (ab40854),Smad3(ab40854)和二抗(ab150113)抗體購于美國Abcam公司。
40只8~10周齡雌性SD大鼠于SPF級鼠房飼養,室溫調節在25℃±2℃,相對濕度40%~65%,12 h/12 h晝夜交替照明,自由攝取食物和飲用水。適應性飼養1周后,隨機分為2組,每組20只。
大鼠稱重后按0.4 mL/100 g 10%水合氯醛行腹腔注射麻醉。……