廣西人群miR-29b-2基因rs1474742 A/C和rs12401619 C/G多態(tài)性分布特征及其與血脂的關(guān)系①

何永玲 王彩梅 楊 峻 曾志能 喬永超 韋葉生

(桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科，桂林 541000)

既往研究集中于探索編碼基因在疾病中的病理生理作用，隨著研究深入和技術(shù)進(jìn)步，非編碼基因在疾病中的角色逐漸被重視，成為研究熱點[1,2]。微小RNA(microRNA，miRNA)是由20～26個核苷酸構(gòu)成的高度保守的非編碼RNA，調(diào)控真核細(xì)胞的基因表達(dá)。研究表明，成熟的miRNA與靶基因mRNA的3′非編碼區(qū)結(jié)合，抑制靶基因翻譯或涉及靶基因降解影響靶基因表達(dá)[3]。近年心腦血管疾病的發(fā)病率急劇上升，是當(dāng)今全球高發(fā)病率及高病死率的疾病之一[4]。血脂是多種心腦血管疾病的重要發(fā)病基礎(chǔ)，早期預(yù)防和控制血脂異常是避免該類疾病發(fā)生的重要手段。miR-29b-2多態(tài)性與血脂的關(guān)系尚未見報道。因此，本文研究其多態(tài)性在不同人群間的差異，并進(jìn)一步探討其和血脂的關(guān)系，以期指導(dǎo)地區(qū)血脂防控，減少以血脂為發(fā)病基礎(chǔ)的疾病發(fā)生，為疾病易感性預(yù)防研究的基因位點選擇提供參考。

1 資料與方法

1.1資料 選取291名健康志愿者，均無心臟病史、中風(fēng)和血脂異常等相關(guān)疾病。年齡18～79歲，均來自廣西地區(qū)，且無血緣關(guān)系。本研究經(jīng)我院倫理委員會獲批準(zhǔn)，參與者知情同意。

1.2方法

1.2.1DNA抽提 取受試者靜脈血3 ml，DNA抽提試劑提取DNA，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2引物合成 NCBI數(shù)據(jù)庫檢索miR-29b-2基因rs1474742A/C和rs12401619C/G序列，Primer 3.0軟件設(shè)計引物。rs1474742A/C位點F：5′-AGAGGCCTGAAAGGAAGCTAAAATATACACTT-3′，R：5′-AGAGGCCTGAAAGGAAGCTAAAATATACACT-G-3′；rs12401619C/G位點F：5′-CAAGCACCCTATC-TGCCTGAGC-3′，R：5′-CAAGCACCCTATCTGCCTGA-GG-3′。

1.2.3基因型檢測 SNPscan法檢測基因型，連接酶連接反應(yīng)的高特異性識別SNP位點等位基因，在連接探針末段引入不同長度的非特異序列及通過連接酶加接反應(yīng)獲得位點對應(yīng)的不同長度連接產(chǎn)物，標(biāo)記熒光的通用引物對連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，熒光毛細(xì)管電泳對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離，GeneMapper軟件分析各SNP位點的基因型?！?br>