機械激活性離子通道壓電蛋白Piezo1通過Notch信號通路介導牙周膜干細胞成骨分化作用機制研究

王林 王熙 季楠 李海梅 蔡世新

1.衡水市人民醫院口腔正畸修復科，衡水 053000；2.承德護理職業學院口腔教研室，承德 067000

牙齒發育不良是指患兒的上下牙齒對位不良，影響日常生活，通常采用正畸治療[1-2]，主要通過牙齒矯形器，給予適當的、持續的力量，使牙位移動，從而達到矯正效果[3-4]。既往研究[5-6]主要集中于分析牙周膜的作用，即牙周膜組織在持續應力刺激下可以不斷的形成新的骨性結構，促進牙槽骨的改建，從而達到矯形的目的，但是具體的機制尚未明了。

近年來，隨著人牙周膜干細胞（human periodontal ligament stem cells，hPDLSC）的分離成功，研究的熱點主要集中于牙周膜干細胞的成骨分化方面[7-8]。本研究以hPDLSC為研究對象，構建體外機械牽張應力細胞模型，以新型機械激活性離子通道壓電蛋白Piezo1為切入點，構建Piezo1蛋白的過表達載體和siRNA干擾載體，從過表達Piezo1蛋白和抑制Piezo1蛋白兩個方向上探究Piezo1蛋白在hPDLSC向成骨細胞分化的作用機制。以成骨基因堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、Runt相關基因2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、骨鈣素（os teocalcin，OCN）和骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP）為成骨的標志物[9-12]，探究Piezo1在促進hPDLSC成骨分化方面的作用。

1 材料和方法

1.1 hPDLSC的分離、培養

選取2016年1月1日—2018年1月1日就診于北京兒童醫院正畸科的8～14歲兒童因阻生而拔出的年輕恒牙的牙周膜組織為細胞來源，研究方案通過北京兒童醫院倫理委員會同意并通過，取得兒童直系監護人的知情同意授權書。納入標準：所有兒童均無活動性牙齒感染，細胞均來源于因阻生而拔出的恒牙牙周膜組織。排除標準：有明顯牙周炎或感染癥狀的患兒。……