低氧誘導大鼠垂體腺瘤GH3細胞增殖、侵襲和上皮-間質轉化的機制研究

張歡，石文健，劉永亮，李景武，張于，董桂蘭，董偉

垂體腺瘤是最常見的顱內腫瘤之一，占原發性中樞神經系統腫瘤的14%，約35%的垂體腺瘤呈侵襲性生長［1］，與非侵襲性垂體腺瘤相比，侵襲性垂體腺瘤不僅手術全切率低，而且術后復發率高。上皮-間質轉化（epithelial-mesenchymal transformation，EMT）是上皮細胞轉化為間質細胞的生物學過程，與腫瘤的發生發展、遠處轉移、轉移定植、癌癥干性和化學抗性有關［2-3］。缺氧是組織中氧分壓低的一種情況，已成為腫瘤病理生理學的一個關鍵因素。低氧會在多種腫瘤中誘導EMT［4-6］，但在垂體腺瘤中尚不清楚。低氧誘導因子（hypoxia-inducible factors，HIF）是一類介導細胞適應低氧應激反應的調控因子，是細胞適應缺氧的主要驅動力。研究顯示，HIF-1α與垂體腺瘤的侵襲性行為有關［7］。在生長激素腺瘤中，HIF-1α可通過促進蛋白激酶A活性增加而導致生長激素過度合成［8］。本研究旨在分析低氧誘導大鼠垂體腺瘤GH3細胞增殖、侵襲和EMT的機制，以期為垂體腺瘤的臨床診療提供新的理論支持。

1 材料與方法

1.1 實驗時間 本實驗時間為2020年9月至2021年6月。

1.2 主要儀器與試劑 HIF-1α干擾片段（HIF-1αsiRNA）購自北京傲銳東源生物科技有限公司，GH3細胞購自美國ATCC公司，［3-（4，5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁），內鹽；MTS］購自北京澤平科技有限責任公司，RNA提取試劑盒購自天根生化科技（北京）有限公司，反轉錄試劑盒和實時熒光定量試劑盒購自美國Thermo公司，HIF-1α、N-鈣黏蛋白（N-cadherin，N-Cad）、波形蛋白（Vimentin，Vim）、GAPDH一抗購自英國Abcam公司，小室實驗用Transwell板購自美國Corning公司。

1.3 細胞分組 將GH3細胞分為常氧……