真姬菇工廠化栽培液體菌種菌齡比較試驗

劉雄明

（武平縣現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展服務中心，福建武平 364300）

真姬菇（Hypsizygusmarmoreus），又名斑玉蕈，系中偏低溫型、變溫結實性菌類，是一種珍稀名貴的食用真菌。真姬菇味比平菇鮮、肉比滑菇厚、質比香菇脆，口感極佳，在日本有“香在松口蘑、味在玉蕈”之說，富含蛋白質、氨基酸和維生素，是一種高蛋白、低脂肪、低熱量的保健食品[1]，深受消費者青睞。

我國自1986年從日本引進栽培真姬菇[1]，經(jīng)過30多年的研究和推廣，目前真姬菇的生產(chǎn)在國內已經(jīng)形成規(guī)模，并有多個栽培真姬菇企業(yè)。

近年來，為降低真姬菇生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率，國內有多家企業(yè)采用液體菌種接種栽培袋。許占伍等[2]對真姬菇液體菌種制備工藝開展了研究；王聰慧等[3]研究了真姬菇液體培養(yǎng)時間對菌絲體生長及多糖影響；黃亮等[4]開展了接種液體菌種栽培袋后熟期對真姬菇子實體農(nóng)藝性狀影響的研究。目前，未見有關真姬菇液體菌種菌齡比較試驗。為此筆者進行不同菌齡真姬菇液體菌種接種栽培袋試驗。現(xiàn)將試驗結果總結如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

（1）供試菌株：真姬菇2號，武平縣永榮食用菌有限公司生產(chǎn)用菌種。

（2）培養(yǎng)基配方：液體菌種培養(yǎng)基配方為玉米粉4.0 g/L，豆粕粉3.0 g/L，蔗糖12.0 g/L，葡萄糖2.0 g/L，MgSO40.5 g/L，KH2PO40.5 g/L，蛋白胨1.0 g/L，水1 L。

栽培料培養(yǎng)基配方為棉籽殼250 kg，木屑72.5 kg，麩皮120 kg，玉米粉25 kg，豆粕25 kg，石灰7.5 kg。培養(yǎng)料含水量60%~62%，高壓滅菌后pH6.1±0.1。

（3）發(fā)酵設備：500 mL三角瓶，600 L不銹鋼發(fā)酵罐（自制）及配套設備，恒溫振蕩器，磁力攪拌器。

1.2 試驗方法

1.2.1 搖瓶菌種制備

采用上述配方配制液體培養(yǎng)基，500 mL三角瓶裝液體培養(yǎng)基250 mL，滅菌、冷卻，接入培養(yǎng)好的活性強無污染的斜面固體菌種6塊，每個菌塊直徑約0.5 cm，靜置24 h后置于23℃恒溫箱搖床培養(yǎng)96 h。觀察菌球各指標正常時放于磁力攪拌器攪拌培養(yǎng)約24 h，得液體菌種備用。

1.2.2 發(fā)酵罐液體菌種制備

用上述配方制備好的發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基經(jīng)滅菌、冷卻后，按無菌操作要求將培養(yǎng)好的搖瓶菌種按照體積比0.05%接入發(fā)酵罐中。發(fā)酵培養(yǎng)66 h、89 h、114 h、138 h、162 h、185 h、209 h、233 h、256 h后接入栽培袋培養(yǎng)出菇。

1.2.3 試驗設計

按無菌操作要求將1.2.2培養(yǎng)液體菌種接入同一批次已滅菌冷卻的栽培袋中，每袋接種20 mL，每個處理接種360袋，3次重復，對照（CK）為培養(yǎng)948 h木屑菌種。

接種后栽培袋統(tǒng)一發(fā)菌、管理。觀察記錄栽培袋接種后菌絲滿袋時間、菌絲長勢、污染率等。菌絲培養(yǎng)110 d后，在同一環(huán)境中出菇管理。子實體采收時，按照五點取樣法，每個處理隨機取樣20袋，采收子實體測定子實體經(jīng)濟性狀、統(tǒng)計產(chǎn)量等，取平均值進行統(tǒng)計分析。

1.3 數(shù)據(jù)處理

相關數(shù)據(jù)采用Excel2013整理，DPSDuncan新復極差法統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 接種不同菌齡真姬菇液體菌種對栽培袋菌絲生長的影響

由表1可知，栽培袋接種液體菌種菌絲長滿袋時間均比948 h木屑菌種（CK）快4 d以上，栽培袋接種菌齡114 h、138 h、162 h液體菌種，菌絲長勢最好，菌絲滿袋比948 h木屑菌種（CK）快11 d，差異極顯著（P＜0.01）；接種菌齡209 h、233 h、256 h液體菌種，栽培袋菌絲長勢較弱，長滿袋時間較長，說明液體菌種菌絲培養(yǎng)到一定時間后會老化，活力下降；菌齡66 h、89 h的液體菌種，因菌絲量比較少，接種到栽培袋后菌絲長速也較慢；菌齡66 h、233 h、256 h液體菌種接種栽培袋，菌絲培育期污染率相對較高，但均低于對照木屑菌種。

表1 接種不同菌齡真姬菇液體菌種的栽培袋發(fā)菌結果

2.2 接種不同菌齡真姬菇液體菌種對栽培袋鮮菇產(chǎn)量及子實體經(jīng)濟性狀的影響

由表2可知，接種不同菌齡液體菌種對栽培袋鮮菇產(chǎn)量影響極顯著，對鮮菇品質影響不顯著。栽培袋接種菌齡89 h液體菌種，去頭鮮菇產(chǎn)量最高，為505 g/袋，其次是菌齡66 h。經(jīng)DPSDuncan新復極差法統(tǒng)計分析，栽培袋接種菌齡66 h、89 h、162 h液體菌種，三者間產(chǎn)量（去頭）差異不顯著，三者與菌齡185 h、209 h、233 h、256 h差異達極顯著水平，與對照差異極顯著。接種菌齡89 h液體菌種栽培袋A級菇產(chǎn)量最高，為445 g/袋，比對照提高10.7%；接種菌齡66 h、89 h、114 h、162 h栽培袋A級菇產(chǎn)量與其他處理間差異達極顯著水平；接種菌齡256 h栽培袋A級菇產(chǎn)量最低，比接種菌齡89 h栽培袋產(chǎn)量低19.10%，比對照低10.45%。

表2 接種不同菌齡真姬菇液體菌種栽培袋的產(chǎn)量及子實體經(jīng)濟性狀

圖1 試驗出菇場景

接種不同菌齡真姬菇液體菌種栽培袋的子實體經(jīng)濟性狀無明顯差異。

綜合試驗結果，真姬菇液體菌種菌齡控制在89 h為宜。

3 小結

與固體菌種相比，液體菌種具有操作程序簡單、生長快、周期短、菌齡比較一致、接種方便等優(yōu)點。試驗結果表明真姬菇液體菌種適宜菌齡為89 h，此時菌種接種栽培袋所獲產(chǎn)量最高，品質好。