蔡 莉 孫 力 胡菊萍
(湖北省第三人民醫(yī)院內分泌科,武漢430000)
糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管并發(fā)癥,1/3的糖尿病患者會并發(fā)DN,是引起糖尿病患者終末期腎病的主要原因。DN的發(fā)生涉及腎小球肥大、腎臟基底膜增厚、腎小球硬化以及間質纖維化等多種病理改變,其分子發(fā)病機制較為復雜[1]。MicroRNA (miRNA)是一類非編碼長度為21~23個核苷酸的單鏈RNA片段,主要在翻譯水平調控基因表達,在細胞增殖、分化、細胞凋亡以及免疫應答等一系列生理和病理過程中發(fā)揮重要的作用。目前已有文獻表明,多種miRNA在糖尿病的發(fā)生發(fā)展發(fā)揮重要作用[2]。Chen等[3]研究表明miR-21作為新型生物標志物用于DN診斷和治療。Liu等[4]研究發(fā)現(xiàn),與糖尿病患者相比,糖尿病腎病患者血清中miR-25-3p表達水平降低,提示miR-25-3p可能是一個重要的DN調節(jié)因子。然而,miR-25-3p在DN中的具體作用如何目前未見相關報道。因此,本研究主要探討miR-25-3p在DN患者腎臟的表達、作用及機制。
1.1材料
1.1.1組織 收集我院2015年1月~2019年1月期間50例DN患者的腎組織石蠟切片,入選患者經(jīng)腎活檢病理檢查確診為DN,對照組為同期保存的50例腎癌患者手術切除的腎臟病灶以遠的正常腎組織的石蠟切片。
1.1.2動物 4周齡SPF級正常小鼠(db/m小鼠)和糖尿病腎病模型小鼠(db/db小鼠)均購買于武漢大學動物實驗中心。
1.1.3主要試劑 293T細胞購于上海基免生物科技有限公司;miR-25-3p原位雜交試劑盒購自北京百奧萊博科技有限公司;DAB顯色試劑盒購自上海生工生物工程股份有限公司;RPMI1640基礎培養(yǎng)基、胎牛血清購于Gibco公司;……