miR-145對血管平滑肌細胞生物活性及SM22α mRNA表達的作用*

曾丁鄰 吳興森 查慶春 李景輝△ 丘智煌

（1 漳州正興醫院心血管內科，漳州 363000；2 福建醫科大學附屬第一醫院，福州 350005）

血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）與血管正常功能聯系密切，具有較強的可塑性、可收縮及分泌功能。VSMC在正常情況下，表現為收縮型，只有在血管受到損傷或受到一些生物刺激時會轉化為合成表型，VSMC增殖和遷移[1-4]，并分泌細胞外基質，導致血管壁增厚。高血壓等增殖性血管疾病中均存在VSMC的表型轉換。miR-145是一種小RNA分子[5]。研究表明miR-145與VSMC表型轉換聯系甚密[6]。VSMC增殖會使細胞外的分泌物增加，肌動蛋白減少[7]。另外，miR-145表達量的增多或減少可使VSMC發生分化或凋亡[8]。在血管壁，miR-145主要集中于VSMC中，在成纖維細胞中的表達極少[9]。SM22α又稱轉凝蛋白，為VSMC的特異性蛋白，是細胞衰老的標志物，在VSMC中發揮重要的作用[10-11]。目前，miR-145對VSMC、SM22α的作用研究較少，因此，本研究探討miR-145對VSMC生物活性的影響以及對SM22α表達的作用。

1 材料和方法

1.1 實驗分組

VSMC來自湖南豐輝公司，實驗分為3組，增殖VSMC組（增殖組）、增殖VSMC+轉染miR-145-NC組（空載體組）和增殖VSMC+轉染miR-145模擬物組（增殖轉染組）。

1.2 實驗試劑與器材

胎牛血清購自鄭州德寧生物公司；RPMI 1640培養液購自海門市春博實驗器材公司；MTT溶液購自上海樊克生物公司；流式細胞儀購自上海實維試驗器材公司；酶標儀購自南京德鐵實驗器材公司；胰蛋白酶購自濟南允誠生物公司；Primer 5.0 軟件購自廣州伯信生物科技公司。

1.3 細胞的培養及增殖

RPMI 1640培養液（含10%胎牛血清）于37.2℃，5%CO2條件下培養，常規傳代，取第3代細胞進行實驗，然后將其調整……