腰退行性病變與TRALL基因之間關系的研究△

徐世民，王炳武，張曉霞，劉偉強，于明東，蘇保輝，高加智

（山東省濰坊市人民醫院脊柱外科，261041）

腰椎間盤退行性病變（lumbar degenerative dis?ease,LDD）是臨床常見疾病，它是由腰椎間盤的生理結構退行性病變引起腰椎間盤突出、椎管狹窄等病理改變，導致患者出現腰痛、下肢麻木、大小便障礙等臨床癥狀［1］。據統計，全球每年有2.66億人患有LDD，發病率為3.63%［2］，超過一半的人在生活中會受到腰背痛的影響［3］。隨著對腰椎間盤退變認識的進展，包括影像學檢查和干預試驗等被應用到不同的方面，以推測LDD的病因［4，5］。腰椎間盤的退變具有很強的遺傳性，細胞行為和細胞外基質的結構是否完整均由遺傳信息所決定［6］。因此，本研究從此角度出發，探討LDD與TRAIL基因之間的相關性及TRAIL基因的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

腰椎間盤髓核取自人體。其中，2019年7月—2020年7月手術治療的腰椎間盤突出癥60例患者為退變組，男32例，女28例，年齡32～64歲；同期因腰椎創傷手術，但椎間盤無退變的60例患者為未退變組，男49例，女11例，年齡26～57歲。將取出的髓核分成兩部分，一部分用于制作石蠟切片，一部分用于髓核細胞的分離培養。本研究已預先通過本院倫理委員會批準并書面同意，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 組織化學染色

1.2.1 染色

髓核組織固定、脫水、浸蠟后制備蠟塊，切5μ的石蠟切片。切片脫蠟、復水后行組化染色。

Tunel（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling）法檢測細胞凋亡，用50 μl末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）和450 μl地高辛標記的dUTP液混勻，而陰性對照組僅加50 μl地高辛標記的dUTP液，陽性對照組先加入100 μl DNase1，15～25℃反應10 min，后面步驟同處理組?！?br>