CD103和E-鈣黏蛋白在結(jié)腸癌組織中表達(dá)及作用研究①

粟 虹 韓云雪 佐 妍

(桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院綜合科，桂林 541001)

結(jié)直腸癌是全球第四大常見癌癥，其整體5年生存率約為50%[1]。除了腫瘤的病理分期，組織學(xué)亞型和外科手術(shù)程度外，手術(shù)切除的腫瘤組織中腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)的存在也與良好的預(yù)后顯著相關(guān)[2]。比如CD8+TIL在幾種惡性腫瘤中的積累已被證明與患者良好的預(yù)后相關(guān)[3,4]。新近報道表明，ITGAE(integrin，alpha E)也稱為CD103，在抗癌免疫中起著至關(guān)重要的作用。例如，ITGAE可以通過肺癌和宮頸癌中的細(xì)胞毒性T細(xì)胞識別異常細(xì)胞，殺傷腫瘤細(xì)胞[5-7]。上皮組織中的鈣黏蛋白稱為E-鈣黏蛋白，是一種Ca2+依賴的細(xì)胞黏著糖蛋白，在維持細(xì)胞形態(tài)和黏附中發(fā)揮重要作用。E-鈣黏蛋白功能異常將導(dǎo)致多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展[8]。本研究檢測了45例結(jié)腸癌組織中CD103和E-鈣黏蛋白的表達(dá)水平，并在體外實(shí)驗(yàn)探究CD103和E-鈣黏蛋白表達(dá)變化對腫瘤活性的影響。

1 材料與方法

1.1材料 選取2018～2019年于我院進(jìn)行結(jié)腸癌手術(shù)的45例標(biāo)本，均未進(jìn)行化療和放療。38例正常結(jié)腸組織標(biāo)本中有18例為癌旁組織，并經(jīng)病理證明為正常組織，20例取自良性疾病結(jié)腸部分切除標(biāo)本。結(jié)腸癌45例樣本中男性27例，女性18例。年齡 48～72歲，平均年齡(61.5±6.5)歲。腫瘤分化程度：高中分化21例，低分化24例，伴淋巴轉(zhuǎn)移19例，無淋巴轉(zhuǎn)移26例。TNM分期：Ⅰ-Ⅱ期23例，Ⅲ-Ⅳ期22例。兔抗CD103抗體(Sigma)，鼠抗E-cadherin抗體和鼠抗GAPDH抗體(Proteintech)。

1.2方法

1.2.1實(shí)時熒光定量PCR(real-time PCR，qRT-PCR) Trizol法提取結(jié)腸癌組織中總RNA。使用紫外分光光度計測RNA濃度。根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明，將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用qRT-PCR檢測結(jié)腸癌組織中CD103和E-鈣黏蛋白的表達(dá)。……