睪酮人工抗原的合成及酶聯免疫方法的建立

高 璐，孫嘉笛，王利平，紀 劍，孫秀蘭

(江南大學 食品學院 食品科學與工程國家重點實驗室，江蘇 無錫 214122)

睪酮(testosterone，T)是哺乳動物體內常見的具有性激素作用的一種類固醇激素，具有提高生殖器官的發育、調節生殖代謝過程的作用[1]。包括睪酮在內的性激素具有較強的蛋白質同化作用，使動物肉質品質得到改善，提高飼料的轉化效率和出欄率[2-3]，經常被添加在畜禽等飼料中，給商家帶來極高的養殖效益。激素濫用導致的動物及人的健康問題越來越嚴重[4]，長期攝入激素會導致人體內分泌紊亂，損害肝、腎等器官，從而大大增加致癌、致畸的風險[5-7]。

針對動物源食品中激素超標的現象，我國已出臺了相關的法律法規，如《關于嚴禁非法使用獸藥的通知》《獸用處方藥和非處方藥管理辦法》《中華人民共和國農業部公告第235號》[8-9]和《食品中獸藥最大殘留限量》[10]等。國際上，歐盟理事會第96/22/EC號指令禁止以促進生長為目的在肉食性動物中添加自然或人工合成的性激素，以確保歐盟內的人類健康保護[11]。如今，國內外社會仍存在非法添加包括睪酮在內的性激素事件，為了確保人類的食品安全和健康，建立相關簡便、靈敏的檢測技術是當務之急。

目前，睪酮傳統的理化檢測方法包括液相色譜-質譜(LC-MS)、氣相色譜-串聯質譜(GC-MS/MS)、毛細管電泳法、熒光光譜分析法和拉曼光譜法等方法[12-14]。其中，LC-MS有較高的分離能力和鑒別能力，電泳法和熒光光譜法所需樣品量和試劑消耗量少，拉曼光譜法對樣品前處理極為簡單[15]。……