不同濃度菟絲子乙醇提取物對宮頸癌Hela細胞增殖和凋亡的影響

姚紅麗 姚英武 崔開宇 仝進毅 孫麗萍

菟絲子為抗腫瘤復方藥的主要成分，既往研究已經證實在菟絲子乙醇提取物的單體成分中可以通過直接或間接的方式起到免疫調節、抗氧化等作用[1-2]。目前有關中藥單體對宮頸癌Hela細胞抑制的研究較多[3-4]，但是有關菟絲子乙醇提取物的研究相對較少。本研究旨在評估不同濃度的菟絲子乙醇提取物對宮頸癌Hela細胞生物學行為的影響，現報道如下。

1 材料和方法

1.1 實驗細胞及藥物 人宮頸癌Hela細胞株購自中國科學院細胞庫，菟絲子乙醇提取物由浙江中醫藥大學中藥炮制實驗室制備并提供，生藥濃度為0.3 g/ml。

1.2 實驗試劑及儀器 DMEM細胞培養基與FBS購自上海浩然生物技術有限公司，MTT試劑盒和細胞周期檢測試劑盒購自上海優予生物科技有限公司，BCA蛋白定量檢測試劑盒與ECL化學發光液購自上海恒斐生物科技有限公司，Transwell培養小室購自上海銳賽生物技術有限公司。兔抗人Caspase-3單克隆抗體、兔抗人Bcl-2單克隆抗體、兔抗人GAPDH多克隆抗體、HRP標記的羊抗兔二抗購自北京百奧萊科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 菟絲子乙醇提取物的制備 菟絲子乙醇提取物由浙江中醫藥大學中藥炮制實驗室制備并提供，制備方法為：30 g菟絲子生品藥材經粉碎機粉碎，過40目篩，稱重定量后放入500 ml的95%乙醇內，浸泡30 min，回流提取3次，每次提取60 min，混合3次濾液并過濾得到醇提液，使用旋轉蒸發儀減壓回收乙醇，隨后在真空環境下（溫度60℃，真空度0.1 mpa）干燥3～4 d，將得到的乙醇提取物加入100 ml純水溶解，經0.2 μm濾菌膜抽提過濾，定容為100 ml放入棕色瓶中，封口膜密封避光保存，生藥濃度為0.1 g/ml?！?br>