載單寧酸鐵和紫杉醇相變型納米粒用于體外超聲顯像及治療視網膜母細胞瘤

袁 勛，鞠豐翼，張 玙，喬 斌，王志剛，杜之渝

(1.重慶醫科大學附屬第二醫院眼科，重慶 400010；2.重慶明達眼科醫院眼科，重慶 400010；3.重慶醫科大學超聲分子影像重慶市重點實驗室，重慶 400010)

視網膜母細胞瘤(retinoblastoma, Rb)為兒童最常見原發性眼內惡性腫瘤[1-2]，目前臨床常用影像學檢查方法有CT、MRI、超聲及光學相干斷層掃描(ophthalmic optical coherence tomography, OCT)等，治療方法包括化學治療(簡稱化療)、放射治療及手術等，各有其不足[3-5]。納米技術用于治療腫瘤高效而安全[6]。單寧酸(tannic acid, TA)為多酚化合物,可通過綠色合成途徑與Fe3+合成具有強黏附能力的光熱材料單寧酸鐵(FeIII-tannic acid, FeⅢTA)[7]。全氟戊烷(perfluoropentane, PFP)沸點低(29℃)且易相變，可促進藥物釋放，同時增強超聲顯像效果[8]。紫杉醇(paclitaxelaclitaxel, PTX)為常用化療藥物，將其與納米技術結合可獲得更高運載效率，提高腫瘤部位藥物濃度，增強治療效果[9-10]。本研究以FeⅢTA、PTX、PFP相結合制備光響應性PLGA納米粒，并體外評估其超聲顯像及治療Rb效果。

1 材料與方法

1.1 主要材料 羥基端乳酸/羥基乙酸共聚物(PLGA-COOH，分子量12 000 Da，聚合比50∶50，上海麗昂化學有限公司)，PTX(上海金穗生物科技有限公司)，PFP(Strem Chemicals公司)，TA(Sigma-Aldrich公司)，六水三氯化鐵[Iron(Ⅲ)chloride hexahydrate,FeCl3，賽默飛世爾科技有限公司]，聚乙烯醇(polyvinyl alcohol，PVA，Sigma公司)以及異丙醇、二氯甲烷、瓊脂糖、RPMI1640培養基和胎牛血清、細胞增殖及毒性檢測試劑盒CCK-8(上海紀寧實業有限公司)、活/死細胞雙染試劑盒(熒光探針細胞染色，上海復申生物科技有限公司)。Y79細胞系(人Rb細胞系)、人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)由重慶醫科大學超聲影像學研究所提供。

1.2 主要儀器 Sonics & Materials聲振儀，磁力攪拌器，低溫離心機，Olympus光學顯微鏡，Zeta SIZER3000HS馬爾文粒……