淫羊藿苷通過調(diào)節(jié)Nrf2/HO-1信號通路減輕大鼠腎缺血再灌注損傷①

陳明霞 張 恩 劉 芳 張娟紅 陸衛(wèi)紅 冷 偉

(陜西中醫(yī)藥大學，咸陽 712000)

腎缺血再灌注損傷(renal ischemia-reperfusion injury，RIRI)是指腎臟缺血一段時間后血液回流到組織而引起的組織損傷，導致細胞蛋白、脂質(zhì)和DNA嚴重損傷，引起氧化應激、炎癥，最終導致細胞凋亡和壞死。RIRI是術(shù)后急性腎功能不全的主要原因之一，對患者的預后不利，導致腎衰竭， 甚至危及生命。RIRI的病理生理過程復雜，目前尚無有效治療方法。因此本研究將開發(fā)新的用于RIRI治療的藥物并研究其分子機制。

淫羊藿又名仙靈脾、剛前，是一種治療骨質(zhì)疏松癥、心血管功能障礙、改善神經(jīng)功能和性功能的中草藥，為多年生草本植物[1]。《神農(nóng)本草經(jīng)》記載淫羊藿具有滋陰補陽、壯陽強身之效。淫羊藿苷(Icariin，ICA)為淫羊藿活性成分的提取物，具有強大的心血管保護功能，可抗動脈粥樣硬化、改善血管內(nèi)皮功能障礙[2-5]。研究發(fā)現(xiàn)，ICA對新生兒心肌細胞缺氧復氧損傷具有保護作用，但在RIRI中的作用研究鮮有報道[6]。因此，本研究借助RIRI大鼠模型，研究ICA對RIRI的保護作用，及其分子機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1動物 SPF級SD大鼠40只，雌雄不限，取自我院動物中心，許可證號：SYXK(川)2018-213，體質(zhì)量200～230 g。于(23±3)℃、濕度40%～70%條件下適應性飼養(yǎng)7 d，自由攝食飲水，晝夜節(jié)律12 h。

1.1.2試劑 ICA(110737-201516)購自中國食品藥品檢定研究院，含量94.2%；生理鹽水(merck-millipore，02-0780-00)；水合氯醛(經(jīng)科公司，JKLN006718)；染色液(古朵，GD-K4042)；PBS(Miltenyi，DXT-130-070-525)；ELISA試劑盒(westang，f00001)；MDA檢測試劑盒[jingkang，JK-(a)-2197]；SOD檢測試劑盒[jingkang，JK-(a)-2293]；TUNEL染色酶(Roche，11767305001)；蛋白酶K(源葉，S10085)；DAPI(源葉，S19119)；RIPA裂解液(源葉，R12135)；脫脂奶粉(源葉，S30865);抗體Cleaved Caspase-3(Asp175)Antibody #9661、Cleaved Caspase-9(Asp315)(D8I9E)Rabbit mAb #20750、NRF2(D1Z9C)XP? Rabbit mAb #12721、HO-1(E9H3A)Rabbit mAb(Mouse Specific)#86806、NQO1(A180)Mouse mAb #3187購自CST公司。

1.1.3儀器 生物安全柜(鑫貝西，11228 BBC86)；生物顯微鏡(意大利OPTIKA，B-510BF)；生化分析儀(科華卓越，LFF-LC-1817)；……