STK17A基因經TGF-β/SMAD信號通路調控宮頸癌細胞增殖凋亡及侵襲的機制研究

劉海霞 宋 梅 戴淑鳳

(青島市第三人民醫院,青島 266041)

宮頸癌是當前世界范圍內女性發病率第二的腫瘤，持續感染高危型人類乳頭瘤病毒是引起該病的主要原因[1,2]。巴氏涂片以及液基薄層細胞學檢查(thinprep cytology test,TCT)是近年來宮頸癌篩查的一種低成本且操作簡便的篩查手段[3]。盡管宮頸癌診斷和治療手段不斷改進，但是晚期宮頸癌患者的5年生存率仍然很低，因此，對宮頸癌進展的潛在分子機制進行研究并且提供有效的治療方法十分重要。絲氨酸/蘇氨酸激酶17A (serine/threonine kinase 17A,STK17A)是死亡相關蛋白家族(death-associatedprotein，DAP)中的一員且DAP家族中成員被證實在多種癌癥中的表達受到限制，同時與多個細胞凋亡和自噬相關通路有關[4-6]。近年來關于STK17A在膠質母瘤、大腸癌、睪丸癌等癌癥進展中的研究也被逐漸發現[7-9]。但是關于其在宮頸癌中的作用尚不明確。轉化生長因子β (transforming growth factor beta,TGF-β)/SMAD通路是癌變過程中的重要調節通路，研究證實其在宮頸鱗癌中被激活[10]。在前人研究基礎上，本研究旨在明確STK17A在宮頸癌中的價值并探討其具體作用途徑。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1材料與試劑 pcDNA3.1(+)質粒購自Invitrogen；基因組DNA提取試劑盒、Lipofectamine 3000試劑盒、總RNA提取試劑盒、TransScriptⅡGreen One-Step qRT-PCR SuperMix試劑盒、CCK-8試劑盒購自賽默飛世爾；人子宮頸上皮細胞及Hela、SiHa和C-33A宮頸鱗癌細胞系購自拜力生物；TGF-β/SMAD通路抑制劑SB-431542購自美國Selleck；蘇木素染液、伊紅染液、DAB染液購自北京索萊寶；Western blot中所有抗體購自ABCAM；RIPA細胞裂解液；Matrigel膠、Transwell小室購自上海復申生物科技有限公司；Anexin-V-FITC染液、PI染液購自銳賽生物；BD FACSCALIBUR 流式細胞儀德國貝克曼；倒置顯微鏡購自奧林巴斯；……