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恒溫隔絕式聚合酶鏈式反應檢測食品中金黃色葡萄球菌

2022-02-16 09:27:24李傳友曾寶鋒趙燕英朱成林曾英杰于基成唐俊妮
食品科學 2022年2期
關鍵詞:檢測方法

李傳友,曾寶鋒,趙燕英,湯 承,陳 娟,劉 驥,朱成林,曾英杰,于基成,唐俊妮,*

(1.西南民族大學食品科學與技術學院,四川 成都 610041;2.西南民族大學畜牧獸醫學院,四川 成都 610041;3.大連民族大學 生物技術與資源利用教育部重點實驗室,沈陽 大連 116600)

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)廣泛存在于自然界,是一種常見的食源性致病微生物[1]。其容易污染食物并在食物上生長產生具有毒性的腸毒素物質(Staphylococcal enterotoxins,SEs),如SEA、SEB、SED等經常引發食物中毒,威脅著食品安全[2-3]。人體是金黃色葡萄球菌的天然宿主,30%~50%健康人體的鼻腔中定植有金黃色葡萄球菌[4],因此,食品從生產加工到最終的銷售環節都有被污染的可能。每年因金黃色葡萄球菌污染食物而引發的食物中毒事件時有發生,如陳永正等[5]對一起幼兒園食物中毒事件展開調查,發現該起食物中毒事件由金黃色葡萄球菌A型腸毒素引起;熊玉華等[6]對一家自助餐廳的食材進行檢測,發現從不同食材中都能分離出金黃色葡萄球菌。

目前,金黃色葡萄球菌的常用檢測方法主要有傳統培養法、免疫學方法和分子生物學檢測方法等[7-9]。其中傳統檢測方法和免疫學方法都存在耗時長,操作繁瑣等缺點[10]。分子生物學作為最常用的一種檢測方法,具有特異性好、靈敏度高等優點,已經廣泛用于金黃色葡萄球菌的檢測中[11]。

恒溫隔絕式聚合酶鏈式反應(insulated isothermal polymerase chain reaction,iiPCR)是一種新型熒光PCR技術,它是根據Rayleigh-Benard對流原理,通過反應管底部液體持續加熱產生上部液體與下部液體的溫度差,通過控制散熱的速率與對流的時間,在反應管內部形成穩定溫度梯度,從而提供PCR擴增所需的反應條件[12]。……

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