褪黑素對蛛網膜下腔出血小鼠模型早期腦損傷的影響及機制研究

楊松，李軍鵬，王彥茗，馬廉亭

據統計，蛛網膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）發病30 d內死亡率高達50%，且50%以上的幸存者伴有不可逆的神經功能損傷，給患者家庭及社會帶來沉重的負擔［1］。SAH的主要發病原因是顱內動脈瘤破裂和顱內血管畸形，且以顱內動脈瘤破裂多見。近年隨著手術技術的提高，越來越多的SAH患者能夠得到較好的治療，但術后仍有部分患者出現情感和認知障礙［2］。研究表明，SAH后遲發性腦血管痙攣是患者死亡的主要原因之一，但減輕遲發性腦血管痙攣又不能改善患者預后［3］。近年有學者提出了早期腦損傷（early brain injury，EBI）的概念并認為其是SAH患者致死、致殘的主要原因之一［4］。因此，研究SAH后EBI的發生機制、尋找藥物靶點可能為SAH患者提供新的治療思路。本實驗通過構建SAH小鼠模型并給予褪黑素（melatonin，MT）干預后發現，MT能有效減輕SAH后EBI，其機制可能與MT保護神經元、抑制神經元凋亡有關，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 本實驗時間為2019年9月至2020年6月。選取健康成年C57BL/6J雄性小鼠54只，體質量22～25 g，飼養于SPF級實驗動物屏障環境中，溫度（25 ℃）、濕度（65%）恒定，12 h光照/黑暗交替進行；并給予小鼠充足的滅菌飲用水、專用飼養飼料。所有小鼠適應性飼養3 d后，隨機分為假手術組（Sham組）、SAH組、SAH+MT組，每組18只。所有實驗操作經過中部戰區總醫院動物倫理委員會批準，且嚴格遵守相關操作規范和規定。

1.2 主要試劑及儀器 本實驗過程中的主要試劑及儀器見表1～2。

表1 主要試劑Table 1 Main reagents

表2 主要儀器Table 2 Main instruments

1.3 實驗方法 所有小鼠造模前禁食12 h，禁水6 h。SAH組和SAH+MT組小鼠經戊巴……