miR-122-5p靶向PPP2R2A在嬰兒膽道閉鎖中的作用機制研究①

趙成基 李斌德 李 剛 王文赟 馬仲福 曾永娟 胡繼科

(蘭州大學第二醫(yī)院小兒外科，蘭州 730000)

膽道閉鎖(biliary atresia，BA)是一種僅見于嬰兒的膽管閉塞性疾病，其特征是膽道進行性梗阻、肝纖維化和炎癥，若BA患兒前期接受積極治療則可以存活至成年[1]。統(tǒng)計顯示，BA的發(fā)病有明顯的地區(qū)與種族差異，相較于北美和西歐，其在亞洲的發(fā)病率明顯較高[2,3]。在臨床上，肝移植仍然是提高BA患兒存活率的主要治療手段，但至今為止BA的發(fā)病機制尚不明確，增加了其治療的難度[4]。MicroRNA是內(nèi)源性的小分子非編碼RNA，可以通過與靶基因的3′非翻譯區(qū)(3′-UTR)結(jié)合調(diào)節(jié)靶基因的翻譯和表達，從而參與多種生物學過程[5-7]。Peng等[8]在2016年的報道中表明，miR-122-5p在BA患兒血清中的表達顯著上調(diào)，且Gao等[9]的研究顯示miR-122-5p參與了肝癌細胞的增殖、遷移和侵襲。因此，本研究通過構(gòu)建細胞模型，在體外探究miR-122-5p在BA中的作用機制，為后續(xù)的體內(nèi)實驗及臨床治療提供理論基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1臨床資料 收集2018年1月至2018年12月間到本院就診并診斷為的BA的10例患兒血清，選取同期在本院診斷為非BA的9例患兒血清，基本信息見表1。所有參與本研究的患兒均征得監(jiān)護人同意且通過我院倫理委員會的批準。

表1 BA及CC患兒臨床信息Tab.1 Clinical information in infants with BA and CC

1.1.2細胞與試劑 人源肝星形細胞LX-2購自武漢益普生物科技有限公司，貨號YCL-0560。胎牛血清和LipofectamineTM2000 Reagent購自Invitrogen公司；TRIzol和RNA提取試劑盒購自北京天健生物技術(shù)有限公司；SYBR Premix Ex TaqTMⅡ試劑盒、PrimescripTMRT reagent Kit、miRNA PrimescripTMRT reagent Kit購自TaKaRa公司；引物委托Sangon Biotech設(shè)計并合成；青霉素和鏈霉素購自上海源葉生物科技有限公司；……