牛免疫球蛋白G的體外人源唾液酸化及Fc片段的制備

李天慧，陳春旭,2，陳貴杰，孫 怡，曾曉雄,*

（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江蘇 南京 210095；2.安徽科技學(xué)院食品工程學(xué)院，安徽 鳳陽(yáng) 233100）

免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）作為一種重要的免疫活性物質(zhì)[1]，不僅存在于體液中，也是牛初乳中的主要抗體之一[2]，其主要功能是負(fù)責(zé)識(shí)別、中和以及消除病原體和有毒抗原帶來(lái)的危害[3]。IgG由具有可變和恒定結(jié)構(gòu)域的2 條相同重鏈和輕鏈組成[4]，其識(shí)別結(jié)合功能主要發(fā)生在抗原結(jié)合片段（Fab）的可變域，而可結(jié)晶片段（Fc）的恒定域則與效應(yīng)分子和細(xì)胞的相互作用相關(guān)[5]。作為一種糖蛋白，IgG的糖基化結(jié)構(gòu)與其功能緊密相關(guān)。IgG的糖基化在其Fab與Fc片段均可以發(fā)生，F(xiàn)c片段包含至少2個(gè)保守的N-糖基化位點(diǎn)[1]，而Fab片段存在15%～25%的N-糖基化[6]。IgG的N-糖基化已被證明與疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[7-8]。例如，IgG的末端半乳糖和唾液酸含量可作為炎性疾病子宮內(nèi)膜異位癥診斷的補(bǔ)充參數(shù)[9]；改變IgG的糖基化類型可作為治療溶骨性骨質(zhì)疾病的一種治療手段[10]。此外，并非只有內(nèi)源性IgG可以參與免疫調(diào)節(jié)，外源性IgG對(duì)人體也有積極作用。Kaneko等[3]發(fā)現(xiàn)唾液酸化IgG對(duì)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎小鼠有良好的治療效果；Pagan等[11]設(shè)計(jì)并構(gòu)建了2 種可溶性糖基轉(zhuǎn)移酶，可在體內(nèi)將內(nèi)源性IgG轉(zhuǎn)化為抗炎介質(zhì)。本課題組最近的研究發(fā)現(xiàn)，完整進(jìn)入結(jié)腸的唾液酸化IgG能夠通過(guò)調(diào)節(jié)菌株共生關(guān)系顯著促進(jìn)成人腸道中雙歧桿菌的增殖[12-13]。因此，作為糖基化結(jié)構(gòu)的一種，唾液酸化IgG有著重要的研究?jī)r(jià)值。

盡管唾液酸化IgG具有相當(dāng)大的潛在功能，但僅有5%～10%的IgG的N-糖鏈末端被唾液酸修飾[14]。……