miR-105-5p靶向MAPK1抑制非小細胞肺癌細胞A549的生長、運動和上皮間質轉化①

李耀杰 湯素娜 王保收 王 偉 楊攀娜 劉 玉

(開封中心醫院心胸外科，開封475000)

肺癌是一種常見的呼吸系統惡性腫瘤，是全球癌癥死亡的主要原因之一，其發病率和死亡率在我國惡性腫瘤中位居第一[1]。而非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占肺癌全球死亡病例的85%[2]。由于NSCLC確診時一般已經進入癌癥晚期，手術已經不再適合治療，且其預后差，5年和10年的存活率分別只有15%和7%，因此，尋找NSCLC的新型診斷方法和治療靶點迫在眉睫[3]。已有研究表明miRNA的異常表達與多種疾病包括癌癥的發生發展密切相關，且miRNA能夠通過與靶基因mRNA分子3′-UTR端特異性結合調控靶基因表達，進而參與調控包括NSCLC在內的多種腫瘤細胞的生長、運動及上皮間質轉化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)[4]。miR-105在人類癌癥中具有重要作用，其表達缺失與患者生存不良密切相關，且已有研究表明，miR-105-1低表達與NSCLC患者生存不良有關[5，6]。本文探討了miR-105-5p在NSCLC細胞A549的表達及miR-105-5p靶向MAPK1對NSCLC細胞A549的生長、運動和EMT的影響，以期為NSCLC的診斷和治療提供新的參考數據。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞及動物來源 人肺癌細胞株A549和人正常肺上皮細胞BEAS-2B購自中國科學院細胞文庫菌物保藏中心；裸鼠購自四川夏派森醫藥科技有限公司，許可證：SYXK(川)2017-203。

1.1.2主要試劑 RPMI1640培養液購自美國Gibco公司；胎牛血清購自德國PAN公司；Lipofectamine 2000 購于美國 Invitrogen 公司；mimic-NC、miR-105-5p mimic、MAPK1質粒購自上海生物工程有限公司；Dual Luciferase報告基因試劑盒購自美國 Promega 公司；MTT試劑盒購自于北京索寶科技有限公司。

1.2方法

1.2.1細胞培養及分組 將A549細胞菌株置于含10%熱滅活胎牛血清、青霉素(100 U/ml)、鏈霉素100 U/ml)的RPMI1640培養液中，在5% CO2、37℃培養?！?br>