毒胡蘿卜素抑制卵巢癌細胞的增殖、遷移和侵襲并誘導細胞凋亡

沈帆，王麗麗，趙楊

（中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院婦科，沈陽 110001）

卵巢上皮癌的死亡率居婦科腫瘤的首位［1］。由于臨床癥狀不典型，缺乏有效的篩查手段，導致大多數(shù)患者就診時已近晚期。卵巢上皮癌術后易復發(fā)、轉移，導致預后較差［2-3］，晚期患者平均5年存活率僅約30%［4］。因此，亟需尋找治療卵巢上皮癌的有效藥物。

肌漿/內質網(wǎng)Ca2+-ATP酶（sarco/endoplasmic reticulum Ca2+ATPase，SERCA）是一種位于肌漿/內質網(wǎng)膜上的細胞內Ca2+泵。SERCA介導Ca2+從細胞質向肌漿/內質網(wǎng)轉運，是維持細胞內Ca2+穩(wěn)態(tài)的關鍵［5］。有研究［6］表明，脂肪肉瘤中SERCA2過表達能夠激活細胞存活途徑。SERCA2在結直腸癌細胞中的過度表達驅動增殖和遷移，在結直腸癌發(fā)生中起關鍵作用［7］。卵巢癌細胞中SERCA2表達水平高于正常卵巢表面上皮細胞［8］，提示SERCA2可能促進卵巢癌的發(fā)生發(fā)展。研究［9-10］表明，抑制SERCA表達導致內質網(wǎng)鈣儲存池的耗盡，并使細胞內Ca2+水平升高，可能導致內質網(wǎng)和線粒體受損，從而導致細胞凋亡。毒胡蘿卜素是SERCA2的特異性不可逆抑制劑，通過干擾內質網(wǎng)內Ca2+穩(wěn)態(tài)誘導癌細胞凋亡［11］。本研究擬探討毒胡蘿卜素在卵巢癌細胞中的作用及其潛在作用機制。

1 材料與方法

1.1 細胞培養(yǎng)及處理

本研究采用人卵巢癌細胞系OVCAR3和A2780。OVCAR3細胞在RPMI 1640培養(yǎng)基（美國HyClone公司）中培養(yǎng)，A2780細胞在DMEM培養(yǎng)基（美國HyClone公司）中培養(yǎng)。培養(yǎng)基中添加1%青霉素/鏈霉素和10%胎牛血清。細胞在5% CO2、37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育。以毒胡蘿卜素濃度0.031 25～1.0 μmol/L（OVCAR3）和0.062 5～2.0 μmol/L（A2780）進行細胞活力測定，篩選出最佳作用濃度（OVCAR3：0.062 5 μmol/L，A2780：0.25 μmol/L）進行后續(xù)實驗，以加入DMSO為對照組。

1.2 細胞活力測定（MTT法）

收集并計數(shù)細胞，接種在96孔板中（3 000細胞/孔）。……