miR-223通過調(diào)控NLRP3炎癥小體減輕免疫球蛋白A腎病大鼠腎臟損傷①

王 瑾 王加強(qiáng) 邱 洪 楊麗萍 李 佳 譚 翔

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，成都 610072)

免疫球蛋白A腎病(immunoglobulin A nephropathy，IgAN)是一種自身免疫疾病，由IgA1異常糖基化形成半乳糖缺陷型IgA1并被正常IgG和IgA1作用誘發(fā)，形成的免疫復(fù)合物積累會(huì)引起諸如補(bǔ)體激活、氧化應(yīng)激、炎癥級(jí)聯(lián)以及細(xì)胞凋亡等一系列反應(yīng)[1，2]。該病在亞洲太平洋區(qū)域的發(fā)生率較高，且發(fā)展成終末期腎病的風(fēng)險(xiǎn)也高于其他地區(qū)[3，4]?，F(xiàn)今對(duì)IgAN病理機(jī)制的研究尚未明確，通過加深對(duì)其發(fā)病機(jī)制的理解，對(duì)于開發(fā)新的特效治療藥物具有重要意義。miRNA是一類小分子非編碼RNA，具有通過結(jié)合目標(biāo)mRNA 3′UTR區(qū)域沉默基因的能力[5]。miRNA參與多種腎病的病理生理過程，也有文獻(xiàn)報(bào)道了miRNA對(duì)IgAN的調(diào)控作用[6，7]。在包括IgAN在內(nèi)的諸多文獻(xiàn)中報(bào)道了miR-223對(duì)腎臟疾病的緩解作用，然而其具體機(jī)制尚不明確[8-10]。本研究通過建立IgAN的HK2細(xì)胞和大鼠模型，并以miR-223 mimics或agomir處理，探究miR-223在IgAN中的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細(xì)胞來源 人腎小管上皮細(xì)胞HK2和人腎小管系膜細(xì)胞HMC購自中科院上海細(xì)胞庫。

1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 40只SPF級(jí)SD雄性大鼠，體質(zhì)量220～250 g，購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，于室溫、40%相對(duì)濕度的環(huán)境條件下喂養(yǎng)14 d，期間晝夜12 h交替，水和飼料正常供給。

1.1.3主要試劑 DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液、胎牛血清購自美國Gibco公司；Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑購自美國Invitrogen公司；牛血清白蛋白、脂多糖購自美國Sigma公司；尿蛋白、尿素氮(urea nitrogen，BUN)、血清肌酸酐(serum creatinine，SCr)、IL-1β、IL-18檢測試劑盒購自南京建成生物工程有限公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒SsoFastTMEva-Green?Supermix購自美國Bio-Rad公司；熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)購自美國Promega公司；……