TRIM31過表達改善脂多糖誘導下神經細胞的炎癥損傷①

王 濤 梁日初 周 佳 羅 煒

(南華大學附屬第二醫院神經外科,衡陽 421001)

阿爾茲海默癥(Alzheimer′s disease,AD)和帕金森癥(Parkinson′s disease,PD)等神經退行性疾病嚴重威脅人類健康，其發病原因復雜，機制尚未完全明確。炎癥小體介導的炎癥途徑與中樞神經系統疾病的發生密切相關[1]。NOD樣受體蛋白3(nod-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎癥小體是機體固有免疫應答的重要組成部分，其過度激活可通過活化caspase-1持續地將無活性的IL-1β前體剪切為成熟IL-1β，激活下游信號通路產生大量的炎癥因子，引起神經炎癥反應，促進細胞凋亡，導致大腦病變[2]。E3泛素連接酶31(TRIM31)是TRIM家族成員，可通過對特定靶分子進行泛素化修飾和降解，參與細胞增殖、分化、癌變、自噬、凋亡等多種細胞生物學過程[3]。目前關于TRIM31的研究較少且主要集中于癌癥研究，如胰腺癌、大腸癌、膽囊癌和肝癌等，關于其與神經退行性疾病的研究鮮有報道[4-7]。研究報道，TRIM31可通過促進NLRP3蛋白酶體泛素化降解，抑制NLRP3炎癥小體活化，推測TRIM31可能通過抑制NLRP3炎癥小體活化改善神經細胞炎癥損傷[8]。本研究擬采用LPS誘導PC12細胞建立體外神經細胞炎癥損傷模型，探討TRIM31對PC12細胞損傷的保護作用及機制，為神經退行性疾病治療提供新思路。

1 材料與方法

1.1材料 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤PC12細胞株由上海中科院細胞庫提供；LPS購自美國Sigma公司；DMEM培養基和胎牛血清購自美國Gibco公司；TRIM31過表達質粒pcDNA3.1-TRIM31及其陰性對照質粒pcDNA3.1-NC均由漢恒生物科技(上海)有限公司構建；LipofectamineTM2000購自美國Invitrogen公司；反轉錄試劑盒、實時定量PCR試劑盒購自美國Thermo Fisher公司；IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18 ELISA試劑盒購自上海卡努生物科技有限公司；……