lncRNA MIR4435-2HG通過靶向miR-873-5p調控小兒神經母細胞瘤細胞生物學功能①

倪文昌 金 泉 王麗艷 查運紅

(武漢市第三醫院兒科，武漢 430000)

神經母細胞瘤是兒童常見顱外實體瘤之一，占兒童癌癥相關死亡人數的15%[1]。其臨床表現廣泛，部分良性腫瘤不經化療可自行消退，其他轉移性疾病甚至對高強度治療耐藥，即使接受強化治療，最具侵襲性的神經母細胞瘤患者存活率仍低于40%[2]。神經母細胞瘤進展的機制仍有待進一步研究。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)被定義為長度超過200個核苷酸的轉錄本，與包括神經母細胞瘤在內的癌癥進展密切相關[3]。研究表明，lncRNA MIR4435-2HG可促進前列腺癌細胞遷移和侵襲[4]。上調MIR4435-2HG可提高胃癌細胞增殖、遷移、侵襲能力及小鼠的致瘤性[5]。對DNA甲基化和基因表達譜的綜合分析發現，MIR4435-2HG是導致膠質瘤進展的致癌lncRNA[6]。miR-873-5p可作為結直腸癌的腫瘤抑制因子抑制結直腸癌細胞生長、增殖、遷移和侵襲，影響細胞周期，并促進其凋亡[7]。但MIR4435-2HG和miR-873-5p對神經母細胞瘤生物學功能的影響尚未闡明。研究顯示，lncRNA有多個miRNA響應元件，如MIR4435-2HG靶向miRNA-487a促進肝癌細胞增殖[8，9]。本文探討神經母細胞瘤中MIR4435-2HG和miR-873-5p的靶向調控作用，考察MIR4435-2HG在神經母細胞瘤組織及其相應組織正常脊髓背根神經節中的表達，及其對神經母細胞瘤SK-N-SH細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響，并結合miR-873-5p闡明潛在的作用機制[10]。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞與主要試劑 神經母細胞瘤SK-N-SH細胞、人臍靜脈內皮細胞HUVEC購自中國科學院上海生命科學研究院細胞資源中心，MEM培養基、F12K培養基、Lipofectamine 2000購自美國invitrogen公司；胎牛血清購自美國Gibco公司；RT-qPCR相關檢測試劑盒購自日本TaKaRa公司；……