微小RNA-107對氣道平滑肌細胞增殖和遷移的影響研究

宇文婷，羅雅妮，黎滿慧，史菲，熊軼

哮喘是發生在氣道的慢性炎癥性疾病，隨著發病率和死亡率的增加，其成為了重點關注的疾?。?］。哮喘的特征包括氣道變窄、可逆性氣流阻塞、氣道高反應性、氣道炎癥和氣道重塑［2-3］。而氣道平滑肌細胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）增殖、遷移功能的異常會進一步導致氣道重塑［4］。因此，研究ASMCs功能的影響因素并進行干預有助于緩解患者哮喘癥狀。哮喘的病因目前尚不完全清楚，但是已經有研究表明，遺傳學在其中發揮著重要作用，非編碼RNA調控是主要的表觀遺傳機制之一［5］。

微小RNA（microRNA，miRNA）是指由18～25個核苷酸組成的單鏈非編碼RNA，可以與靶基因的3'非翻譯區（3'-untranslated regions，3'-UTR）結合，抑制靶基因的轉錄后水平和翻譯水平［6］。研究表明，異常表達的miRNA可能參與哮喘的發生發展［7］。已有文獻報道，miRNA-107在膀胱癌和胃腸癌中呈低表達，且抑制miRNA-107的表達可以促進腫瘤細胞的增殖和遷移［8-9］。但是，miRNA-107對ASMCs功能的影響尚未見報道。本研究主要探討miRNA-107對ASMCs增殖和遷移的影響，以期為將miRNA-107應用于哮喘的診斷和治療奠定一定的理論基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 20只4～6周的SPF級雌性BABL/c小鼠均購自廣東省實驗動物中心，動物實驗許可證號為SYXK（粵）2015-0106。小鼠飼養于SPF級環境中，自由進食、飲水，保持12 h晝夜節律。本研究經深圳北京大學香港科技大學醫學中心動物實驗倫理委員會批準通過。

1.1.2 實驗試劑及儀器 DMEM-F12培養基、Opti-MEM無血清培養基、胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）、胰酶、青/鏈霉素、羊抗兔488二抗（美國Invitrogen公司）；Ⅰ型膠原酶（sigma公司）；viafect轉染試劑盒（美國Promega公司）；熒光定量試劑盒、BrdU細胞增殖檢測試劑盒（比色分析法）（美國Roche公司）；……