高效液相色譜法測定乳清蛋白中的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白及其改性降敏

趙倩如，朱麗英，趙權宇，江 凌

(1.南京工業大學 生物與制藥工程學院，江蘇 南京 211800；2.南京工業大學 化學與分子工程學院，江蘇 南京 211800；3.南京工業大學 食品與輕工學院，江蘇 南京 211800)

近年來,過敏性疾病的發病率不斷增加，食物過敏已成為一個重要的公共衛生問題。牛乳過敏(CMA)是一種最常出現的食物過敏反應[1]，占所有確診食物過敏病例的9%[2]，嬰兒牛乳過敏發病率從0.3%到7.5%不等[3]。牛乳過敏是由牛乳中的致敏蛋白引起的一種不良反應，主要由免疫球蛋白介導的免疫反應，可引起過敏性鼻炎、哮喘、濕疹、腹瀉、胃腸出血等癥狀，甚至會導致過敏性休克，嚴重危及嬰幼兒的生命[4]。牛乳中最具有營養價值的蛋白質是乳清蛋白，乳清蛋白中主要的致敏蛋白是α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。

目前檢測乳品中過敏原的方法主要有3種：高效液相色譜法(HPLC)、電泳法、免疫化學法。最常見的蛋白電泳方法是十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)[5-7]和毛細管電泳法[8]以及酶聯免疫吸附(ELISA)法[9-10]通過抗原抗體特異性結合可以測定過敏原的免疫反應性(與免疫球蛋白結合的能力)。但以上方法在測定β-乳球蛋白時都具有一定的局限性,如電泳技術在定量方面有很大的不足；毛細管電泳重復性差，容易堵塞；ELISA方法對試劑的選擇性高。牛乳中蛋白質種類很多，很難有效檢測，以上技術局限性限制了這些方法在實踐中的推廣應用。反相高效液相色譜法是分析乳清蛋白成分的有效方法之一，與其他檢測方法相比具有分辨率和回收率高、操作簡便、重復性好等優勢。……