IL-2與IL-33佐劑增強銅綠假單胞菌外膜囊泡的免疫保護(hù)效果①

肖 非 曹二龍 卿 蕊 胡 智

(邵陽學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)院，邵陽 422000)

銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa，Pa)是一種廣泛存在于人體內(nèi)的革蘭氏陰性條件致病菌，可導(dǎo)致泌尿道、燒傷創(chuàng)面、下呼吸道等多種組織系統(tǒng)的嚴(yán)重感染[1]。研究表明，Pa是引起院內(nèi)和社區(qū)獲得性感染的主要原因之一，特別對于免疫系統(tǒng)較弱的人群，包括囊性纖維化以及手術(shù)治療患者，其對Pa感染更為敏感[2]。而隨著多重耐藥菌株乃至泛耐藥菌株的出現(xiàn)，Pa相關(guān)感染的治療難度也越來越大，常規(guī)抗生素藥物已無法滿足目前的治療需求[3]。因此，開發(fā)相關(guān)疫苗是預(yù)防Pa流行性暴發(fā)的有效手段[4]。

外膜囊泡(outer membrane vesicles，OMVs)是Pa在感染過程中分泌釋放到外膜的重要成分，具有多種生物學(xué)功能，其對于Pa的定植以及生存至關(guān)重要[5]。既往研究表明，腦膜炎奈瑟菌、幽門螺桿菌、肺炎克雷伯菌等多種革蘭氏陰性菌的OMVs均具有較強的免疫原性，能夠在動物感染模型中提供保護(hù)性免疫[6-8]。最新研究證實Pa-OMVs也具有上述作用[9]。盡管如此，Pa-OMVs作為免疫抗原仍然存在效力較弱、持續(xù)時間較短等問題。因此，尋找合適的疫苗佐劑來增強OMVs的免疫效果十分必要。本研究通過明確IL-2、IL-33佐劑對Pa-OMVs抗感染免疫保護(hù)作用的影響，以期為Pa臨床疫苗的開發(fā)提供新的思路。

1 材料與方法

1.1材料 銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC-27853)購自美國ATCC公司；IL-2、IL-33佐劑購自BD Pharmingen公司；6～8周雌性BALB/c小鼠購自湖南斯萊克景達(dá)有限公司(SCXK湘2016-0002)；Goat anti-mouse IgG、IgG1、IgG2a、IgA二抗購自Proteintech公司；Mouse IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12 ELISA試劑盒購自Invitrogen公司；Mouse CD4、CD8 蛋白ELISA試劑盒購自武漢塞培生物科技有限公司；CCK-8試劑盒購自北京碧云天生物技術(shù)有限公司；……