白花蛇舌草提取物通過Hippo-YAP信號通路抑制胰腺癌SW1990細胞上皮細胞間質轉化①

王自闖 張 娟 陳小永

(河南中醫藥大學第二臨床醫學院，鄭州 450002)

胰腺癌屬于惡性程度最高且預后最差的惡性腫瘤，目前臨床主要采用手術并輔以放化療等方法進行治療，但常規化療藥物治療效果不理想[1]。腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥性導致化療失敗，因而仍需尋找安全有效的治療藥物[2，3]。濕毒、熱毒及濕熱毒邪互結是誘發胰腺癌的主要原因，研究表明白花蛇舌草具有清熱解毒與利水消腫等功效，并可抑制多種腫瘤細胞增殖[4]。另有研究顯示細胞上皮間質轉化(epithelial mesenchymal transition，EMT)與腫瘤侵襲轉移、耐藥性等生物學過程密切相關[5]。關于白花蛇舌草提取物對胰腺癌細胞EMT的影響及作用機制的研究相對較少，因此本研究主要探討白花蛇舌草提取物在胰腺癌中的生物學效應，初步分析其對Hippo-YAP信號通路的影響及與胰腺癌細胞EMT的關系，為臨床合理用藥提供分子生物學依據。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗細胞 人胰腺癌SW1990細胞購自中國科學院上海生命科學院細胞資源中心。

1.1.2主要試劑與儀器 白花蛇舌草購自本院中草藥房，依據中國藥典且經本院中醫科驗證；胰蛋白酶(批號170306)、胎牛血清(FBS)(批號170815)、RPMI1640培養基(批號170523)均購自美國BD公司；AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡雙染試劑盒(批號170205)購自碧云天生物有限公司；兔抗人Yes相關蛋白(Yes-associated protein，YAP)(批號170603)、磷酸化Yes相關蛋白(p-YAP)抗體(批號170701)均購自美國CST公司；CCK-8檢測試劑盒(批號171003)均購自美國ThermoFisher公司；Hippo-YAP信號通路抑制劑XMU-MP-1(批號170920)購自美國MCE公司；兔抗E鈣黏附蛋白(E-cadherin)(批號170711)、兔抗N-鈣黏附蛋白(N-cadherin)(批號170612)、兔抗波形蛋白(Vimentin)(批號170621)、鼠抗α平滑肌動蛋白(α-SMA)(批號170615)、兔抗轉錄因子(Snail)(批號170618)單克隆抗體均購自美國Cell Signal公司；……