抗人妊娠相關血漿蛋白A單抗的制備、鑒定及化學發光和膠體金檢測體系的建立①

張蘭蘭 于 洋 曹領改 魏德強

(東北林業大學生命科學學院，哈爾濱 150040)

人妊娠相關血漿蛋白A(proteinase pregnancy-associated plasma protein A，PAPP-A)是一種鋅結合金屬糖蛋白由胎盤分泌并直接進入母體血液循環[1，2]。從胚泡著床期開始，PAPP-A的濃度一直升高直至妊娠結束。PAPP-A是唐氏綜合征(down syndrome，DS)篩查的主要標志物之一，應在妊娠11～14周進行定量篩查[3]。在妊娠期間，循環的PAPP-A通過二硫鍵結合嗜酸性主要堿性蛋白(proMBP)形成異源四聚體(2:2)，即PAPP-A/ProMBP，分子量約為500 kD，PAPP-A單體的分子量約為200 kD[4]。與PAPP-A一樣，proMBP在妊娠期間在胎盤中合成，但其在妊娠過程中的作用尚未闡明。

孕婦血清PAPP-A水平與不良妊娠結果有關，如妊娠糖尿病、子癇前期、胎兒染色體異常、胎兒宮內生長受限、低出生體重、死產和早產[5-11]；在心血管疾病方面，PAPP-A亦可作為動脈粥樣硬化斑塊穩定程度的標志物[12,13]；研究發現，PAPP-A能夠特異性地切割3種胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBPs)[14,15]：IGFBP-2、IGFBP-4和IGFBP-5，其與細胞表面的糖胺聚糖緊密結合，在組織內起促進生長的酶的作用，在靠近IGF受體的位置釋放具有生物活性的IGF，且其是一種依賴膠原蛋白的原癌基因，所以PAPP-A可能作為腫瘤標志物或癌癥高差異表達的治療靶點[16-18]。Oncomine數據庫顯示PAPP-A在多種癌癥中高表達，見圖1。

本研究通過細胞融合技術結合高通量篩選的方法獲得可分泌高親和性、高特異性、高效價及高產量的抗PAPP-A雜交瘤細胞株，為雙抗體夾心檢測PAPP-A化學發光試劑盒及膠體金試紙條的研制和開發提供優良材料。同時通過對試劑盒分析性能的評估為 PAPP-A檢測試劑盒的臨床應用及……