過表達(dá)miR-125a-5p靶向STAT3抑制結(jié)腸癌體外生長和治療移植瘤裸鼠的研究①

高 蕾 曾俊濤 周真真 闞 娜 王小紅

(三亞中心醫(yī)院/海南省第三人民醫(yī)院消化內(nèi)科，三亞 572000)

結(jié)腸癌是常見的發(fā)生于直腸與乙狀結(jié)腸交界處的消化道惡性腫瘤，根據(jù)2017年全國腫瘤登記處資料顯示，我國結(jié)腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第3位，死亡率居惡性腫瘤第5位，且患者術(shù)后5 年生存率不足60%，急需新的治療手段提高患者生存率[1，2]。miR-125家族根據(jù)其轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)不同可分為miR-125a、miR-125b-1和miR-125b-2，其中miR-125a與卵巢癌、口腔癌、胰腺癌和頭頸部鱗癌等發(fā)生發(fā)展相關(guān)[3-6]。研究表明，miR-125a-5p在結(jié)腸癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，過表達(dá)miR-125a-5p可抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡[7]。但miR-125a-5p對結(jié)腸癌的作用機(jī)制及其在體內(nèi)的影響尚未明確。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3，STAT3)是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。研究表明STAT3能夠促進(jìn)結(jié)腸癌、胃癌和卵巢癌等腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移，并干擾腫瘤細(xì)胞凋亡及機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答[8]。本文主要研究過表達(dá)miR-125a-5p抑制結(jié)腸癌的作用機(jī)制及其對移植結(jié)腸癌裸鼠的影響及機(jī)制，為結(jié)腸癌的診斷和治療提供新的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料 人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞購自上海通蔚生物科技有限公司；RPMI1640培養(yǎng)液、胎牛血清和胰蛋白酶購自美國Hyclone公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒購自北京諾博萊德科技有限公司；Lipofectamine 2000 購自美國 Invitrogen 公司；單克隆抗體購自美國 Cell signal technology 公司；二抗購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；Transwell小室購自美國Corning公司；裸鼠購自四川大學(xué)華西醫(yī)院基因工程小鼠中心。

1.2方法

1.2.1靶基因預(yù)測 采用在線基因預(yù)測軟件miRanda、TarBase、TargetScan預(yù)測miR-125a-5p的靶基因。……