恒溫隔絕式聚合酶鏈式反應檢測食品中金黃色葡萄球菌

李傳友，曾寶鋒，趙燕英，湯 承，陳 娟，劉 驥，朱成林，曾英杰，于基成，唐俊妮,*

（1.西南民族大學食品科學與技術學院，四川 成都 610041；2.西南民族大學畜牧獸醫學院，四川 成都 610041；3.大連民族大學 生物技術與資源利用教育部重點實驗室，沈陽 大連 116600）

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）廣泛存在于自然界，是一種常見的食源性致病微生物[1]。其容易污染食物并在食物上生長產生具有毒性的腸毒素物質（Staphylococcal enterotoxins，SEs），如SEA、SEB、SED等經常引發食物中毒，威脅著食品安全[2-3]。人體是金黃色葡萄球菌的天然宿主，30%～50%健康人體的鼻腔中定植有金黃色葡萄球菌[4]，因此，食品從生產加工到最終的銷售環節都有被污染的可能。每年因金黃色葡萄球菌污染食物而引發的食物中毒事件時有發生，如陳永正等[5]對一起幼兒園食物中毒事件展開調查，發現該起食物中毒事件由金黃色葡萄球菌A型腸毒素引起；熊玉華等[6]對一家自助餐廳的食材進行檢測，發現從不同食材中都能分離出金黃色葡萄球菌。

目前，金黃色葡萄球菌的常用檢測方法主要有傳統培養法、免疫學方法和分子生物學檢測方法等[7-9]。其中傳統檢測方法和免疫學方法都存在耗時長，操作繁瑣等缺點[10]。分子生物學作為最常用的一種檢測方法，具有特異性好、靈敏度高等優點，已經廣泛用于金黃色葡萄球菌的檢測中[11]。

恒溫隔絕式聚合酶鏈式反應（insulated isothermal polymerase chain reaction，iiPCR）是一種新型熒光PCR技術，它是根據Rayleigh-Benard對流原理，通過反應管底部液體持續加熱產生上部液體與下部液體的溫度差，通過控制散熱的速率與對流的時間，在反應管內部形成穩定溫度梯度，從而提供PCR擴增所需的反應條件[12]。……